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H3N2亚型猪流感病毒HA1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 司维 谭茜宇 +3 位作者 徐玲芸 罗廷荣 李晓宁 顾金燕 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1739-1749,共11页
【目的】获得免疫原性良好的H3N2亚型猪流感病毒(Swine influenza virus, SIV)血凝素(haemagglutinin, HA)头部结构域HA1蛋白,并制备特异性多克隆抗体,用于HA1蛋白的鉴定及功能研究。【方法】本研究通过扩增A型SIV(A/swine/Guangdong/04... 【目的】获得免疫原性良好的H3N2亚型猪流感病毒(Swine influenza virus, SIV)血凝素(haemagglutinin, HA)头部结构域HA1蛋白,并制备特异性多克隆抗体,用于HA1蛋白的鉴定及功能研究。【方法】本研究通过扩增A型SIV(A/swine/Guangdong/04/2005(H3N2))毒株的HA1片段,采用同源重组方法构建原核表达载体pET-28a(+)-H3N2-HA1,经PCR和测序鉴定正确后将重组阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。对HA1蛋白表达条件(诱导温度、诱导时间、IPTG浓度)进行优化,通过镍柱亲和层析法纯化蛋白。将获得的重组蛋白与QuickAntibody-Mouse3W佐剂混合后以肌内注射方式免疫BALB/c小鼠,制备H3N2亚型SIV HA1蛋白多克隆抗体,并通过ELISA、Western blotting和免疫荧光试验(IFA)对多克隆抗体的效价、反应性及特异性进行鉴定。【结果】本研究成功构建原核表达载体pET-28a(+)-H3N2-HA1;H3N2亚型SIV HA1重组蛋白在1 mmol/L IPTG 26℃诱导10 h时表达量最高,且主要以包涵体形式表达,蛋白分子质量大小约为39.5 ku。成功制备5株H3N2亚型SIV HA1蛋白多克隆抗体,效价均为1∶1 638 400。Western blotting和IFA鉴定结果显示,制备的多克隆抗体可特异性识别真核表达的H3N2亚型SIV HA1蛋白,与H1N1亚型SIV、H7N9亚型禽流感病毒(AIV)等其他亚型流感病毒的HA1蛋白均不发生反应,具有良好的反应性及特异性。【结论】本研究成功表达并纯化了免疫原性良好的H3N2亚型SIV HA1蛋白,制备了反应性及特异性良好的鼠源多克隆抗体,为深入研究H3N2亚型SIV HA1蛋白的生物学功能提供了重要工具。 展开更多
关键词 猪流感病毒(SIV) H3N2亚型 HA1蛋白 原核表达 多克隆抗体
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浅析拉玛泽生产呼吸法联合持续硬膜外麻醉对产妇分娩疼痛和分娩结局的影响 被引量:7
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作者 顾金燕 《当代医药论丛》 2017年第21期150-151,共2页
目的:分析拉玛泽生产呼吸法联合持续硬膜外麻醉对产妇分娩疼痛和分娩结局的影响。方法 :将2016年6月至2017年2月期间在常熟市中医院进行分娩的120例产妇随机分为观察组和对照组(60例/组)。为对照组产妇仅使用持续硬膜外麻醉进行分娩镇痛... 目的:分析拉玛泽生产呼吸法联合持续硬膜外麻醉对产妇分娩疼痛和分娩结局的影响。方法 :将2016年6月至2017年2月期间在常熟市中医院进行分娩的120例产妇随机分为观察组和对照组(60例/组)。为对照组产妇仅使用持续硬膜外麻醉进行分娩镇痛,为观察组产妇使用拉玛泽生产呼吸法联合持续硬膜外麻醉进行分娩镇痛。分娩结束后,对比两组产妇在分娩过程中的疼痛程度和自然分娩率。结果 :与对照组产妇相比,观察组产妇中VAS评分为0~3分产妇所占的比例较高,VAS评分为4~10分产妇所占的比例较低(P<0.05)。观察组产妇的自然分娩率高于对照组产妇(P<0.05)。结论:为产妇联合使用拉玛泽生产呼吸法和持续硬膜外麻醉进行分娩镇痛可显著减轻其在分娩过程中的疼痛,提高其自然分娩率。 展开更多
关键词 拉玛泽生产呼吸法 持续硬膜外麻醉 分娩镇痛 分娩结局
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衣原体、支原体性宫颈炎采用干扰素栓与阿奇霉素联合治疗的临床效果 被引量:4
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作者 顾金燕 《北方药学》 2014年第11期81-82,共2页
目的:观察衣原体、支原体性宫颈炎采用干扰素栓与阿奇霉素联合治疗的临床效果。方法:选取我院妇科门诊的52例衣原体、支原体性宫颈炎患者为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组各26例,对照组给予阿奇霉素治疗,观察组在此基础上联合干... 目的:观察衣原体、支原体性宫颈炎采用干扰素栓与阿奇霉素联合治疗的临床效果。方法:选取我院妇科门诊的52例衣原体、支原体性宫颈炎患者为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组各26例,对照组给予阿奇霉素治疗,观察组在此基础上联合干扰素栓治疗。结果:连续治疗2个疗程后,观察组总有效率为96.1%;对照组总有效率为80.8%(P<0.05);两组患者停药2个月后均进行随访,观察组复发率为3.8%,对照组为15.4%。结论:干扰素栓与阿奇霉素联合治疗衣原体、支原体性宫颈炎疗效确切,复发率低,可以大力推广。 展开更多
关键词 衣原体 支原体 干扰素栓 阿奇霉素
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纳米羟基磷灰石的镉离子吸附性能 被引量:6
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作者 石和彬 钟宏 +3 位作者 刘羽 田兴 顾金燕 鲁斌 《武汉工程大学学报》 CAS 2012年第5期35-41,共7页
以硝酸钙、磷酸、氨水为原料,采用共沉淀法合成了纳米羟基磷灰石粉体.以硝酸镉水溶液作为模拟废水,用Visual MINTEQ软件对模拟废水的溶液化学特征进行了计算,主要研究了溶液的初始pH值、反应时间以及镉离子(Cd2+)初始浓度等因素对纳米... 以硝酸钙、磷酸、氨水为原料,采用共沉淀法合成了纳米羟基磷灰石粉体.以硝酸镉水溶液作为模拟废水,用Visual MINTEQ软件对模拟废水的溶液化学特征进行了计算,主要研究了溶液的初始pH值、反应时间以及镉离子(Cd2+)初始浓度等因素对纳米羟基磷灰石的镉离子吸附量的影响.实验结果表明,纳米羟基磷灰石的镉离子吸附性能在溶液初始pH为4~9的范围内比较稳定,其去除水溶液中镉离子的过程符合准二级动力学模型,并且与朗缪尔等温吸附和弗伦德里希等温吸附均表现出了较高的相关性,反映了纳米羟基磷灰石吸附水溶液中镉离子的反应以离子交换作用为主的特点.纳米羟基磷灰石不仅镉离子吸附容量大,而且初期吸附速率很快,是一种性能良好的环境矿物吸附材料. 展开更多
关键词 纳米羟基磷灰石 镉离子吸附量 准二级动力学反应 离子交换
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有效利用种子资源开展种植活动探析 被引量:1
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作者 顾金燕 《成才之路》 2018年第7期71-71,共1页
现阶段,不少农村幼儿园都存在教育经费紧缺、教玩具和操作材料缺乏等一系列问题。因此,农村幼儿园应根据区域活动理念,结合本园的特有环境,从实际出发,挖掘一切可以利用的乡土资源,开展具有本土特色的活动。文章对有效利用种子资源开展... 现阶段,不少农村幼儿园都存在教育经费紧缺、教玩具和操作材料缺乏等一系列问题。因此,农村幼儿园应根据区域活动理念,结合本园的特有环境,从实际出发,挖掘一切可以利用的乡土资源,开展具有本土特色的活动。文章对有效利用种子资源开展种植活动进行研究。 展开更多
关键词 幼儿园 种子资源 种植活动 区域活动 乡土资源
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