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人类胚胎干细胞来源的心肌细胞模型的建立及系统鉴定方案
被引量：
2
1
作者
陈欣欣
刘珠媛
+1 位作者
顾寰宇
周蕾
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期378-386,共9页
心肌细胞是研究心血管疾病的重要工具之一,但是人类心肌细胞较难获得和培养.为人类胚胎干细胞诱导分化成心肌细胞提供一个有用的实验方法和鉴定方案.人胚胎干细胞以其多向分化的特性为体外研究提供了细胞资源.在人胚胎干细胞诱导分化为...
心肌细胞是研究心血管疾病的重要工具之一,但是人类心肌细胞较难获得和培养.为人类胚胎干细胞诱导分化成心肌细胞提供一个有用的实验方法和鉴定方案.人胚胎干细胞以其多向分化的特性为体外研究提供了细胞资源.在人胚胎干细胞诱导分化为心肌细胞的过程中,通过荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测发现,在分化过程中干细胞标记物Cripto,Dnmt3b,Wnt3,KIF4,Oct4,SOX2和Nanog表达下降,心肌特异性结构蛋白cTnT和α-actinin以及心脏前体细胞分化标记物Nkx2.5表达上升.分化完成后用免疫荧光检测心肌特异性结构蛋白Tnn T2和α-actinin,通过分析Tnn T2阳性细胞的比例,α-actinin阳性细胞的比例,以及Tnn T2和α-actinin双阳性细胞的比例发现,在所提出的胚胎干细胞诱导分化体系中,三者比例分别为90.80%,91.00%,90.91%,表明在此诱导分化条件下人胚胎干细胞可成功分化成为心肌细胞.成功建立了人胚胎干细胞来源的心肌细胞模型以及基于标记物荧光定量PCR及免疫荧光系统检测的鉴定方案,为未来心血管疾病的基础研究及心脏毒性药物检测奠定了一定的基础.
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关键词
人胚胎干细胞
细胞分化
心肌细胞
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职称材料
血浆外泌体通过微小RNA-25-3p对心肌纤维化影响的初步研究
被引量：
1
2
作者
顾寰宇
李姗姗
+2 位作者
王芹
姜敏
王春
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第11期1515-1522,共8页
目的:初步明确血浆外泌体及其内容物微小RNA-25-3p(microRNA-25-3p,miR-25-3p)对心肌纤维化的影响。方法:分别提取10只健康C57BL/6小鼠(对照组)和10只心肌梗死术后小鼠(心肌纤维化模型组)的血浆外泌体。利用电镜、纳米跟踪颗粒分析、标...
目的:初步明确血浆外泌体及其内容物微小RNA-25-3p(microRNA-25-3p,miR-25-3p)对心肌纤维化的影响。方法:分别提取10只健康C57BL/6小鼠(对照组)和10只心肌梗死术后小鼠(心肌纤维化模型组)的血浆外泌体。利用电镜、纳米跟踪颗粒分析、标志物蛋白检测鉴定外泌体;实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测两种外泌体对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导下的小鼠心脏成纤维细胞纤维化水平的影响;q PCR检测两种外泌体内miR-25-3p的水平;Western blot和免疫荧光染色检测miR-25-3p模拟物和抑制物对心脏成纤维细胞增殖和向肌成纤维细胞分化能力的影响。结果:对照组血浆外泌体可使AngⅡ诱导增加的纤维化相关指标下调,而心肌纤维化模型组外泌体则失去这一功能且其内miR-25-3p含量更高;miR-25-3p模拟物上调纤维化相关指标,而miR-25-3p抑制物则表现相反作用。结论:健康小鼠血浆外泌体可改善心肌纤维化;血浆外泌体内的miR-25-3p上调可促进心肌纤维化发生。
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关键词
心肌梗死
心肌纤维化
血浆外泌体
miR-25-3p
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职称材料
题名
人类胚胎干细胞来源的心肌细胞模型的建立及系统鉴定方案
被引量：
2
1
作者
陈欣欣
刘珠媛
顾寰宇
周蕾
机构
南京医科大学第一附属医院心脏内科
出处
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期378-386,共9页
基金
国家自然科学基金资助项目(81370280
81570332)
文摘
心肌细胞是研究心血管疾病的重要工具之一,但是人类心肌细胞较难获得和培养.为人类胚胎干细胞诱导分化成心肌细胞提供一个有用的实验方法和鉴定方案.人胚胎干细胞以其多向分化的特性为体外研究提供了细胞资源.在人胚胎干细胞诱导分化为心肌细胞的过程中,通过荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测发现,在分化过程中干细胞标记物Cripto,Dnmt3b,Wnt3,KIF4,Oct4,SOX2和Nanog表达下降,心肌特异性结构蛋白cTnT和α-actinin以及心脏前体细胞分化标记物Nkx2.5表达上升.分化完成后用免疫荧光检测心肌特异性结构蛋白Tnn T2和α-actinin,通过分析Tnn T2阳性细胞的比例,α-actinin阳性细胞的比例,以及Tnn T2和α-actinin双阳性细胞的比例发现,在所提出的胚胎干细胞诱导分化体系中,三者比例分别为90.80%,91.00%,90.91%,表明在此诱导分化条件下人胚胎干细胞可成功分化成为心肌细胞.成功建立了人胚胎干细胞来源的心肌细胞模型以及基于标记物荧光定量PCR及免疫荧光系统检测的鉴定方案,为未来心血管疾病的基础研究及心脏毒性药物检测奠定了一定的基础.
关键词
人胚胎干细胞
细胞分化
心肌细胞
Keywords
human embryonic stem cell
cell differentiation
cardiomyocytes
分类号
Q25 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
血浆外泌体通过微小RNA-25-3p对心肌纤维化影响的初步研究
被引量：
1
2
作者
顾寰宇
李姗姗
王芹
姜敏
王春
机构
南京大学医学院附属鼓楼医院老年科
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第11期1515-1522,共8页
基金
国家自然科学青年基金(81900220)
南京市卫生科技发展专项资金项目计划(YKK19052)。
文摘
目的:初步明确血浆外泌体及其内容物微小RNA-25-3p(microRNA-25-3p,miR-25-3p)对心肌纤维化的影响。方法:分别提取10只健康C57BL/6小鼠(对照组)和10只心肌梗死术后小鼠(心肌纤维化模型组)的血浆外泌体。利用电镜、纳米跟踪颗粒分析、标志物蛋白检测鉴定外泌体;实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测两种外泌体对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导下的小鼠心脏成纤维细胞纤维化水平的影响;q PCR检测两种外泌体内miR-25-3p的水平;Western blot和免疫荧光染色检测miR-25-3p模拟物和抑制物对心脏成纤维细胞增殖和向肌成纤维细胞分化能力的影响。结果:对照组血浆外泌体可使AngⅡ诱导增加的纤维化相关指标下调,而心肌纤维化模型组外泌体则失去这一功能且其内miR-25-3p含量更高;miR-25-3p模拟物上调纤维化相关指标,而miR-25-3p抑制物则表现相反作用。结论:健康小鼠血浆外泌体可改善心肌纤维化;血浆外泌体内的miR-25-3p上调可促进心肌纤维化发生。
关键词
心肌梗死
心肌纤维化
血浆外泌体
miR-25-3p
Keywords
myocardial infarction
cardiac fibrosis
plasma exosome
miR-25-3p
分类号
R542.23 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人类胚胎干细胞来源的心肌细胞模型的建立及系统鉴定方案
陈欣欣
刘珠媛
顾寰宇
周蕾
《上海大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
血浆外泌体通过微小RNA-25-3p对心肌纤维化影响的初步研究
顾寰宇
李姗姗
王芹
姜敏
王春
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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