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内蒙古地区牛呼吸道感染的主要病原菌及支原体分离鉴定及耐药性和毒力基因检测
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作者 尹凯雯 毛伟 +9 位作者 曹金山 孙月 董海燕 韩凯凡 王博 李培锋 张志丹 樊宏亮 郭宇 赵红霞 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第3期1328-1341,共14页
【目的】了解内蒙古地区某规模化牧场牛呼吸道疾病主要致病菌及支原体的感染情况、耐药性及毒力基因携带情况,为该牧场牛呼吸道疾病的防治提供用药依据。【方法】采集死亡牛的肺脏组织进行病原菌分离培养、生化鉴定、16S rRNA基因测序、... 【目的】了解内蒙古地区某规模化牧场牛呼吸道疾病主要致病菌及支原体的感染情况、耐药性及毒力基因携带情况,为该牧场牛呼吸道疾病的防治提供用药依据。【方法】采集死亡牛的肺脏组织进行病原菌分离培养、生化鉴定、16S rRNA基因测序、PCR鉴定、药敏试验、耐药基因及毒力基因检测等。【结果】分离得到在TSA平板上显示圆润、灰白色、透明或半透明菌落,特异性基因及血清型基因扩增符合A型多杀性巴氏杆菌、A6型溶血性曼氏杆菌预期条带的细菌各1株;在PPLO固体培养基出现肉眼可观察的小气泡,镜检呈煎蛋样,特异性基因扩增符合预期条带的牛支原体1株。16S rRNA测序比对结果发现,3种病原体分别与多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌和牛支原体相似性在99%以上。耐药性及毒力基因检测结果显示,多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌对氧氟沙星高度敏感,对卡那霉素、阿米卡星、庆大霉素等抗菌药物敏感;多杀性巴氏杆菌携带strA、strB、tetA、tetB、qnrA、bla ROB耐药基因,携带exbB、exbD、ompA、psl等22种毒力基因;溶血性曼氏杆菌携带strA、strB耐药基因,携带gcp、gs60、lktC、tbpB 4种毒力基因;牛支原体对链霉素、红霉素、克林霉素耐药,对环丙沙星、阿米卡星和卡那霉素中介,对庆大霉素、氧氟沙星、恩诺沙星、四环素敏感,携带strA、strB、mph、msr-E耐药基因,携带VspX、VspY2、VpmA、P81毒力基因。【结论】该牧场病死牛呼吸道疾病为多杀性巴氏杆菌、溶血性曼氏杆菌及牛支原体混合感染所致,且分离菌株携带多种毒力基因,建议临床中治疗牛呼吸道疾病使用氧氟沙星作为主要治疗抗菌药物,不建议使用红霉素、克林霉素等抗菌药物。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 溶血性曼氏杆菌 牛支原体 分离鉴定 耐药性 毒力基因
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羊呼吸道溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性研究
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作者 武佳鑫 孙月 +5 位作者 毛伟 刘淑英 尹凯雯 张志丹 韩凯凡 赵红霞 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期2421-2431,共11页
【目的】了解内蒙古地区养殖场引起羊呼吸道疾病的主要病原菌,并探究其致病性及耐药性,为相关疾病防治药物的选择提供参考。【方法】对采集的病死羊肺脏组织进行病原菌分离培养、生化鉴定、分子生物学鉴定,并对其进行小鼠致病性试验,采... 【目的】了解内蒙古地区养殖场引起羊呼吸道疾病的主要病原菌,并探究其致病性及耐药性,为相关疾病防治药物的选择提供参考。【方法】对采集的病死羊肺脏组织进行病原菌分离培养、生化鉴定、分子生物学鉴定,并对其进行小鼠致病性试验,采用PCR法检测分离菌株毒力基因携带情况;利用K-B法检测分离菌株的药物敏感性,通过PCR法检测分离菌株耐药基因携带情况;用牛津杯法检测中药单体小檗碱、柠檬醛和百里香酚对分离菌株的体外抑菌效果。【结果】分离菌株在血琼脂平板培养基上形成β-溶血的灰白色菌落,共分离获得2株疑似菌株,分别命名为Mh1-1和Mh1-2。生化鉴定结果显示,分离株麦芽糖、甘露糖、蔗糖、木糖、山梨醇反应均呈阳性。PCR扩增出大小为453 bp的溶血性曼氏杆菌特异性基因及306 bp的荚膜血清A1型条带。相似性比对结果显示,分离株Mh1-1与溶血性曼氏杆菌GDZJcattle2014株(登录号:KM576848.1)的相似性为98.49%,分离株Mh1-2与溶血性曼氏杆菌38599株(登录号:CP017491.1)的相似性为98.14%。经鉴定2株分离株均为血清A1型溶血性曼氏杆菌。小鼠致病性试验结果显示,分离株Mh1-1和Mh1-2对小鼠的半数致死量(LD_(50))分别为2.2×10^(7)和1.0×10^(7)CFU/mL。2株分离菌株均检出毒力基因gs 60、lktC、lktA、tbpB、adh和nmaA。药敏试验结果显示,分离株Mh1-1对四环素、林可霉素表现耐药,对链霉素表现中介;分离株Mh1-2对链霉素和林可霉素表现耐药,对四环素表现中介;2株分离菌株均对氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、复方新诺明、头孢噻肟、氟苯尼考等表现敏感。耐药基因检测结果显示,2株分离株均携带strA、strB、tetA基因。体外抑菌试验结果显示,小檗碱和柠檬醛对分离株均有较好的抑制作用。【结论】本研究从患呼吸道疾病的病死羊肺脏组织中分离获得2株荚膜血清A1型溶血性曼氏杆菌,分离株均有致病性并携带多种毒力基因,对抗菌药物林可霉素耐药并携带strA等耐药基因。试验结果为临床科学合理地选择抗菌药物提供参考依据,为后续治疗药物的开发和研究提供思路。 展开更多
关键词 溶血性曼氏杆菌 分离鉴定 致病性 耐药性
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