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布鲁氏菌引起的巨噬细胞依赖性树突状细胞迁移与免疫应答
被引量：
3
1
作者
韩丽滨
董炳梅
+5 位作者
李妍
何媛娜
Nico van Rooijen
王少华
付景丽
王家鑫
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期495-497,共3页
目的:研究阴道巨噬细胞清除后小鼠对布鲁氏菌疫苗的免疫应答机制。方法:BALB/c小鼠60只随机分为3组,每组20只,实验组小鼠阴道内滴注脂质体包裹的clodronate以清除阴道巨噬细胞,3d后阴道滴注10μL布鲁氏菌疫苗(含6×108个布鲁氏菌)...
目的:研究阴道巨噬细胞清除后小鼠对布鲁氏菌疫苗的免疫应答机制。方法:BALB/c小鼠60只随机分为3组,每组20只,实验组小鼠阴道内滴注脂质体包裹的clodronate以清除阴道巨噬细胞,3d后阴道滴注10μL布鲁氏菌疫苗(含6×108个布鲁氏菌)。同时设空脂质体对照组(不含clo-dronate)和PBS对照组。依次在12、24、36、72h收集小鼠阴道、髂内淋巴结和血液。采用免疫组织化学染色法观察阴道巨噬细胞清除效果和树突状细胞(DC)的迁移,并用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的含量。收集小鼠腹腔液制备巨噬细胞进行细胞培养,1.2×106个巨噬细胞中加入布鲁氏菌疫苗10μL,于不同时间点对巨噬细胞进行姬姆萨染色,观察巨噬细胞的变化。结果:清除巨噬细胞组小鼠接种布鲁氏菌疫苗后,髂内淋巴结中S-100阳性DC数量没有明显的变化,IFN-γ和IL-4的含量也没有明显的升高。非清除组中,不同的时间点,髂内淋巴结中S-100阳性DC明显增多,与PBS对照组相比,IFN-γ含量显著增高,而IL-4则没有明显变化。体外巨噬细胞负载布鲁氏菌疫苗发现,随着时间的延长,巨噬细胞吞噬布鲁氏菌逐渐增多,在12h,巨噬细胞开始出现坏死性凋亡。结论:小鼠在对布鲁氏菌疫苗的免疫应答中,DC的迁移是巨噬细胞依赖性的,并且这种依赖性有可能是由布鲁氏菌抗原成分在细胞间间接传递引起的。
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关键词
巨噬细胞
树突状细胞
布鲁氏菌
免疫应答
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职称材料
巨噬细胞在树突状细胞启动抗布鲁氏菌免疫应答中的作用
被引量：
4
2
作者
董炳梅
何媛娜
+5 位作者
王蓓
韩丽滨
耿彦生
付景丽
曹志然
王家鑫
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期567-572,共6页
目的研究巨噬细胞(MΦ)在树突状细胞(DCs)启动抗布鲁氏菌免疫应答中的作用。方法用免疫组织化学染色法观察引流淋巴结内DCs的分布变化,用ELISA法检测阴道黏膜MΦ清除组和未清除组小鼠阴道接种布鲁氏菌疫苗后血清中IFN-γ、IL-4的含量,将...
目的研究巨噬细胞(MΦ)在树突状细胞(DCs)启动抗布鲁氏菌免疫应答中的作用。方法用免疫组织化学染色法观察引流淋巴结内DCs的分布变化,用ELISA法检测阴道黏膜MΦ清除组和未清除组小鼠阴道接种布鲁氏菌疫苗后血清中IFN-γ、IL-4的含量,将MΦ与DCs体外负载布鲁氏菌疫苗,比较二者形态学变化。结果清除组接种疫苗12h～72h后,只见到少量的DCs散布于小鼠髂内淋巴结的皮质区和副皮质区;而未清除组阴道接种疫苗12h后,髂内淋巴结皮质区内DCs数量急剧增加,细胞密度增大并逐渐由皮质区向副皮质区迁移。清除组小鼠血清IFN-γ含量比未清除组有所下降,但显著高于PBS对照组(P<0.05);而各组小鼠血清IL-4含量保持基本一致。MΦ体外负载布鲁氏菌12h后胞质脱落,细胞核固缩,并释放出膜包小泡,而DCs却始终保持形态结构的完整。结论DCs启动抗布鲁氏菌Th1型免疫应答是一个MΦ依赖过程,MΦ吞噬布鲁氏菌后出现坏死性凋亡变化可能是这种依赖过程的机制。
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关键词
巨噬细胞
布鲁氏菌
树突状细胞
迁移
坏死性凋亡
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职称材料
棉蚜ATP合成酶基因AgoATPb的克隆与表达
被引量：
1
3
作者
杨卫军
董艳蕾
+3 位作者
吴秋芳
张美玲
韩丽滨
张元臣
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2022年第2期329-336,共8页
为确定棉蚜(Aphis gossypii)ATP合成酶B亚基基因在棉蚜不同组织和日龄,以及取食不同植物的表达情况,以棉蚜为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术获得AgoATPb的全长cDNA序列,通过Expasy、SignalP-4.0 Server等在线工具对其进行了生物信息学分...
为确定棉蚜(Aphis gossypii)ATP合成酶B亚基基因在棉蚜不同组织和日龄,以及取食不同植物的表达情况,以棉蚜为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术获得AgoATPb的全长cDNA序列,通过Expasy、SignalP-4.0 Server等在线工具对其进行了生物信息学分析,同时利用实时荧光定量PCR技术研究了该基因在棉蚜不同组织和不同日龄,以及在不同植物上取食的表达水平。结果表明,棉蚜AgoATPb基因全长cDNA序列为1247 bp,开放阅读框(ORF)长度为822 bp,编码274个氨基酸,5′端非编码区长128 bp,3′端非编码区长297 bp,理论分子量为31.40 ku,等电点为8.95,无信号肽和跨膜区域。氨基酸序列比对结果表明,棉蚜AgoATPb与其他昆虫同源基因编码蛋白的氨基酸序列一致性为47%~99%。除了不在胚胎表达外,AgoATPb基因在棉蚜其他日龄和不同组织均有表达,且在不同日龄间与不同组织表达水平存在显著差异。取食不同植物后棉蚜AgoATPb基因表达水平存在显著差异,取食棉花表达水平最高,其次是黄瓜和西葫芦,取食甜瓜表达水平最低,推测该基因可能与棉蚜适应寄主植物有关。
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关键词
棉蚜
ATP合成酶B亚基
生物信息学
基因克隆
寄主
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职称材料
题名
布鲁氏菌引起的巨噬细胞依赖性树突状细胞迁移与免疫应答
被引量：
3
1
作者
韩丽滨
董炳梅
李妍
何媛娜
Nico van Rooijen
王少华
付景丽
王家鑫
机构
河北农业大学动物科技学院免疫学实验室
河北农业大学生命科学学院
阿姆斯特丹自由大学分子细胞生物学系
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期495-497,共3页
基金
国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAD04A10)
河北省"千万吨奶工程"支撑技术研究(07227146Z)
河北省科学技术研究与发展计划基金资助(05240421D)
文摘
目的:研究阴道巨噬细胞清除后小鼠对布鲁氏菌疫苗的免疫应答机制。方法:BALB/c小鼠60只随机分为3组,每组20只,实验组小鼠阴道内滴注脂质体包裹的clodronate以清除阴道巨噬细胞,3d后阴道滴注10μL布鲁氏菌疫苗(含6×108个布鲁氏菌)。同时设空脂质体对照组(不含clo-dronate)和PBS对照组。依次在12、24、36、72h收集小鼠阴道、髂内淋巴结和血液。采用免疫组织化学染色法观察阴道巨噬细胞清除效果和树突状细胞(DC)的迁移,并用ELISA法检测血清中IFN-γ和IL-4的含量。收集小鼠腹腔液制备巨噬细胞进行细胞培养,1.2×106个巨噬细胞中加入布鲁氏菌疫苗10μL,于不同时间点对巨噬细胞进行姬姆萨染色,观察巨噬细胞的变化。结果:清除巨噬细胞组小鼠接种布鲁氏菌疫苗后,髂内淋巴结中S-100阳性DC数量没有明显的变化,IFN-γ和IL-4的含量也没有明显的升高。非清除组中,不同的时间点,髂内淋巴结中S-100阳性DC明显增多,与PBS对照组相比,IFN-γ含量显著增高,而IL-4则没有明显变化。体外巨噬细胞负载布鲁氏菌疫苗发现,随着时间的延长,巨噬细胞吞噬布鲁氏菌逐渐增多,在12h,巨噬细胞开始出现坏死性凋亡。结论:小鼠在对布鲁氏菌疫苗的免疫应答中,DC的迁移是巨噬细胞依赖性的,并且这种依赖性有可能是由布鲁氏菌抗原成分在细胞间间接传递引起的。
关键词
巨噬细胞
树突状细胞
布鲁氏菌
免疫应答
分类号
S852.614 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
巨噬细胞在树突状细胞启动抗布鲁氏菌免疫应答中的作用
被引量：
4
2
作者
董炳梅
何媛娜
王蓓
韩丽滨
耿彦生
付景丽
曹志然
王家鑫
机构
河北农业大学动物科技学院
河北大学医学部
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第6期567-572,共6页
基金
国家“十一五”科技支撑计划项目(No.2006BAD04A10)
河北省“千万吨奶工程”支撑技术研究(No.L07227146Z)
河北省科学技术研究与发展计划(No.05240421D)
文摘
目的研究巨噬细胞(MΦ)在树突状细胞(DCs)启动抗布鲁氏菌免疫应答中的作用。方法用免疫组织化学染色法观察引流淋巴结内DCs的分布变化,用ELISA法检测阴道黏膜MΦ清除组和未清除组小鼠阴道接种布鲁氏菌疫苗后血清中IFN-γ、IL-4的含量,将MΦ与DCs体外负载布鲁氏菌疫苗,比较二者形态学变化。结果清除组接种疫苗12h～72h后,只见到少量的DCs散布于小鼠髂内淋巴结的皮质区和副皮质区;而未清除组阴道接种疫苗12h后,髂内淋巴结皮质区内DCs数量急剧增加,细胞密度增大并逐渐由皮质区向副皮质区迁移。清除组小鼠血清IFN-γ含量比未清除组有所下降,但显著高于PBS对照组(P<0.05);而各组小鼠血清IL-4含量保持基本一致。MΦ体外负载布鲁氏菌12h后胞质脱落,细胞核固缩,并释放出膜包小泡,而DCs却始终保持形态结构的完整。结论DCs启动抗布鲁氏菌Th1型免疫应答是一个MΦ依赖过程,MΦ吞噬布鲁氏菌后出现坏死性凋亡变化可能是这种依赖过程的机制。
关键词
巨噬细胞
布鲁氏菌
树突状细胞
迁移
坏死性凋亡
Keywords
macrophage
Brucella
dendritic cell
migration
necroptosis
分类号
R378.5 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
棉蚜ATP合成酶基因AgoATPb的克隆与表达
被引量：
1
3
作者
杨卫军
董艳蕾
吴秋芳
张美玲
韩丽滨
张元臣
机构
安阳工学院生物与食品工程学院
河南省太行山林业有害生物野外科学观测研究站
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2022年第2期329-336,共8页
基金
安阳工学院博士启动基金(BSJ2019001,BSJ2019021)
国家自然科学基金(31802007)。
文摘
为确定棉蚜(Aphis gossypii)ATP合成酶B亚基基因在棉蚜不同组织和日龄,以及取食不同植物的表达情况,以棉蚜为研究对象,采用RT-PCR和RACE技术获得AgoATPb的全长cDNA序列,通过Expasy、SignalP-4.0 Server等在线工具对其进行了生物信息学分析,同时利用实时荧光定量PCR技术研究了该基因在棉蚜不同组织和不同日龄,以及在不同植物上取食的表达水平。结果表明,棉蚜AgoATPb基因全长cDNA序列为1247 bp,开放阅读框(ORF)长度为822 bp,编码274个氨基酸,5′端非编码区长128 bp,3′端非编码区长297 bp,理论分子量为31.40 ku,等电点为8.95,无信号肽和跨膜区域。氨基酸序列比对结果表明,棉蚜AgoATPb与其他昆虫同源基因编码蛋白的氨基酸序列一致性为47%~99%。除了不在胚胎表达外,AgoATPb基因在棉蚜其他日龄和不同组织均有表达,且在不同日龄间与不同组织表达水平存在显著差异。取食不同植物后棉蚜AgoATPb基因表达水平存在显著差异,取食棉花表达水平最高,其次是黄瓜和西葫芦,取食甜瓜表达水平最低,推测该基因可能与棉蚜适应寄主植物有关。
关键词
棉蚜
ATP合成酶B亚基
生物信息学
基因克隆
寄主
Keywords
cotton aphid
ATP synthase subunit B
bioinformatics
gene cloning
host
分类号
S435.6221 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁氏菌引起的巨噬细胞依赖性树突状细胞迁移与免疫应答
韩丽滨
董炳梅
李妍
何媛娜
Nico van Rooijen
王少华
付景丽
王家鑫
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
巨噬细胞在树突状细胞启动抗布鲁氏菌免疫应答中的作用
董炳梅
何媛娜
王蓓
韩丽滨
耿彦生
付景丽
曹志然
王家鑫
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
棉蚜ATP合成酶基因AgoATPb的克隆与表达
杨卫军
董艳蕾
吴秋芳
张美玲
韩丽滨
张元臣
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2022
1
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职称材料
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