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芳香化酶抑制剂来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡实时观测模型的建立
被引量：
15
1
作者
靳肖寒
贾勇圣
佟仲生
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期433-437,共5页
目的:构建芳香化酶过表达的乳腺癌细胞模型以及芳香化酶抑制剂来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡的实时观测模型。方法:采用慢病毒包被介导基因转导方法,构建凋亡荧光指示蛋白VC3AI稳定表达的MCF-7-VC3AI和ZR7530-VC3AI工具细胞系,同时将该细胞...
目的:构建芳香化酶过表达的乳腺癌细胞模型以及芳香化酶抑制剂来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡的实时观测模型。方法:采用慢病毒包被介导基因转导方法,构建凋亡荧光指示蛋白VC3AI稳定表达的MCF-7-VC3AI和ZR7530-VC3AI工具细胞系,同时将该细胞系过表达芳香化酶,进而构建来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡实时观测模型。采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测和验证细胞中芳香化酶表达,通过MTT法检测细胞增殖。分别观察过表达芳香化酶的MCF-7-VC3AI、ZR7530-VC3AI细胞在雄激素和雌激素作用下的体外增殖能力,以及来曲唑作用下细胞的增殖能力。结果:实时荧光定量RCR检测结果显示,过表达芳香化酶MCF-7-VC3AI、ZR7530-VC3AI细胞模型中芳香化酶m RNA的表达水平明显高于MCF-7-VC3AI、ZT7530-VC3AI细胞。蛋白质印迹法结果显示,两种细胞模型中,芳香化酶蛋白的表达水平明显升高。MTT法检测结果显示,过表达芳香化酶的细胞模型在雄激素和雌激素刺激下增殖加快。100nmol/L雄激素作用下,过表达芳香化酶MCF-7-VC3AI细胞的增殖率约为对照组的1.2倍(P<0.01),而ZR7530-VC3AI细胞的增殖率约为对照组的1.5倍(P<0.01)。来曲唑以浓度依赖方式抑制雄激素诱导的细胞增殖。10μmol/L来曲唑作用下,过表达芳香化酶MCF7-VC3AI细胞增殖率为对照组的80%,而过表达芳香化酶ZR7530-VC3AI细胞增殖率为对照组的68%。结论:成功建立了来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡的实时观测模型,为研究来曲唑的作用机制奠定了重要的实验基础。
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关键词
芳香化酶
来曲唑
凋亡
荧光
MCF-7细胞
ZR7530细胞
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题名
芳香化酶抑制剂来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡实时观测模型的建立
被引量：
15
1
作者
靳肖寒
贾勇圣
佟仲生
机构
天津医科大学肿瘤医院乳腺肿瘤内科
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第9期433-437,共5页
基金
国家科技支撑项目(编号：2015BAl12815)资助
文摘
目的:构建芳香化酶过表达的乳腺癌细胞模型以及芳香化酶抑制剂来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡的实时观测模型。方法:采用慢病毒包被介导基因转导方法,构建凋亡荧光指示蛋白VC3AI稳定表达的MCF-7-VC3AI和ZR7530-VC3AI工具细胞系,同时将该细胞系过表达芳香化酶,进而构建来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡实时观测模型。采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测和验证细胞中芳香化酶表达,通过MTT法检测细胞增殖。分别观察过表达芳香化酶的MCF-7-VC3AI、ZR7530-VC3AI细胞在雄激素和雌激素作用下的体外增殖能力,以及来曲唑作用下细胞的增殖能力。结果:实时荧光定量RCR检测结果显示,过表达芳香化酶MCF-7-VC3AI、ZR7530-VC3AI细胞模型中芳香化酶m RNA的表达水平明显高于MCF-7-VC3AI、ZT7530-VC3AI细胞。蛋白质印迹法结果显示,两种细胞模型中,芳香化酶蛋白的表达水平明显升高。MTT法检测结果显示,过表达芳香化酶的细胞模型在雄激素和雌激素刺激下增殖加快。100nmol/L雄激素作用下,过表达芳香化酶MCF-7-VC3AI细胞的增殖率约为对照组的1.2倍(P<0.01),而ZR7530-VC3AI细胞的增殖率约为对照组的1.5倍(P<0.01)。来曲唑以浓度依赖方式抑制雄激素诱导的细胞增殖。10μmol/L来曲唑作用下,过表达芳香化酶MCF7-VC3AI细胞增殖率为对照组的80%,而过表达芳香化酶ZR7530-VC3AI细胞增殖率为对照组的68%。结论:成功建立了来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡的实时观测模型,为研究来曲唑的作用机制奠定了重要的实验基础。
关键词
芳香化酶
来曲唑
凋亡
荧光
MCF-7细胞
ZR7530细胞
Keywords
aromatase
letrozole
apoptosis
fluorescence
MCF-7 cells
ZR7530 cells
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
芳香化酶抑制剂来曲唑诱导乳腺癌细胞凋亡实时观测模型的建立
靳肖寒
贾勇圣
佟仲生
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2018
15
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