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人脐带静脉内皮细胞的继代培养 被引量:20
1
作者 董玉兰 陈铁镇 +2 位作者 王铁吉 王跃中 张亚佳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第2期81-85,共5页
人脐带静脉内皮细胞继代培养25代。应用光镜、电镜及Ⅷ因子相关抗原的免疫荧光方法进行鉴定与观察。在RPMI-1640培养液中加入20%人血清,内皮细胞生长因子200μg/ml,肝素100μg/ml及培养皿的明胶覆膜是人内皮细胞长期培养的重要条件。
关键词 内皮细胞 继代培养 脐带 静脉
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氢过氧化枯烯对培养人血管内皮细胞的损伤作用 被引量:6
2
作者 杨向红 陈铁镇 王兆元 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第4期251-255,共5页
本实验用氢过氧化枯烯作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化对血管内皮细胞的作用。结果表明,氢过氧化枯烯激发和促进了内皮细胞的脂质过氧化过程,使内皮细胞的过氧化脂质含量升高。在形态结构上内皮细胞出现收缩和生物膜系... 本实验用氢过氧化枯烯作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化对血管内皮细胞的作用。结果表明,氢过氧化枯烯激发和促进了内皮细胞的脂质过氧化过程,使内皮细胞的过氧化脂质含量升高。在形态结构上内皮细胞出现收缩和生物膜系统的损伤。用放射免疫方法测定,内皮细胞培养液中的6-keto-PGF_1α含量减少,表明PGI_2的产生受到抑制。上述变化可认为:内皮细胞对脂质过氧化的作用是敏感的,提示脂质过氧化通过损伤内皮细胞,可能在动脉粥样硬化发病机理中起重要作用。 展开更多
关键词 内皮细胞 氢过氧化枯烯 过氧化脂质
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脂质过氧化和维生素E对培养人内皮细胞的影响 被引量:4
3
作者 董玉兰 陈铁镇 +2 位作者 王铁吉 王跃忠 张亚佳 《中国循环杂志》 CSCD 1993年第2期98-100,共3页
用联胺作用于培养人内皮细胞,激发并促进了脂质过氧化。随联胺浓度增加,内皮细胞过氧化脂质浓度增加,前列环素合成减少。其形态变化主要为细胞收缩,质膜泡形成,内质网扩张,线粒体肿胀,细胞空泡化及坏死脱落。抗氧化剂维生素E能显著降低... 用联胺作用于培养人内皮细胞,激发并促进了脂质过氧化。随联胺浓度增加,内皮细胞过氧化脂质浓度增加,前列环素合成减少。其形态变化主要为细胞收缩,质膜泡形成,内质网扩张,线粒体肿胀,细胞空泡化及坏死脱落。抗氧化剂维生素E能显著降低联胺引起的过氧化脂质的升高,增加前列环素的合成并明显减轻内皮细胞的形态损伤。但在高浓度联胺时,维生素E无明显保护作用。这些结果提示,脂质过氧化可能通过损伤内皮细胞而在动脉粥样硬化发生中起重要作用,维生素E由于保护内皮细胞的氧化性损伤而可能有防治动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 内皮细胞 过氧化脂质 动脉粥样硬化
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维生素E对培养人内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用 被引量:4
4
作者 杨向红 陈铁镇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第6期405-408,共4页
本实验以维生素E作用于培养的人血管内皮细胞,从形态结构和功能方面观察了维生素E对内皮细胞脂质过氧化作用的影响,探讨维生素E抗动脉粥样硬化作用的途径。结果表明:维生素E能抑制内皮细胞的脂质过氧化反应,使脂质过氧化引起的细胞收缩... 本实验以维生素E作用于培养的人血管内皮细胞,从形态结构和功能方面观察了维生素E对内皮细胞脂质过氧化作用的影响,探讨维生素E抗动脉粥样硬化作用的途径。结果表明:维生素E能抑制内皮细胞的脂质过氧化反应,使脂质过氧化引起的细胞收缩和生物膜系统损伤的程度减轻,使细胞PG_2合成增加。提示维生素E通过防止内皮细胞的氧化性损伤,可能在抗动脉粥样硬化病变形成中起重要作用。 展开更多
关键词 维生素E 动脉粥样硬化 过氧化脂质
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联胺对培养人内皮细胞的损伤及维生素E的保护作用 被引量:1
5
作者 董玉兰 陈铁镇 +2 位作者 王铁吉 王跃忠 张亚佳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第5期321-325,共5页
以联胺作用于培养人内皮细胞,激发和促进了脂质过氧化。随联胺浓度增加,内皮细胞过氧化脂质浓度增高,前列环素(PGI_2)合成减少,并出现细胞生物膜系统损伤。抗氧剂维生素E能显著降低联胺引起的过氧化脂质的升高,增加PGI_2的合成,并明显... 以联胺作用于培养人内皮细胞,激发和促进了脂质过氧化。随联胺浓度增加,内皮细胞过氧化脂质浓度增高,前列环素(PGI_2)合成减少,并出现细胞生物膜系统损伤。抗氧剂维生素E能显著降低联胺引起的过氧化脂质的升高,增加PGI_2的合成,并明显减轻内皮细胞的形态损伤。但在高浓度联胺时,维生素E无明显保护作用。这些结果提示脂质过氧化可能在动脉粥样硬化发生中起重要作用,而维生素E由于保护内皮细胞的氧化性损伤,可能有抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 联胺 维生素E 内皮细胞 保护作用
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超氧化物歧化酶对人内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用 被引量:3
6
作者 杨向红 陈铁镇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第5期321-325,共5页
本实验首次应用超氧化物歧化酶(SOD)作用于培养的人血管内皮细胞,在细胞的形态结构和PGI_2合成功能方面,观察SOD抗氧化性损害的作用。结果表明:SOD能使氢过氧化枯烯引发的内皮细胞脂质过氧化物蓄积明显减少;使脂质过氧化作用引起的细胞... 本实验首次应用超氧化物歧化酶(SOD)作用于培养的人血管内皮细胞,在细胞的形态结构和PGI_2合成功能方面,观察SOD抗氧化性损害的作用。结果表明:SOD能使氢过氧化枯烯引发的内皮细胞脂质过氧化物蓄积明显减少;使脂质过氧化作用引起的细胞收缩、生物膜系统改变和PGI_2合成减少的程度减轻。SOD可能通过减轻内皮细胞的过氧化损伤而对动脉粥样硬化有防治作用。 展开更多
关键词 内皮细胞 脂质过氧化 SOD 动脉硬化
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LDL和HDL对培养的人血管内皮细胞的影响 被引量:1
7
作者 王兆元 陈铁镇 +7 位作者 杨向红 王铁吉 王跃中 张亚佳 彭风生 张丽霞 朱喜科 阎佩珩 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第3期161-165,共5页
本文以不同胆固醇浓度的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白或将其混合,施加于培养呈融合状态的人脐带静脉血管内皮细胞。通过相差显微镜、扫描电镜和透射电镜观察,发现LDL对内皮细胞有损伤作用,并随所含胆固醇浓度的增高,其损伤程度加重,损伤... 本文以不同胆固醇浓度的低密度脂蛋白和高密度脂蛋白或将其混合,施加于培养呈融合状态的人脐带静脉血管内皮细胞。通过相差显微镜、扫描电镜和透射电镜观察,发现LDL对内皮细胞有损伤作用,并随所含胆固醇浓度的增高,其损伤程度加重,损伤机制可能与脂质过氧化物的增加有关。HDL对内皮细胞有保护作用,可使其免遭LDL的损伤,可能与HDL可阻止LDL所引起内皮细胞膜中胆固醇的过多或毒性堆积等有关。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 脂蛋白 动脉粥样硬化
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氢过氧化枯烯对整装培养人血管内皮细胞损伤作用的研究 被引量:1
8
作者 张弘 陈铁镇 +1 位作者 宋继谒 王兆元 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第2期103-106,共4页
本实验改良了传统方法,自创PF膜和浮膜培养法,首次整装培养人血管内皮细胞成功,经高锰酸钾固定剂固定,消化细胞内蛋白质,保留脂质膜性系统,应用透射电镜进行整体观察。在此基础上,用氢过氧化枯烯处理,造成整装内皮细胞线粒体,内质网的... 本实验改良了传统方法,自创PF膜和浮膜培养法,首次整装培养人血管内皮细胞成功,经高锰酸钾固定剂固定,消化细胞内蛋白质,保留脂质膜性系统,应用透射电镜进行整体观察。在此基础上,用氢过氧化枯烯处理,造成整装内皮细胞线粒体,内质网的脂质过氧化损伤模型。本实验进一步证实脂质过氧化对内皮细胞生物膜的损伤,并报告了内质网和线粒体损伤的整体结构变化。 展开更多
关键词 内皮细胞 氢过氧化枯烯 整装培养
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浮膜培养人内皮细胞及其整装电镜标本制作技术的研究
9
作者 宋继谒 才越 +3 位作者 张弘 陈铁镇 王铁吉 刘伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第1期18-21,共4页
用Falcon塑料培养器皿的原料,自制一种支持膜(PF),经明胶处理后,首次用于浮膜培养人内皮细胞。细胞生长至亚融合时,以高锰酸钾混合固定液固定、消化细胞以保存细胞的膜系统。将固定后的细胞连同pF贴附于铜网上,干燥后在TEM80kv条件下,... 用Falcon塑料培养器皿的原料,自制一种支持膜(PF),经明胶处理后,首次用于浮膜培养人内皮细胞。细胞生长至亚融合时,以高锰酸钾混合固定液固定、消化细胞以保存细胞的膜系统。将固定后的细胞连同pF贴附于铜网上,干燥后在TEM80kv条件下,细胞的内质网及线粒体等超微及立体超微结构可被清楚地观察到。还讨论了本方法的优缺点并与文献中的其它整体细胞方法做了比较。 展开更多
关键词 整装细胞 内皮细胞 浮膜 电镜 标本制作技术
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氢过氧化亚油酸与硒对人内皮细胞的影响
10
作者 杨向红 陈铁镇 +5 位作者 宋继谒 王铁吉 王跃中 张亚加 王殿鸿 马朗 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第2期81-84,共4页
以氢过氧化亚油酸作为脂质过氧化物,亚硒酸钠作为抗氧剂,作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞结构和功能的影响。结果表明,氢过氧化亚油酸能引起细胞收缩、生物膜系统损伤及前列环素合成减少;硒可使细胞... 以氢过氧化亚油酸作为脂质过氧化物,亚硒酸钠作为抗氧剂,作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞结构和功能的影响。结果表明,氢过氧化亚油酸能引起细胞收缩、生物膜系统损伤及前列环素合成减少;硒可使细胞脂质过氧化损伤程度减轻。提示:硒可能通过阻止内皮细胞脂质过氧化反应,起抗动脉粥样硬化病变发生的作用。 展开更多
关键词 脂质过氧化物 内皮细胞
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氢过氧化亚油酸对家兔动脉内皮细胞的损伤作用
11
作者 董玉兰 陈铁镇 +5 位作者 王殿鸿 马朗 王佐周 张亚佳 王铁吉 王跃忠 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第6期401-404,共4页
用不同浓度氢过氧化亚油酸(LAH)作用于家兔隔离颈动脉段3~5min,于不同时间处死动物。在光镜、电镜下观察过氧化脂质引起的动脉内皮细胞(EC)损伤。结果主要表现为EC的收缩,通透性升高和以质膜泡形成为特点的生物膜系统损伤,以及单核细胞... 用不同浓度氢过氧化亚油酸(LAH)作用于家兔隔离颈动脉段3~5min,于不同时间处死动物。在光镜、电镜下观察过氧化脂质引起的动脉内皮细胞(EC)损伤。结果主要表现为EC的收缩,通透性升高和以质膜泡形成为特点的生物膜系统损伤,以及单核细胞(MC),平滑肌细胞(SMC)的反应。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 过氧化脂质 内皮细胞
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人主动脉内皮细胞的培养及免疫细胞化学研究
12
作者 董玉兰 陈铁镇 +2 位作者 王铁吉 王跃忠 张亚佳 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第6期401-405,共5页
人主动脉内皮细胞体外长期培养在国内首次成功。内皮细胞培养10~15代,细胞倍增时间20h~25h,累积倍增数25~30。应用相差显微镜,扫描、透射电镜,Ⅷ因子相关表面抗原的免疫荧光抗体及血管紧张素转换酶的单克隆抗体,对培养的人主动脉内... 人主动脉内皮细胞体外长期培养在国内首次成功。内皮细胞培养10~15代,细胞倍增时间20h~25h,累积倍增数25~30。应用相差显微镜,扫描、透射电镜,Ⅷ因子相关表面抗原的免疫荧光抗体及血管紧张素转换酶的单克隆抗体,对培养的人主动脉内皮细胞进行形态学及免疫细胞化学的观察与研究。证明,长期培养后的多核内皮细胞是具有内皮细胞特点的变形内皮细胞。 展开更多
关键词 内皮细胞 免疫细胞化学 培养
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长期培养的人血管内皮细胞超微结构研究
13
作者 董玉兰 陈铁镇 王铁吉 《电子显微学报》 CAS CSCD 1990年第3期109-109,共1页
内皮细胞培养是研究内皮细胞生物学的重要方法。近年国外开展内皮细胞长期培养,并用于细胞生物学,动脉粥样硬化病理学、血栓形成等机制的研究中。本文在国内首次对长期培养的人血管内皮细胞进行超微结构的研究。本实验按[1]的方法进行... 内皮细胞培养是研究内皮细胞生物学的重要方法。近年国外开展内皮细胞长期培养,并用于细胞生物学,动脉粥样硬化病理学、血栓形成等机制的研究中。本文在国内首次对长期培养的人血管内皮细胞进行超微结构的研究。本实验按[1]的方法进行脐蒂静脉内皮细胞的长期培养达25代(积累倍增数60-75,倍增时间20-25小时)。按[1、2]方法对流产胎儿主动脉内皮细胞长期培养达10-15代、(积累倍增数25-30,倍增时间20-25小时)。 展开更多
关键词 血管 内皮细胞 超微结构
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脂质过氧化和抗氧化作用对培养人内皮细胞的影响——冷冻复型的电镜观察
14
作者 杨向红 陈铁镇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第3期161-163,186,共4页
首次应用冷冻复型方法对培养人血管内皮细胞的内部结构进行观察,表明内皮细胞的冷冻复型样品所显示的细胞器结构清晰,立体感强;对膜性系统的观察结果与扫描电镜和透射电镜下常规样品观察结果相符,而在显示细胞表面的小孔和核膜孔方面优... 首次应用冷冻复型方法对培养人血管内皮细胞的内部结构进行观察,表明内皮细胞的冷冻复型样品所显示的细胞器结构清晰,立体感强;对膜性系统的观察结果与扫描电镜和透射电镜下常规样品观察结果相符,而在显示细胞表面的小孔和核膜孔方面优于以前的电镜方法。并观察了氢过氧化枯烯和硒作用下内皮细胞膜性系统的改变,进一步探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞的影响。 展开更多
关键词 冷冻复型 内皮细胞 脂质过氧化
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硒对培养人内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用
15
作者 洪伟 陈铁镇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第4期241-244,共4页
以巯基氧化剂联胺引发培养人内皮细胞脂质过氧化损伤,从形态和功能两方面,研究了硒对内皮细胞损伤的保护作用。结果表明:硒可抑制联胺引起的细胞内过氧化脂质蓄积,减轻细胞收缩反应、生物膜系统损伤和前列环素合成障碍等。硒可能在动脉... 以巯基氧化剂联胺引发培养人内皮细胞脂质过氧化损伤,从形态和功能两方面,研究了硒对内皮细胞损伤的保护作用。结果表明:硒可抑制联胺引起的细胞内过氧化脂质蓄积,减轻细胞收缩反应、生物膜系统损伤和前列环素合成障碍等。硒可能在动脉粥样硬化防治中有重要意义。 展开更多
关键词 内皮细胞 动脉粥样硬化 过氧化脂质
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血流动力学对家兔动脉粥样硬化早期病变形成的影响
16
作者 王速 陈铁镇 吉田洋二 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第6期413-417,共5页
应用苏丹Ⅳ染色、抗载脂蛋白E、B抗体和抗巨噬细胞单克隆抗体等免疫组化染色及极坐标法检测,并应用扫描、透射电镜观察了家兔主动脉弓分支入口分流部内皮细胞的形态和动脉粥样硬化早期病变的部位及特征。研究结果证明家兔动脉粥样硬化... 应用苏丹Ⅳ染色、抗载脂蛋白E、B抗体和抗巨噬细胞单克隆抗体等免疫组化染色及极坐标法检测,并应用扫描、透射电镜观察了家兔主动脉弓分支入口分流部内皮细胞的形态和动脉粥样硬化早期病变的部位及特征。研究结果证明家兔动脉粥样硬化病变在高脂肪食投与后2周时,发生于距离分流部尖端460μm的肩部;扫描、透射电镜观察显示分流部的内皮细胞在不同部位呈现不同的形态特征;载脂蛋白E、B和单核/巨噬细胞在内膜的沉积和浸润与苏丹Ⅳ染色阳性部位相一致,随之所见的泡沫细胞来源于单核/巨噬细胞。这些结果表明,动脉粥样硬化早期病变受低切变应力的影响。 展开更多
关键词 血流动力学 切变应力 动脉粥样硬化
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脂质过氧化对器官培养动脉内皮细胞的损伤及抗氧化药物的保护作用 被引量:6
17
作者 唐中华 陈铁镇 +2 位作者 王佐周 王跃忠 张亚佳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期467-470,共4页
本实验建立了稳定的动脉器官培养方法并以联胺作用于培养的动脉引发脂质过氧化反应,系统地观察硒、维生素E及人参皂甙对内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用。结果表明:联胺激发和促进了脂质过氧化反应引起脂质过氧化物含量增加,内皮细胞... 本实验建立了稳定的动脉器官培养方法并以联胺作用于培养的动脉引发脂质过氧化反应,系统地观察硒、维生素E及人参皂甙对内皮细胞脂质过氧化损伤的保护作用。结果表明:联胺激发和促进了脂质过氧化反应引起脂质过氧化物含量增加,内皮细胞生物膜系统损伤及PGI_2合成功能降低。而预先用200 ppb硒、50μg/ml维生索E、10μg/ml人参皂甙作用于动脉,可抑制联胺引起的组织脂贡过氧化物含量升高,使内皮细胞生物膜系统损伤程度减轻并增加PGI_2合成能力。表明硒、维生素E、人参皂甙在一定程度上对内皮细胞过氧化损伤有保护作用,可能对动脉粥样硬化有防治作用。这为抗氧化剂特别是人参皂甙作为抗氧化药物在临床上合理应用提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 动脉 内皮 抗氧剂 动脉粥样硬化
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原位生理压灌注固定技术及应用 被引量:2
18
作者 刘可立 张宝庚 +2 位作者 范江霖 陈铁镇 王兆元 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第6期466-468,共3页
应用自制全封闭式压力表指示的生理压灌注固定装置,对800余只实验动物进行原位生理压灌注固定,标本通过扫描和透射电镜观察,效果良好,完整地保存生物活体状态下的细胞及组织微细结构。该装置的优点是:固定液注入完全封闭式的装置内,减... 应用自制全封闭式压力表指示的生理压灌注固定装置,对800余只实验动物进行原位生理压灌注固定,标本通过扫描和透射电镜观察,效果良好,完整地保存生物活体状态下的细胞及组织微细结构。该装置的优点是:固定液注入完全封闭式的装置内,减少了对人体毒害作用。装置简单,操作方便,既能有效地控制压力恒定,又能控制流体的流速和流量。从而能在保持“生理血压”的状态下,将全身各部的不同组织成份迅速均匀地固定在生体血循环尚未停止时。 展开更多
关键词 生理压 灌注固定 电镜 生物标本
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家兔主动脉内膜小范围浅表损伤及其愈合过程 被引量:2
19
作者 何平 陈铁镇 +1 位作者 王兆元 王泽兴 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第4期256-259,共4页
本实验研究了家兔主动脉内皮细胞非剥脱性机械性损伤及修复过程。形态学动态察观表明:损伤后内膜表面仍覆盖有内皮细胞。其中有些发生变性,逐渐恢复;有些则坏死,可能以脱屑方式脱落。内膜修复在损伤后48小时基本完成,72小时则完全完成... 本实验研究了家兔主动脉内皮细胞非剥脱性机械性损伤及修复过程。形态学动态察观表明:损伤后内膜表面仍覆盖有内皮细胞。其中有些发生变性,逐渐恢复;有些则坏死,可能以脱屑方式脱落。内膜修复在损伤后48小时基本完成,72小时则完全完成。损伤区通透性增高。申膜平滑肌细胞轻度增生,未进入内膜。 展开更多
关键词 内皮细胞损伤 动脉粥样硬化 病理
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脂质过氧化物与抗氧化剂对内皮细胞前列环素合成的影响 被引量:5
20
作者 杨向紅 陈铁镇 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第3期164-166,共3页
以氢过氧化枯烯作为引发剂、激发和促进培养人血管内皮细胞的脂质过氧化反应;并以硒、维生素E、超氧化物歧化酶作为抗氧化剂,测定细胞脂质过氧化物的含量与培养液中6-酮-前列腺素F_1α的含量。结果表明:氢过氧化枯烯能增加细胞的脂质过... 以氢过氧化枯烯作为引发剂、激发和促进培养人血管内皮细胞的脂质过氧化反应;并以硒、维生素E、超氧化物歧化酶作为抗氧化剂,测定细胞脂质过氧化物的含量与培养液中6-酮-前列腺素F_1α的含量。结果表明:氢过氧化枯烯能增加细胞的脂质过氧化物蓄积,并减少内皮细胞的前列环素合成,而各种抗氧化剂的添加,通过减少细胞的脂质过氧化物蓄积,可阻止其对内皮细胞前列环素合成的抑制作用。 展开更多
关键词 内皮细胞 前列环素 过氧化脂质
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