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应用电化学免疫传感器检测大片形吸虫抗原抗体反应的研究 被引量:6
1
作者 陈汉忠 蒋金书 李义平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期339-342,共4页
应用电化学免疫传感器,以恒电位法检测了大片形吸虫的抗原抗体反应,结果表明,该传感器可应用于大片形吸虫的抗原抗体反应的检测,阳性血清与阴性血清的电流响应曲线具有明显的离散度;初步试验表明,该法的检测结果相对于ELISA检测结果,其... 应用电化学免疫传感器,以恒电位法检测了大片形吸虫的抗原抗体反应,结果表明,该传感器可应用于大片形吸虫的抗原抗体反应的检测,阳性血清与阴性血清的电流响应曲线具有明显的离散度;初步试验表明,该法的检测结果相对于ELISA检测结果,其符合率为83.3%;该法还具有操作简便、检测快速、选择性好等特点,测定一个样品用时不到1h,每测一个样品血清用量仅10μl,与羊等多种血清无交叉反应。 展开更多
关键词 大片形吸虫 抗原抗体反应 电化学免疫传感器 检测 诊断 大片形吸虫病
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消毒剂抑杀鸡球虫卵囊的初步试验 被引量:12
2
作者 陈汉忠 王忠田 +3 位作者 苏勇 蒋荣华 苏文伟 唐倩迪 《中国兽药杂志》 2005年第10期37-39,共3页
应用几种消毒剂对鸡球虫卵囊进行了抑杀试验,结果表明,百毒消、七消液和2%烧碱(Sod ium hydroxide)及自配的一种消毒剂(1%酚剂+0.1%表面活性剂)均无抑制球虫卵囊孢子化的效果,而自配的另一种消毒剂(0.05%碘液+0.1%酸+0.1%表面活性剂)处... 应用几种消毒剂对鸡球虫卵囊进行了抑杀试验,结果表明,百毒消、七消液和2%烧碱(Sod ium hydroxide)及自配的一种消毒剂(1%酚剂+0.1%表面活性剂)均无抑制球虫卵囊孢子化的效果,而自配的另一种消毒剂(0.05%碘液+0.1%酸+0.1%表面活性剂)处理新鲜卵囊10、20、60 m in和24 h后,卵囊的孢子化率与对照组相比分别下降了30.4%、51.9%、60.8%和90.4%。 展开更多
关键词 消毒剂 球虫卵囊 抑杀 效果
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几种常见猪寄生虫病的防治 被引量:3
3
作者 陈汉忠 《猪业科学》 2007年第8期28-32,共5页
随着我国养猪业的发展和养猪方式的改变,近10多年来我国猪寄生虫病的流行和危害情况已经发生了很大的变化,过去一些常见、比较重要的寄生虫病如猪蛔虫病、食道口线虫病、肺线虫病(后圆线虫病)、肾虫病(有齿冠尾线虫病)、姜片吸虫... 随着我国养猪业的发展和养猪方式的改变,近10多年来我国猪寄生虫病的流行和危害情况已经发生了很大的变化,过去一些常见、比较重要的寄生虫病如猪蛔虫病、食道口线虫病、肺线虫病(后圆线虫病)、肾虫病(有齿冠尾线虫病)、姜片吸虫病、棘头虫病等,由于有了越来越多的有效药物进行防治,以及饲养方式的变化如从过去粗放型的养殖方式为主转变为集约化、规模化养殖方式为主,这些猪寄生虫病得到了较好的控制,尤其是在规模化养猪场, 展开更多
关键词 猪寄生虫病 防治 规模化养猪场 后圆线虫病 养殖方式 姜片吸虫病 危害情况 猪蛔虫病
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离子平衡液治疗仔猪黄白痢的初步试验
4
作者 陈汉忠 唐倩迪 +2 位作者 蒋荣华 庞宏凌 苏勇 《养猪》 2005年第3期40-40,共1页
关键词 平衡液 仔猪黄白痢 初步试验 治疗 哺乳仔猪 出生体重 常规方法 随机分配 试验组 等离子 分娩舍 陆川县 腹泻 配对 对照 生理 猪场 胎次 发病
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海豚链球菌疫苗对罗非鱼免疫功能的影响 被引量:21
5
作者 徐增辉 陈汉忠 +6 位作者 陈明 李莉萍 李超 甘西 梁万文 李晓栩 张居作 《大连水产学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期413-418,共6页
以海豚链球菌Streptococcus iniae灭活菌苗为免疫原,通过注射、浸泡、口服3种途径对体重为(100±10)g的奥尼罗非鱼Oreochromis niloticus进行免疫,在免疫前和免疫后的第3、7、10、14、21天对试验鱼进行尾静脉采血,测定其血液中白细... 以海豚链球菌Streptococcus iniae灭活菌苗为免疫原,通过注射、浸泡、口服3种途径对体重为(100±10)g的奥尼罗非鱼Oreochromis niloticus进行免疫,在免疫前和免疫后的第3、7、10、14、21天对试验鱼进行尾静脉采血,测定其血液中白细胞的数量、各类白细胞的数量及其吞噬活性,以及血清的抗菌活力、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶(SOD)活力及抗体水平。在免疫后第22天对所有试验鱼按照1.0×107cfu/尾进行攻毒。结果表明:各免疫组白细胞总数、淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞数量均显著高于对照组(P<0.05);血清的抗菌活力、溶菌酶活性和抗体水平与对照组差异显著(P<0.05),SOD活力和对照组无显著差异(P>0.05);免疫的罗非鱼对海豚链球菌的抵抗力明显增强,其中注射组罗非鱼的免疫能力明显高于浸泡和口服组,加强免疫组的免疫能力均有明显增强趋势。 展开更多
关键词 罗非鱼 海豚链球菌 疫苗 免疫力
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罗非鱼海豚链球菌疫苗及其免疫效果的研究 被引量:15
6
作者 余晓丽 陈明 +6 位作者 李莉萍 梁万文 徐增辉 李超 雷爱莹 陈汉忠 甘西 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2008年第6期31-37,共7页
用筛选到的海豚链球菌(Streptococcus iniae)临床分离菌株CMS005,甲醛灭活制备成疫苗并对其进行了注射、浸泡和口服免疫奥尼罗非鱼的效果研究。结果显示:实验室水族箱试验的注射、浸泡和口服免疫的最佳免疫保护率分别为90.5%、61.9%... 用筛选到的海豚链球菌(Streptococcus iniae)临床分离菌株CMS005,甲醛灭活制备成疫苗并对其进行了注射、浸泡和口服免疫奥尼罗非鱼的效果研究。结果显示:实验室水族箱试验的注射、浸泡和口服免疫的最佳免疫保护率分别为90.5%、61.9%和14.3%,水泥池小网箱试验的最佳免疫保护率分别为100%、86.1%和66.7%。免疫剂量对浸泡免疫效果的影响大于注射和口服免疫,加强免疫可显著提高浸泡和口服免疫效果,超声波处理可以提高浸泡免疫效果。注射和口服免疫7 d和15 d后均可控制罗非鱼海豚链球菌病的继续发生;未免疫组罗非鱼月累计死亡率为4%~16%,而免疫组罗非鱼月累计死亡率低于0.5%;疫苗产生的免疫保护力可持续2~3个月。 展开更多
关键词 奥尼罗非鱼(Oreochromis aureus×O.niloticus) 海豚链球菌(Streptococcus iniae) 疫苗 保护率
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猪链球菌9型cps9G基因的克隆与序列分析 被引量:10
7
作者 付薇 陈进喜 +4 位作者 覃芳芸 王常伟 熊毅 陈汉忠 刘棋 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第1期1-4,共4页
根据GenBank中猪链球菌9型(SS9)基因的核酸序列,设计一对引物,采用PCR方法从确诊为猪链球菌的阳性样品中扩增cps9G基因片段,将其克隆到pMD18-T载体上,转化DH5a感受态细胞,提取重组质粒pMD18T-cps9G,经PCR和酶切鉴定后测序,并与... 根据GenBank中猪链球菌9型(SS9)基因的核酸序列,设计一对引物,采用PCR方法从确诊为猪链球菌的阳性样品中扩增cps9G基因片段,将其克隆到pMD18-T载体上,转化DH5a感受态细胞,提取重组质粒pMD18T-cps9G,经PCR和酶切鉴定后测序,并与GenBank上SS9相应序列进行同源性分析。结果表明,经PCR扩增,鉴定为SS9的有8株。序列分析发现,8株SS9的cps9G片段的核苷酸序列较稳定,该基因片段长度均为562bp,彼此间的核苷酸同源性达96.8%~99.8%,亲缘关系密切;与GenBank上已发表的SS9参考毒株的同源性介于96.0%~98.6%。 展开更多
关键词 猪链球菌9型 cps9G基因 克隆 序列分析 荚膜多糖抗原
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Myostatin基因沉默绵羊成纤维细胞系的建立 被引量:8
8
作者 唐大运 朱化彬 +5 位作者 吴健敏 杜卫华 王栋 赵学明 陈汉忠 林秀坤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1368-1373,共6页
旨在获得肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因沉默的成纤维细胞系,为进一步探索Myostatin的调控机理,获得Myostatin的基因沉默的转基因羊奠定基础。针对小尾寒羊Myostatin的基因序列,设计4条siRNA干扰序列,构建pSilencer干扰载体,转染... 旨在获得肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因沉默的成纤维细胞系,为进一步探索Myostatin的调控机理,获得Myostatin的基因沉默的转基因羊奠定基础。针对小尾寒羊Myostatin的基因序列,设计4条siRNA干扰序列,构建pSilencer干扰载体,转染成纤维细胞,采用RT-PCR进行筛选;构建慢病毒干扰载体,包装病毒,感染成纤维细胞,采用流式细胞技术分选阳性细胞,阳性细胞予以测序鉴定并检测沉默效果。结果,获得Myostatin基因沉默效率约90%的RNA干扰片段PSL1,包装病毒获得滴度为1×108的病毒颗粒,流式细胞技术分选得到纯度达99%的Myostatin基因沉默成纤维细胞系。采用慢病毒感染接合流式细胞术分选,能较快获得无抗性标记的转基因阳性细胞系,为培育Myostatin基因沉默的转基因羊及探索Myostatin的调控机理奠定基础。 展开更多
关键词 肌肉生长抑制素 RNA干扰 慢病毒 绵羊成纤维细胞
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我国弓形虫的感染现状 被引量:66
9
作者 张居作 陈汉忠 徐君飞 《动物医学进展》 CSCD 2008年第7期101-104,共4页
弓形虫病分布在世界各地,不受气候和地理位置的限制,感染状况各地不同。全球人群弓形虫感染率在25%~50%,有十几亿人受感染,我国人群弓形虫感染率在0.09%~34%,少数民族地区可能更高,报道的数据表明,我国人群弓形虫感染率低于世界平均水... 弓形虫病分布在世界各地,不受气候和地理位置的限制,感染状况各地不同。全球人群弓形虫感染率在25%~50%,有十几亿人受感染,我国人群弓形虫感染率在0.09%~34%,少数民族地区可能更高,报道的数据表明,我国人群弓形虫感染率低于世界平均水平,但呈现逐年上升趋势。在动物中,猪的感染率3.32%~66.39%,牛的感染率2.41%~67.46%,羊的感染率27.5%~33.33%,犬的感染率0.66%~40%,猫的感染率14.06%~78%。动物的感染情况复杂,混合其他病原感染或继发感染的情况比较多见。通过对我国弓形虫感染现状的统计分析,了解其危害,体现对其研究和预防的重要性,希望能引起人们的足够重视。 展开更多
关键词 弓形虫 感染现状 危害
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斑点叉尾鮰肠败血症PCR诊断方法的建立 被引量:5
10
作者 梁万文 陈明 +6 位作者 余晓丽 李莉萍 雷爱莹 陈汉忠 徐增辉 甘西 黄维义 《大连水产学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期264-269,共6页
为了建立快速、敏感的聚合酶链式反应(PCR)诊断斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus的肠败血症技术,作者根据NCB I公布的鮰爱德华氏细菌序列,设计了一对特异性诊断引物CM3/CM4,对鮰爱德华氏细菌特异基因片段进行PCR扩增试验,PCR反应条件的优... 为了建立快速、敏感的聚合酶链式反应(PCR)诊断斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus的肠败血症技术,作者根据NCB I公布的鮰爱德华氏细菌序列,设计了一对特异性诊断引物CM3/CM4,对鮰爱德华氏细菌特异基因片段进行PCR扩增试验,PCR反应条件的优化以及不同检测材料的比较,同时测试了该方法的特异性和敏感性,并对广西4个市县临床样品进行了检测。结果表明:用该引物可以扩增到与预计大小相符的276 bp鮰爱德华氏菌特异性片段;PCR反应与Ⅰ型荧光假单胞菌、点状产气单胞菌点状亚种、鳗弧菌、温和气单胞菌、肠型点状产气单胞菌、柱状黄杆菌、嗜水气单胞菌、河弧菌、迟缓爱德华氏菌及海豚链球菌无交叉反应;用该PCR法可以检测出病鱼脑、肝、肾及脾中的病原菌,检测的最低细菌数为12个,且病鱼内脏组织、菌落及菌液均可直接用于该PCR扩增;临床菌株检测结果与基于菌株16S rRNA基因序列系统进化分析和生化鉴定结果一致。因此,本试验中所建立的PCR检测方法在斑点叉尾鮰肠败血症的诊断和防治方面具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 斑点又尾鮰 鮰爱德华氏菌 肠败血症 PCR 诊断方法
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猪繁殖与呼吸综合征病毒检测技术研究进展 被引量:17
11
作者 官家明 施开创 +1 位作者 陈汉忠 莫胜兰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第8期88-92,共5页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以母猪繁殖障碍及各种年龄猪特别是仔猪呼吸道疾病为主要特征的一种急性致死性传染病。高致病性猪繁殖与呼吸综合征于2006年在国内暴发后,迅速蔓延全国,难以控制与根除... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的以母猪繁殖障碍及各种年龄猪特别是仔猪呼吸道疾病为主要特征的一种急性致死性传染病。高致病性猪繁殖与呼吸综合征于2006年在国内暴发后,迅速蔓延全国,难以控制与根除,使我国养猪业遭受了巨大的经济损失。及时、准确地对PRRSV进行检测,是诊断、预防和控制PRRS的重要前提。PRRSV的检测技术包括病毒分离鉴定、病毒抗原检测、病毒核酸检测等,病毒抗原检测技术和病毒核酸检测技术又包括多种检测方法。论文对国内外PRRSV主要检测技术研究现状进行综述,并展望了今后的研究方向。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 检测技术 研究进展
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广西罗非鱼链球菌病病原的生化鉴定及药敏试验 被引量:38
12
作者 李波 陈明 +5 位作者 李莉萍 陈汉忠 徐增辉 李超 黄维义 梁万文 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第10期93-95,共3页
从来自南宁、北海等地的十几个暴发疾病的罗非鱼养殖场发病罗非鱼中,分离得到了8株链球菌。通过生化鉴定及药敏试验,结果表明,分离到的8株致病性链球菌,有6株为海豚链球菌(streptococcus iniae),2株为无乳链球菌(streptococcusagalacti... 从来自南宁、北海等地的十几个暴发疾病的罗非鱼养殖场发病罗非鱼中,分离得到了8株链球菌。通过生化鉴定及药敏试验,结果表明,分离到的8株致病性链球菌,有6株为海豚链球菌(streptococcus iniae),2株为无乳链球菌(streptococcusagalactiae)。 展开更多
关键词 罗非鱼 链球菌 生化鉴定 药敏试验
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水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用 被引量:6
13
作者 孟盟 曹池 +4 位作者 陈汉忠 刘明如 王华俊 奉彬 陈国宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期988-993,共6页
为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检... 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛伊氏锥虫病诊断方法,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的OB6单克隆抗体,在硝酸纤维素膜上包被纯化的抗伊氏锥虫VSG抗原的TB7单克隆抗体和兔抗小鼠IgG,作为检测带和质控带,然后优化条件,研制成检测伊氏锥虫病的免疫胶体金试纸条。通过交叉试验表明该试纸条与衣原体、弓形虫、旋毛虫、巴贝斯焦虫和大片吸虫无交叉反应。该试纸条最低可以检出1∶3 200倍稀释的伊氏锥虫VSG抗原(浓度为3.11mg.mL-1)。应用该试纸条对230份水牛血清样本进行初步检测,同时用ELISA做平行试验,阳性符合率为88.2%。结果证明该试纸条是一种快速、灵敏、特异的水牛伊氏锥虫病的检测方法,为水牛伊氏锥虫病的现场检测诊断和预控提供了有效的方法。 展开更多
关键词 伊氏锥虫病 单克隆抗体 胶体金 试纸条
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PRRSV美洲型经典株、变异株和疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量:4
14
作者 施开创 许心婷 +3 位作者 胡杰 粟艳琼 陆文俊 陈汉忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期879-887,共9页
为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV美洲型经典株、高致病性变异株以及TJM-F92疫苗株的Nsp2基因序列特点,设计2对特异性引物。经优化反应条... 为建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的快速鉴别检测方法,本研究针对PRRSV美洲型经典株、高致病性变异株以及TJM-F92疫苗株的Nsp2基因序列特点,设计2对特异性引物。经优化反应条件后,建立了能同时检测并区分PRRSV美洲型经典株、变异株及疫苗株的多重RT-PCR方法。该方法特异性强,与猪其他病毒间不存在交叉反应;敏感性高,对重组质粒标准品的检出下限为1.13×103拷贝/μL。应用所建立的方法对349份临床疑似病料进行检测,结果检出PRRSV阳性119份,其中美洲型经典株5份、变异株107份、TJM-F92疫苗株7份,且有变异株和TJM-F92疫苗株混合阳性7份。表明本研究成功建立了PRRSV美洲型经典株、变异株及TJM-F92疫苗株的多重RT-PCR鉴别检测方法,可用于PRRSV的临床检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲型 多重RT-PCR 野毒株 疫苗株
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杀虫、驱虫新药——敌敌钙
15
作者 陈汉忠 《广西畜牧兽医》 1992年第2期54-54,共1页
敌敌钙(Calvinphos)是一种新型的高效、广谱、低毒的有机磷类杀虫、驱虫药,有类似敌敌畏的杀虫、驱虫作用,对家畜家禽的毒性低,并有易于生物降解,无滞留和无公害等优点。敌敌钙最先由日本吴羽化学工业公司合成,目前已广泛应用于防治畜... 敌敌钙(Calvinphos)是一种新型的高效、广谱、低毒的有机磷类杀虫、驱虫药,有类似敌敌畏的杀虫、驱虫作用,对家畜家禽的毒性低,并有易于生物降解,无滞留和无公害等优点。敌敌钙最先由日本吴羽化学工业公司合成,目前已广泛应用于防治畜禽的体内外寄生虫。近年国内开始有使用的报道。一、分子结构为O-2,2-二氯乙烯基-O-甲基磷酸钙与O-2,2-二氯乙烯基-O。 展开更多
关键词 兽药 杀虫药 驱虫药 敌敌钙
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鸡球虫病的药物防制
16
作者 陈汉忠 《广西畜牧兽医》 1992年第1期43-44,共2页
鸡球虫病是一种流行广泛、危害严重的寄生原虫病。对鸡球虫病的防制,当前仍然是以药物为主。用于防制鸡球虫病的药物品种很多,现在已基本上能满足生产上的需要。但是由于一些生产者缺乏对球虫生物学特性、抗球虫药性能和使用方法的了解... 鸡球虫病是一种流行广泛、危害严重的寄生原虫病。对鸡球虫病的防制,当前仍然是以药物为主。用于防制鸡球虫病的药物品种很多,现在已基本上能满足生产上的需要。但是由于一些生产者缺乏对球虫生物学特性、抗球虫药性能和使用方法的了解,不能正确使用抗球虫药来防制鸡球虫病,给生产造成了不应有的损失。鸡球虫属单细胞生物,本身的某些特性变异性较大,容易对抗球虫药产生耐药性而形成抗药虫株。通常每种抗球虫药只能使用一定年限(一般为3~5年)。 展开更多
关键词 球虫病 药物 防制
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布氏艾美耳球虫南宁株的分离及鉴定 被引量:4
17
作者 陈桂先 刘明如 +4 位作者 陈汉忠 林贤 王华俊 卢冰霞 徐勒 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第11期222-226,共5页
本试验从南宁市郊区某鸡场感染球虫病的病鸡粪便中收集到混合卵囊,采用改良过的琼脂单卵囊分离法从中分离纯化出2个球虫虫株,并对其中的1个球虫分离株进行了鉴定,鉴定结果为:该株球虫卵囊呈椭圆形或卵圆形,卵囊平均大小为(22.51±0.... 本试验从南宁市郊区某鸡场感染球虫病的病鸡粪便中收集到混合卵囊,采用改良过的琼脂单卵囊分离法从中分离纯化出2个球虫虫株,并对其中的1个球虫分离株进行了鉴定,鉴定结果为:该株球虫卵囊呈椭圆形或卵圆形,卵囊平均大小为(22.51±0.4790)μm×(15.94±0.5599)μm,平均卵型指数为1.41212±0.06714,裂殖体平均大小为31.33μm×27.46μm,潜在期为120h50min,排卵高峰期为感染后第6天,最短孢子化时间为18h50min,寄生部位为小肠中、下段,属中等毒力的球虫虫株。通过将这些测定和观察到的指标与各类文献中所记载的各种鸡艾美耳球虫的特征进行了对比,经过综合分析后,将该分离株球虫鉴定为布氏艾美耳球虫,并且将它命名为布氏艾美耳球虫南宁株,记为Eimeria.brunetti-GXNN。对该虫株的成功分离鉴定,为进一步了解本地球虫虫株的生物学特性,开展鸡球虫病的免疫预防奠定了基础。 展开更多
关键词 布氏艾美耳球虫 分离 鉴定
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大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用 被引量:3
18
作者 王华俊 刘宇 +4 位作者 蒋薇 赵雪丽 曹伟伟 陈汉忠 闫若潜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期254-261,共8页
为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30nm的胶体金,再用胶体金标记... 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30nm的胶体金,再用胶体金标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫均无交叉反应,特异性好。采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62%。结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测大片形吸虫。 展开更多
关键词 大片形吸虫 单克隆抗体 胶体金 试纸条
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大片形吸虫幼虫的培育及其感染小鼠的研究 被引量:3
19
作者 李雪 黄甜 +5 位作者 朱丙伦 吴文德 魏志鹏 赵明龙 许心婷 陈汉忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期244-250,共7页
本试验旨在培育大片形吸虫囊蚴,着重研究大片形吸虫在中间宿主体内的发育过程和临床病理变化。人工培养和孵化大片形吸虫虫卵,用孵化出来的大片形吸虫毛蚴感染中间宿主小土蜗螺,收集大片形吸虫囊蚴,再用囊蚴感染试验小鼠。结果显示,囊... 本试验旨在培育大片形吸虫囊蚴,着重研究大片形吸虫在中间宿主体内的发育过程和临床病理变化。人工培养和孵化大片形吸虫虫卵,用孵化出来的大片形吸虫毛蚴感染中间宿主小土蜗螺,收集大片形吸虫囊蚴,再用囊蚴感染试验小鼠。结果显示,囊蚴经口感染试验小鼠后1周即可在肝脏找到虫体,幼虫可在小鼠体内发育生存7~8周,随着时间的推移和感染囊蚴数量不同,可给小鼠肝脏造成不同程度的病变,甚至造成死亡。剖检小鼠可见肝脏质地脆,颜色发黄,脾脏肿大等严重病理变化。因此,可利用小鼠作为大片形吸虫幼虫感染的试验动物,进行片形吸虫病的早期诊断、免疫预防和治疗等方面的研究。 展开更多
关键词 大片形吸虫 小土蜗螺 毛蚴 囊蚴 小鼠
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2014年-2016年广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2和ORF5基因的遗传多样性分析 被引量:3
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作者 施开创 许心婷 +3 位作者 尹彦文 龙飞翔 屈素洁 陈汉忠 《动物医学进展》 北大核心 2017年第1期28-35,共8页
为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传进化情况,对2014年-2016年来自广西各地的部分PRRSV阳性病料进行Nsp2和ORF5基因的扩增和测序分析。结果获得34个Nsp2基因序列和45个ORF5基因序列,均属于美洲型毒株。Nsp2基... 为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传进化情况,对2014年-2016年来自广西各地的部分PRRSV阳性病料进行Nsp2和ORF5基因的扩增和测序分析。结果获得34个Nsp2基因序列和45个ORF5基因序列,均属于美洲型毒株。Nsp2基因间核苷酸序列的同源性为91.8%~100%,与PRRSV美洲型毒株VR-2332、CH-1a、JXA1及NADC30株核苷酸序列的同源性分别为81.3%~84.3%、88.9%~92.1%、94.3%~99.3%和73.5%~75.1%,而与PRRSV欧洲型毒株LV株核苷酸序列的同源性为51.5%~53.2%。ORF5基因间核苷酸序列的同源性为82.8%~100%,与PRRSV美洲型毒株VR-2332、CH-1a、JXA1及NADC30株核苷酸序列的同源性分别为83.7%~99.5%、85%~95%、83.8%~99.7%和83.2%~86.4%,而与PRRSV欧洲型毒株LV株核苷酸序列的同源性为62.4%~64.5%。基于Nsp2和ORF5基因推导的氨基酸序列绘制的遗传进化树中,广西地区的毒株主要分布在以JXA1为代表的Ⅳ亚群。表明当前广西PRRSV流行毒株以JXA1株为代表的高致病性美洲型毒株为主,各毒株Nsp2和ORF5基因序列存在一定的差异,尚未发现欧洲型毒株和美洲型NADC30类毒株。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因 ORF5基因 遗传多样性
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