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锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达 被引量:11
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作者 柯浩 刘振兴 +2 位作者 林敏 孟轩 陈棠堂 《南方水产》 2010年第4期56-62,共7页
从感染锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)的锦鲤(Cyprinus carpiokoi)肾脏组织中提取DNA,通过PCR扩增了KHVORF59基因。该基因全长411bp,所编码的蛋白包含136个氨基酸,分子量14.3kDa,等电点(PI)6.91,有12个潜在的O糖基化位点。此研究克... 从感染锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)的锦鲤(Cyprinus carpiokoi)肾脏组织中提取DNA,通过PCR扩增了KHVORF59基因。该基因全长411bp,所编码的蛋白包含136个氨基酸,分子量14.3kDa,等电点(PI)6.91,有12个潜在的O糖基化位点。此研究克隆的KHVORF59基因第130位碱基由G突变为A,使其编码的第44位氨基酸由Ala突变为Thr。采用DNAStar程序,在综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性和抗原性指数的基础上,预测了KHVORF59蛋白主要B细胞表位,并将其区段的编码序列与KHVORF59完整编码序列分别克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET32a-ORF59S和pET32a-ORF59C,转入大肠杆菌Rosetta菌株,IPTG诱导表达。SDS-PAGE及WesternBlot分析显示,pET32a-ORF59S可以高效表达,表达的截短KHVORF59蛋白主要以可溶性形式存在,采用HisBindResin填料,层析纯化了该截短蛋白。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒 囊膜蛋白 B细胞表位 原核表达
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锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF132的克隆及分析 被引量:1
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作者 刘振兴 柯浩 +3 位作者 孟轩 林敏 陈棠堂 颜远义 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期134-136,共3页
提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通... 提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通过综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性、抗原性指数,预测KHV ORF132蛋白主要B细胞表位区段位于Leu40~Ala45、Asn53~Pro66、Arg97~Thr118、Ala125~Pro136、Glu140~Arg145、Asn160~Arg170。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒 囊膜蛋白 B细胞表位
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褐塘鳢的繁养殖技术(一) 被引量:5
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作者 陈棠堂 邬国民 《科学养鱼》 2002年第10期10-11,共2页
关键词 分类地位 形态特征 生物学特性 繁殖 苗种培育 褐塘鳢
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褐塘鳢的繁养殖技术(二) 被引量:2
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作者 陈棠堂 邬国民 《科学养鱼》 2002年第11期26-27,共2页
关键词 鱼苗培育 成鱼 褐塘鳢 养殖技术
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罗氏沼虾越冬新技术
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作者 陈棠堂 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1999年第1期42-43,共2页
罗氏沼虾为热带淡水虾,抗寒能力差。17—18℃活动减弱,摄食减少,14℃以下持续几天就会冻死。罗氏沼虾收获季节成虾大量上市,易造成货多价跌,而干塘捕虾售完后易造成货缺价扬现象。因此,罗氏沼虾的越冬对丰富水产品市场,提... 罗氏沼虾为热带淡水虾,抗寒能力差。17—18℃活动减弱,摄食减少,14℃以下持续几天就会冻死。罗氏沼虾收获季节成虾大量上市,易造成货多价跌,而干塘捕虾售完后易造成货缺价扬现象。因此,罗氏沼虾的越冬对丰富水产品市场,提高渔业经济效益具有十分重要的意义。... 展开更多
关键词 罗氏沼虾 越冬技术 池塘条件 池塘清整
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