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锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达
被引量:
11
1
作者
柯浩
刘振兴
+2 位作者
林敏
孟轩
陈棠堂
《南方水产》
2010年第4期56-62,共7页
从感染锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)的锦鲤(Cyprinus carpiokoi)肾脏组织中提取DNA,通过PCR扩增了KHVORF59基因。该基因全长411bp,所编码的蛋白包含136个氨基酸,分子量14.3kDa,等电点(PI)6.91,有12个潜在的O糖基化位点。此研究克...
从感染锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)的锦鲤(Cyprinus carpiokoi)肾脏组织中提取DNA,通过PCR扩增了KHVORF59基因。该基因全长411bp,所编码的蛋白包含136个氨基酸,分子量14.3kDa,等电点(PI)6.91,有12个潜在的O糖基化位点。此研究克隆的KHVORF59基因第130位碱基由G突变为A,使其编码的第44位氨基酸由Ala突变为Thr。采用DNAStar程序,在综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性和抗原性指数的基础上,预测了KHVORF59蛋白主要B细胞表位,并将其区段的编码序列与KHVORF59完整编码序列分别克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET32a-ORF59S和pET32a-ORF59C,转入大肠杆菌Rosetta菌株,IPTG诱导表达。SDS-PAGE及WesternBlot分析显示,pET32a-ORF59S可以高效表达,表达的截短KHVORF59蛋白主要以可溶性形式存在,采用HisBindResin填料,层析纯化了该截短蛋白。
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关键词
锦鲤疱疹病毒
囊膜蛋白
B细胞表位
原核表达
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职称材料
锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF132的克隆及分析
被引量:
1
2
作者
刘振兴
柯浩
+3 位作者
孟轩
林敏
陈棠堂
颜远义
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期134-136,共3页
提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通...
提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通过综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性、抗原性指数,预测KHV ORF132蛋白主要B细胞表位区段位于Leu40~Ala45、Asn53~Pro66、Arg97~Thr118、Ala125~Pro136、Glu140~Arg145、Asn160~Arg170。
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关键词
锦鲤疱疹病毒
囊膜蛋白
B细胞表位
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职称材料
褐塘鳢的繁养殖技术(一)
被引量:
5
3
作者
陈棠堂
邬国民
《科学养鱼》
2002年第10期10-11,共2页
关键词
分类地位
形态特征
生物学特性
繁殖
苗种培育
褐塘鳢
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职称材料
褐塘鳢的繁养殖技术(二)
被引量:
2
4
作者
陈棠堂
邬国民
《科学养鱼》
2002年第11期26-27,共2页
关键词
鱼苗培育
成鱼
褐塘鳢
养殖技术
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职称材料
罗氏沼虾越冬新技术
5
作者
陈棠堂
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
1999年第1期42-43,共2页
罗氏沼虾为热带淡水虾,抗寒能力差。17—18℃活动减弱,摄食减少,14℃以下持续几天就会冻死。罗氏沼虾收获季节成虾大量上市,易造成货多价跌,而干塘捕虾售完后易造成货缺价扬现象。因此,罗氏沼虾的越冬对丰富水产品市场,提...
罗氏沼虾为热带淡水虾,抗寒能力差。17—18℃活动减弱,摄食减少,14℃以下持续几天就会冻死。罗氏沼虾收获季节成虾大量上市,易造成货多价跌,而干塘捕虾售完后易造成货缺价扬现象。因此,罗氏沼虾的越冬对丰富水产品市场,提高渔业经济效益具有十分重要的意义。...
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关键词
罗氏沼虾
越冬技术
池塘条件
池塘清整
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职称材料
题名
锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达
被引量:
11
1
作者
柯浩
刘振兴
林敏
孟轩
陈棠堂
机构
广东省农业科学院兽医研究所
中山市海洋与渔业局
出处
《南方水产》
2010年第4期56-62,共7页
基金
广东省农业科学院兽医研究所所长基金项目(2009SJJ05)
中山市海洋与渔业局资助
文摘
从感染锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)的锦鲤(Cyprinus carpiokoi)肾脏组织中提取DNA,通过PCR扩增了KHVORF59基因。该基因全长411bp,所编码的蛋白包含136个氨基酸,分子量14.3kDa,等电点(PI)6.91,有12个潜在的O糖基化位点。此研究克隆的KHVORF59基因第130位碱基由G突变为A,使其编码的第44位氨基酸由Ala突变为Thr。采用DNAStar程序,在综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性和抗原性指数的基础上,预测了KHVORF59蛋白主要B细胞表位,并将其区段的编码序列与KHVORF59完整编码序列分别克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET32a-ORF59S和pET32a-ORF59C,转入大肠杆菌Rosetta菌株,IPTG诱导表达。SDS-PAGE及WesternBlot分析显示,pET32a-ORF59S可以高效表达,表达的截短KHVORF59蛋白主要以可溶性形式存在,采用HisBindResin填料,层析纯化了该截短蛋白。
关键词
锦鲤疱疹病毒
囊膜蛋白
B细胞表位
原核表达
Keywords
Koi herpesvirus
envelope protein
B cell epitope
prokaryotic expression
分类号
Q939.47 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF132的克隆及分析
被引量:
1
2
作者
刘振兴
柯浩
孟轩
林敏
陈棠堂
颜远义
机构
广东省农科院兽医研究所
广东省兽医公共卫生公共实验室
中山市海洋与渔业局
广东省水生动物疫病预防控制中心
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期134-136,共3页
基金
广东省农业科学院兽医研究所所长基金(2009SJJ05)
广东省2009年省级鱼病防治专项基金(2130108)
文摘
提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通过综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性、抗原性指数,预测KHV ORF132蛋白主要B细胞表位区段位于Leu40~Ala45、Asn53~Pro66、Arg97~Thr118、Ala125~Pro136、Glu140~Arg145、Asn160~Arg170。
关键词
锦鲤疱疹病毒
囊膜蛋白
B细胞表位
Keywords
KHV
envelope protein
B cell epitope
分类号
S965.116 [农业科学—水产养殖]
Q785 [生物学—分子生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
褐塘鳢的繁养殖技术(一)
被引量:
5
3
作者
陈棠堂
邬国民
机构
广东中山市海洋与渔业局
中国水产科学研究院珠江水产研究所
出处
《科学养鱼》
2002年第10期10-11,共2页
关键词
分类地位
形态特征
生物学特性
繁殖
苗种培育
褐塘鳢
分类号
S965.119 [农业科学—水产养殖]
在线阅读
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职称材料
题名
褐塘鳢的繁养殖技术(二)
被引量:
2
4
作者
陈棠堂
邬国民
机构
广东中山市海洋与渔业局
中国水产科学研究院珠江水产研究所
出处
《科学养鱼》
2002年第11期26-27,共2页
关键词
鱼苗培育
成鱼
褐塘鳢
养殖技术
分类号
S965.199 [农业科学—水产养殖]
在线阅读
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职称材料
题名
罗氏沼虾越冬新技术
5
作者
陈棠堂
机构
中山市水产增殖站
出处
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
1999年第1期42-43,共2页
文摘
罗氏沼虾为热带淡水虾,抗寒能力差。17—18℃活动减弱,摄食减少,14℃以下持续几天就会冻死。罗氏沼虾收获季节成虾大量上市,易造成货多价跌,而干塘捕虾售完后易造成货缺价扬现象。因此,罗氏沼虾的越冬对丰富水产品市场,提高渔业经济效益具有十分重要的意义。...
关键词
罗氏沼虾
越冬技术
池塘条件
池塘清整
分类号
S966.121 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF59的克隆、分析及其主要B细胞表位区的原核表达
柯浩
刘振兴
林敏
孟轩
陈棠堂
《南方水产》
2010
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF132的克隆及分析
刘振兴
柯浩
孟轩
林敏
陈棠堂
颜远义
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
褐塘鳢的繁养殖技术(一)
陈棠堂
邬国民
《科学养鱼》
2002
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
褐塘鳢的繁养殖技术(二)
陈棠堂
邬国民
《科学养鱼》
2002
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
5
罗氏沼虾越冬新技术
陈棠堂
《淡水渔业》
CSCD
北大核心
1999
0
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职称材料
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