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褐飞虱自噬相关基因NlATG13的表达与功能分析
被引量：
2
1
作者
吴建艮
矫启启
+4 位作者
俞飞飞
郑园园
陈桐桐
郝培应
俞晓平
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期967-976,共10页
【目的】自噬参与多种细胞生理过程,自噬相关蛋白ATG13是ATG1/13复合物的组成部分,在启动自噬中发挥着重要作用。本研究旨在分析ATG13在褐飞虱Nilaparvata lugens中发挥的功能,评估其作为害虫防治靶标的潜力。【方法】基于褐飞虱转录组...
【目的】自噬参与多种细胞生理过程,自噬相关蛋白ATG13是ATG1/13复合物的组成部分,在启动自噬中发挥着重要作用。本研究旨在分析ATG13在褐飞虱Nilaparvata lugens中发挥的功能,评估其作为害虫防治靶标的潜力。【方法】基于褐飞虱转录组数据,利用RACE克隆褐飞虱NlATG13的cDNA全长序列;应用生物信息学技术分析NlATG13的核苷酸和氨基酸序列特征。利用RT-qPCR检测其在褐飞虱不同发育阶段(1-5龄若虫和雌雄成虫)和不同组织(5龄若虫头、胸、中肠和脂肪体以及刚羽化雌成虫的卵巢)中的表达模式。通过显微注射ds NlATG13至3龄若虫进行RNAi敲减NlATG13的表达,探究其对褐飞虱生存和中肠细胞自噬的影响;利用RT-qPCR检测RNAi 4 d时3龄若虫中糖原合成与代谢通路相关基因NlGSK 3,NlGS和NlGP的表达量。【结果】克隆得到NlATG13的cDNA全长序列(GenBank登录号:MF805752),其开放阅读框长1203 bp,编码一个含400个氨基酸的蛋白质(GenBank登录号:AWW05678.1)。系统发育分析表明,在纳入分析的物种中,NlATG13蛋白与半翅目温带臭虫Cimex lectularius和茶翅蝽Halyomorpha halys的ATG13蛋白进化关系较为接近。发育表达谱结果表明NlATG13在褐飞虱3和5龄若虫中的表达量显著高于在1-2龄若虫、雌成虫和雄成虫中的;组织表达谱结果表明NlATG13在5龄若虫头部和脂肪体中的相对表达量较高,在胸部的表达量最低。RNAi结果显示,与ds GFP对照组相比ds NlATG13处理组中褐飞虱中肠细胞中存在明显的糖原颗粒积累,NlGS,NlGSK 3和NlGP的表达量均无显著变化,组织ATP含量显著降低;褐飞虱的存活率显著降低,处理第10天时褐飞虱存活率下降到41.4%,而ds GFP对照组的存活率保持在85.6%的较高水平。【结论】RNA干扰NlATG13基因对褐飞虱的生存和中肠细胞自噬具有显著的抑制效果,NlATG13基因具有作为褐飞虱防治靶标的潜力。
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关键词
褐飞虱
NlATG13
RNA干扰
基因克隆
自噬
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职称材料
广东地区大学生野生动物保护意识调查
被引量：
2
2
作者
郭宣佑
曹望华
+7 位作者
王璐璐
谭佩钰
曾文诗
陈桐桐
关宝怡
何慧敏
蓝迪维
杨欣丽
《绿色科技》
2020年第14期69-71,74,共4页
2020年使野生动物保护这一议题再次进入大众视野,了解大学生野生动物保护意识现状有助于探索目前在野生动物保护方面存在的问题,并能以此对野生动物保护宣教工作提出建议。本调查以广东大学生为对象进行线上问卷调查,采用Excel和SPSS软...
2020年使野生动物保护这一议题再次进入大众视野,了解大学生野生动物保护意识现状有助于探索目前在野生动物保护方面存在的问题,并能以此对野生动物保护宣教工作提出建议。本调查以广东大学生为对象进行线上问卷调查,采用Excel和SPSS软件,从广东大学生野生动物保护知识了解程度、途径和野生动物保护态度三方面分析了数据,总结了广东大学生野生动物保护意识的特点,并据此提出进一步加强保护意识的可行性建议。
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关键词
野生动物
保护意识
广东大学生
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职称材料
褐飞虱自噬相关基因NlATG4的表达与功能
3
作者
矫启启
吴建艮
+5 位作者
冯娅琳
俞飞飞
陈桐桐
郑园园
郝培应
俞晓平
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2023年第1期111-121,共11页
ATG4是一种半胱氨酸蛋白酶,负责ATG8蛋白羧基末端的切割,在自噬体形成过程中发挥重要作用。本研究克隆得到褐飞虱ATG4基因(NlATG4)的cDNA全长序列(GenBank登录号:MF062502.1)。RT-qPCR分析结果表明,NlATG4基因在褐飞虱的若虫和成虫时期...
ATG4是一种半胱氨酸蛋白酶,负责ATG8蛋白羧基末端的切割,在自噬体形成过程中发挥重要作用。本研究克隆得到褐飞虱ATG4基因(NlATG4)的cDNA全长序列(GenBank登录号:MF062502.1)。RT-qPCR分析结果表明,NlATG4基因在褐飞虱的若虫和成虫时期均有表达,1~2龄若虫的表达量最高,在其他发育阶段的表达量稍低。RNAi结果显示,在dsRNA注射后的第4d,靶标基因NlATG4的表达量显著下降(仅为dsGFP对照组的22%),同时,NlATG4的RNA干扰导致虫体ATP含量显著降低,仅为1.0μmol/(L·mg蛋白-1),为对照组的25%;在注射后的第6d,dsNlATG4处理组的褐飞虱存活率出现显著降低,其脂肪体组织变得松散,大型脂滴(直径≥5.0μm)数量增多,类酵母共生菌周围泡状结构的界限基本消失;在注射后的第8 d,dsNlATG4处理的褐飞虱的存活率下降为36.7%,比dsGFP对照组的存活率下降53.3%。本研究表明靶向NlATG4基因的RNA干扰会破坏褐飞虱脂肪体的结构完整性和类酵母共生菌的微环境,影响脂类物质代谢和ATP含量,并导致褐飞虱存活率降低。因此,NlATG4基因在褐飞虱正常生长发育中发挥重要作用,在褐飞虱防治中具有一定的潜力。
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关键词
褐飞虱
NlATG4基因
RNAI
脂肪体
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职称材料
题名
褐飞虱自噬相关基因NlATG13的表达与功能分析
被引量：
2
1
作者
吴建艮
矫启启
俞飞飞
郑园园
陈桐桐
郝培应
俞晓平
机构
中国计量大学生命科学学院
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第8期967-976,共10页
基金
国家自然科学基金项目(U21A20223,31672026,32011530117)
浙江省重点研发项目(2019C02015,2022C02047)
+1 种基金
浙江省基础公益研究计划项目(LY20C140005)
中国计量大学科研标志性发展专项(2020YW27)。
文摘
【目的】自噬参与多种细胞生理过程,自噬相关蛋白ATG13是ATG1/13复合物的组成部分,在启动自噬中发挥着重要作用。本研究旨在分析ATG13在褐飞虱Nilaparvata lugens中发挥的功能,评估其作为害虫防治靶标的潜力。【方法】基于褐飞虱转录组数据,利用RACE克隆褐飞虱NlATG13的cDNA全长序列;应用生物信息学技术分析NlATG13的核苷酸和氨基酸序列特征。利用RT-qPCR检测其在褐飞虱不同发育阶段(1-5龄若虫和雌雄成虫)和不同组织(5龄若虫头、胸、中肠和脂肪体以及刚羽化雌成虫的卵巢)中的表达模式。通过显微注射ds NlATG13至3龄若虫进行RNAi敲减NlATG13的表达,探究其对褐飞虱生存和中肠细胞自噬的影响;利用RT-qPCR检测RNAi 4 d时3龄若虫中糖原合成与代谢通路相关基因NlGSK 3,NlGS和NlGP的表达量。【结果】克隆得到NlATG13的cDNA全长序列(GenBank登录号:MF805752),其开放阅读框长1203 bp,编码一个含400个氨基酸的蛋白质(GenBank登录号:AWW05678.1)。系统发育分析表明,在纳入分析的物种中,NlATG13蛋白与半翅目温带臭虫Cimex lectularius和茶翅蝽Halyomorpha halys的ATG13蛋白进化关系较为接近。发育表达谱结果表明NlATG13在褐飞虱3和5龄若虫中的表达量显著高于在1-2龄若虫、雌成虫和雄成虫中的;组织表达谱结果表明NlATG13在5龄若虫头部和脂肪体中的相对表达量较高,在胸部的表达量最低。RNAi结果显示,与ds GFP对照组相比ds NlATG13处理组中褐飞虱中肠细胞中存在明显的糖原颗粒积累,NlGS,NlGSK 3和NlGP的表达量均无显著变化,组织ATP含量显著降低;褐飞虱的存活率显著降低,处理第10天时褐飞虱存活率下降到41.4%,而ds GFP对照组的存活率保持在85.6%的较高水平。【结论】RNA干扰NlATG13基因对褐飞虱的生存和中肠细胞自噬具有显著的抑制效果,NlATG13基因具有作为褐飞虱防治靶标的潜力。
关键词
褐飞虱
NlATG13
RNA干扰
基因克隆
自噬
Keywords
Nilaparvata lugens
NlATG13
RNA interference
gene cloning
autophagy
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
广东地区大学生野生动物保护意识调查
被引量：
2
2
作者
郭宣佑
曹望华
王璐璐
谭佩钰
曾文诗
陈桐桐
关宝怡
何慧敏
蓝迪维
杨欣丽
机构
广东海洋大学法政学院
出处
《绿色科技》
2020年第14期69-71,74,共4页
基金
广东海洋大学协同育人平台(编号:校教务〔2017〕94号)。
文摘
2020年使野生动物保护这一议题再次进入大众视野,了解大学生野生动物保护意识现状有助于探索目前在野生动物保护方面存在的问题,并能以此对野生动物保护宣教工作提出建议。本调查以广东大学生为对象进行线上问卷调查,采用Excel和SPSS软件,从广东大学生野生动物保护知识了解程度、途径和野生动物保护态度三方面分析了数据,总结了广东大学生野生动物保护意识的特点,并据此提出进一步加强保护意识的可行性建议。
关键词
野生动物
保护意识
广东大学生
分类号
S863 [农业科学—野生动物驯养]
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职称材料
题名
褐飞虱自噬相关基因NlATG4的表达与功能
3
作者
矫启启
吴建艮
冯娅琳
俞飞飞
陈桐桐
郑园园
郝培应
俞晓平
机构
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室
出处
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2023年第1期111-121,共11页
基金
国家自然科学基金(31672026,U21A20223,32011530117)
浙江省重点研发项目(2019C02015,2022C02047)
+1 种基金
浙江省基础公益研究计划项目(LY20C140005)
中国计量大学科研标志性发展专项(2020YW27)。
文摘
ATG4是一种半胱氨酸蛋白酶,负责ATG8蛋白羧基末端的切割,在自噬体形成过程中发挥重要作用。本研究克隆得到褐飞虱ATG4基因(NlATG4)的cDNA全长序列(GenBank登录号:MF062502.1)。RT-qPCR分析结果表明,NlATG4基因在褐飞虱的若虫和成虫时期均有表达,1~2龄若虫的表达量最高,在其他发育阶段的表达量稍低。RNAi结果显示,在dsRNA注射后的第4d,靶标基因NlATG4的表达量显著下降(仅为dsGFP对照组的22%),同时,NlATG4的RNA干扰导致虫体ATP含量显著降低,仅为1.0μmol/(L·mg蛋白-1),为对照组的25%;在注射后的第6d,dsNlATG4处理组的褐飞虱存活率出现显著降低,其脂肪体组织变得松散,大型脂滴(直径≥5.0μm)数量增多,类酵母共生菌周围泡状结构的界限基本消失;在注射后的第8 d,dsNlATG4处理的褐飞虱的存活率下降为36.7%,比dsGFP对照组的存活率下降53.3%。本研究表明靶向NlATG4基因的RNA干扰会破坏褐飞虱脂肪体的结构完整性和类酵母共生菌的微环境,影响脂类物质代谢和ATP含量,并导致褐飞虱存活率降低。因此,NlATG4基因在褐飞虱正常生长发育中发挥重要作用,在褐飞虱防治中具有一定的潜力。
关键词
褐飞虱
NlATG4基因
RNAI
脂肪体
Keywords
Nilaparvata lugens
NlATG4
RNAi
fat body
分类号
Q96 [生物学—昆虫学]
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1
褐飞虱自噬相关基因NlATG13的表达与功能分析
吴建艮
矫启启
俞飞飞
郑园园
陈桐桐
郝培应
俞晓平
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
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职称材料
2
广东地区大学生野生动物保护意识调查
郭宣佑
曹望华
王璐璐
谭佩钰
曾文诗
陈桐桐
关宝怡
何慧敏
蓝迪维
杨欣丽
《绿色科技》
2020
2
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3
褐飞虱自噬相关基因NlATG4的表达与功能
矫启启
吴建艮
冯娅琳
俞飞飞
陈桐桐
郑园园
郝培应
俞晓平
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2023
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