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高血糖条件下NF-κB激活对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制
1
作者
张宇
阿布都赛米·艾尼
+2 位作者
多力昆·木台力甫
郑博源
阿布都乃比·麦麦提艾力
《山东医药》
CAS
2024年第25期1-5,共5页
目的探讨高血糖条件下核因子κB(NF-κB)激活对小鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的影响及其机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠48只,适应性饲养1周,随机分为NG-Sham组(非DM+假手术)与NG-IR组(非DM+IR)、DM-Sham组(DM+假手术)与DM-IR组(DM+IR)以...
目的探讨高血糖条件下核因子κB(NF-κB)激活对小鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的影响及其机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠48只,适应性饲养1周,随机分为NG-Sham组(非DM+假手术)与NG-IR组(非DM+IR)、DM-Sham组(DM+假手术)与DM-IR组(DM+IR)以及DM-IR-NC组(DM+IR+阴性对照)与DM-IR-NF-κB组(DM+IR+NF-κB),每组8只。NG-Sham组与NG-IR组正常饲料喂养,NG-IR组通过结扎冠状动脉左前降支构建IR模型(缺血60 min再灌注24 h),NG-Sham组开胸暴露冠状动脉左前降支,但不结扎。DM-IR组连续4天腹腔注射链脲佐菌素40 mg/kg诱导DM模型,成模后1周同法构建IR模型。DM-Sham组同法诱导DM模型,成模后1周开胸暴露冠状动脉左前降支,但不结扎。DM-IR-NF-κB组与DM-IR-NC组同法诱导DM模型,成模后1周同法构建IR模型,DM-IR-NF-κB组开胸前30 min尾静脉注射NF-κB重组蛋白0.5 mg/kg,DM-IR-NC组开胸前30 min尾静脉注射等量溶剂。采用TTC染色法评估NG-IR组与DM-IR组心肌缺血面积,采用RT-qPCR法检测NG-IR组与DM-IR组心肌组织NF-κB、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA相对表达量。采用JC-1染色法评估NG-Sham组、NG-IR组、DM-Sham组和DM-IR组心肌细胞线粒体膜电位,采用MitoSOX染色法评估心肌细胞线粒体活性氧(ROS)含量。采用Western blotting法检测NG-IR组与DM-IR组心肌组织AMPK、p-AMPK蛋白相对表达量,计算p-AMPK/AMPK。采用比色法检测DM-IR-NC组与DM-IR-NF-κB组血清AST、LDH含量,采用双抗体夹心ELISA法检测血清CK-MB含量。结果与NG-IR组比较,DM-IR组心肌缺血面积增加(P<0.05),心肌组织NF-κB mRNA相对表达量上调(P均<0.05),而心肌组织IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA相对表达量变化不明显(P均>0.05)。与NG-Sham组比较,NG-IR组与DM-Sham组心肌细胞线粒体膜电位下降,心肌细胞线粒体ROS含量升高(P均<0.05);与NG-IR组比较,DM-IR组心肌细胞线粒体膜电位下降,心肌细胞线粒体ROS含量升高(P均<0.05)。Pearson相关分析发现,IR小鼠心肌组织NF-κB mRNA相对表达量与心肌细胞线粒体膜电位呈正相关关系(r=0.496,P<0.05)。与NG-IR组比较,DM-IR组心肌组织AMPK蛋白相对表达量升高,p-AMPK蛋白相对表达量降低,p-AMPK/AMPK降低(P均<0.05)。与DM-IR-NC组比较,DM-IR-NF-κB组血清AST、LDH、CK-MB含量均升高(P均<0.05),心肌组织p-AMPK蛋白相对表达量和p-AMPK/AMPK均降低(P均<0.05),而AMPK蛋白相对表达量无明显变化(P>0.05)。结论高血糖条件下NF-κB激活可增强小鼠心肌IR后缺血心肌的易损性,其机制可能与NF-κB能够诱导AMPK信号通路失活和线粒体质量控制紊乱有关。
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关键词
心肌缺血再灌注损伤
高血糖
核因子ΚB
腺苷酸活化蛋白激酶
线粒体质量
小鼠
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职称材料
题名
高血糖条件下NF-κB激活对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制
1
作者
张宇
阿布都赛米·艾尼
多力昆·木台力甫
郑博源
阿布都乃比·麦麦提艾力
机构
新疆医科大学第一附属医院心脏外科
出处
《山东医药》
CAS
2024年第25期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(82060907)。
文摘
目的探讨高血糖条件下核因子κB(NF-κB)激活对小鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的影响及其机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠48只,适应性饲养1周,随机分为NG-Sham组(非DM+假手术)与NG-IR组(非DM+IR)、DM-Sham组(DM+假手术)与DM-IR组(DM+IR)以及DM-IR-NC组(DM+IR+阴性对照)与DM-IR-NF-κB组(DM+IR+NF-κB),每组8只。NG-Sham组与NG-IR组正常饲料喂养,NG-IR组通过结扎冠状动脉左前降支构建IR模型(缺血60 min再灌注24 h),NG-Sham组开胸暴露冠状动脉左前降支,但不结扎。DM-IR组连续4天腹腔注射链脲佐菌素40 mg/kg诱导DM模型,成模后1周同法构建IR模型。DM-Sham组同法诱导DM模型,成模后1周开胸暴露冠状动脉左前降支,但不结扎。DM-IR-NF-κB组与DM-IR-NC组同法诱导DM模型,成模后1周同法构建IR模型,DM-IR-NF-κB组开胸前30 min尾静脉注射NF-κB重组蛋白0.5 mg/kg,DM-IR-NC组开胸前30 min尾静脉注射等量溶剂。采用TTC染色法评估NG-IR组与DM-IR组心肌缺血面积,采用RT-qPCR法检测NG-IR组与DM-IR组心肌组织NF-κB、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA相对表达量。采用JC-1染色法评估NG-Sham组、NG-IR组、DM-Sham组和DM-IR组心肌细胞线粒体膜电位,采用MitoSOX染色法评估心肌细胞线粒体活性氧(ROS)含量。采用Western blotting法检测NG-IR组与DM-IR组心肌组织AMPK、p-AMPK蛋白相对表达量,计算p-AMPK/AMPK。采用比色法检测DM-IR-NC组与DM-IR-NF-κB组血清AST、LDH含量,采用双抗体夹心ELISA法检测血清CK-MB含量。结果与NG-IR组比较,DM-IR组心肌缺血面积增加(P<0.05),心肌组织NF-κB mRNA相对表达量上调(P均<0.05),而心肌组织IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA相对表达量变化不明显(P均>0.05)。与NG-Sham组比较,NG-IR组与DM-Sham组心肌细胞线粒体膜电位下降,心肌细胞线粒体ROS含量升高(P均<0.05);与NG-IR组比较,DM-IR组心肌细胞线粒体膜电位下降,心肌细胞线粒体ROS含量升高(P均<0.05)。Pearson相关分析发现,IR小鼠心肌组织NF-κB mRNA相对表达量与心肌细胞线粒体膜电位呈正相关关系(r=0.496,P<0.05)。与NG-IR组比较,DM-IR组心肌组织AMPK蛋白相对表达量升高,p-AMPK蛋白相对表达量降低,p-AMPK/AMPK降低(P均<0.05)。与DM-IR-NC组比较,DM-IR-NF-κB组血清AST、LDH、CK-MB含量均升高(P均<0.05),心肌组织p-AMPK蛋白相对表达量和p-AMPK/AMPK均降低(P均<0.05),而AMPK蛋白相对表达量无明显变化(P>0.05)。结论高血糖条件下NF-κB激活可增强小鼠心肌IR后缺血心肌的易损性,其机制可能与NF-κB能够诱导AMPK信号通路失活和线粒体质量控制紊乱有关。
关键词
心肌缺血再灌注损伤
高血糖
核因子ΚB
腺苷酸活化蛋白激酶
线粒体质量
小鼠
Keywords
myocardial ischemia-reperfusion injury
hyperglycemia
nuclear factorκB
adenosine monophosphateactivated protein kinase
mitochondrial quality
mice
分类号
R654 [医药卫生—外科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高血糖条件下NF-κB激活对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制
张宇
阿布都赛米·艾尼
多力昆·木台力甫
郑博源
阿布都乃比·麦麦提艾力
《山东医药》
CAS
2024
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