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分子改造提高L-天冬酰胺酶的催化活性: 1; 作者李玉曾波 +2 位作者阳鹏辉李阳阳刘松《食品与发酵工业》北大核心 2025年第5期85-94,共10页; L-天冬酰胺酶能催化L-天冬酰胺水解生成L-天冬氨酸,可有效抑制食品高温加工中丙烯酰胺(2A类致癌物)的形成。尽管I型L-天冬酰胺酶热稳定性较好,但其催化活性仍有待提高。该研究对吉利热球菌(Thermococcus zilligii)I型L-天冬酰胺酶(TzI)... 展开更多; 关键词吉利热球菌 L-天冬酰胺酶分子改造饱和突变催化活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于动态互相关性和折叠自由能变分析的谷氨酰胺转氨酶热稳定性改造: 2; 作者阳鹏辉邱文轩 +2 位作者叶佳才堵国成刘松《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第24期1-8,共8页; 茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase,TGase)能催化蛋白质交联,被广泛用于食品加工。前期研究构建了S.mobaraensis TGase耐热突变体FRAPD-TGm2,提高了其在高温条件下的应用性能。该研究基于动态互相... 展开更多; 关键词茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶热稳定性动态互相关性折叠自由能; 在线阅读下载PDF 职称材料

β-葡萄糖苷酶催化活性改造及在毕赤酵母中的高效表达: 3; 作者吴涛旭阳鹏辉 +1 位作者李阳阳刘松《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期126-133,共8页; β-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.21)能催化底物非还原末端的β-D-葡萄糖苷键水解释放葡萄糖和相应配基,是纤维素糖化过程中的关键酶之一。篮状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)来源的β-葡萄糖苷酶bgl3A热稳定性较好,但催化活性还亟待提... 展开更多; 关键词 Β-葡萄糖苷酶催化活性底物结合能毕赤酵母高效表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

黑曲霉酸性果胶裂解酶在大肠杆菌中的表达和酶学性质研究: 4; 作者张海云马佳宁 +3 位作者李阳阳阳鹏辉宋伟艳刘松《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期22-29,共8页; 酸性果胶裂解酶能以β-反式消去作用断裂果胶中的α-1,4糖苷键形成不饱和寡聚半乳糖醛酸,对食品等工业中高酯化果胶降解具有重要意义。该研究将黑曲霉Aspergillus niger AG11来源的酸性果胶裂解酶(pelA)在大肠杆菌Escherichia coli BL21... 展开更多; 关键词黑曲霉酸性果胶裂解酶胞内表达蛋白标签优化酶学性质; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名分子改造提高L-天冬酰胺酶的催化活性: 1; 作者李玉曾波阳鹏辉李阳阳刘松; 机构江南大学江南大学生物工程学院; 出处《食品与发酵工业》北大核心 2025年第5期85-94,共10页; 基金国家重点研发计划项目(2021YFC2101400)。; 文摘 L-天冬酰胺酶能催化L-天冬酰胺水解生成L-天冬氨酸,可有效抑制食品高温加工中丙烯酰胺(2A类致癌物)的形成。尽管I型L-天冬酰胺酶热稳定性较好,但其催化活性仍有待提高。该研究对吉利热球菌(Thermococcus zilligii)I型L-天冬酰胺酶(TzI)进行分子改造,以期提高其催化活性。首先,利用分子对接和虚拟饱和突变筛选了10个活性可能提高的TzI突变体,并对上述突变体进行表达、纯化及酶学性质分析。结果显示,突变酶L265W的比酶活力达到2751.13 U/mg,较原始酶TzI提升29%。尽管最适反应温度仍为90℃,但突变酶L265W在80、85及90℃的半衰期较TzI分别提升1.5、1.56和1.43倍。其次,在80℃热烫条件下用等量的酶处理薯条,并测定其油炸后的丙烯酰胺含量。结果表明,L265W可使油炸薯条中丙烯酰胺下降65%,优于商品酶和野生型TzI的处理效果。因此,该研究构建的突变酶L265W具有良好的应用潜力,有助于推动L-天冬酰胺酶的工业化应用。; 关键词吉利热球菌 L-天冬酰胺酶分子改造饱和突变催化活性; Keywords Thermococcus zilligii L-asparaginase molecular modification saturation mutation catalytic activity; 分类号 TS201.25 [轻工技术与工程—食品科学] TQ426.97 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于动态互相关性和折叠自由能变分析的谷氨酰胺转氨酶热稳定性改造: 2; 作者阳鹏辉邱文轩叶佳才堵国成刘松; 机构江南大学江南大学生物工程学院嘉兴未来食品研究院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第24期1-8,共8页; 基金国家重点研发计划(2021YFC2101400) 国家自然科学基金(32071474,31771913)。; 文摘茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase,TGase)能催化蛋白质交联,被广泛用于食品加工。前期研究构建了S.mobaraensis TGase耐热突变体FRAPD-TGm2,提高了其在高温条件下的应用性能。该研究基于动态互相关性鉴定得到热稳定性进一步提高的TGase突变体。首先,通过分子动力学模拟和动态互相关性分析确定了FRAPD-TGm2分子中与其底物口袋柔性区域具有动态互相关性的48个残基。其次,基于Rosetta Cartesian_ddg对上述残基进行虚拟饱和突变,对折叠自由能变化小于-1 kcal/mol的20个突变体进行表达、纯化和酶学性质表征。其中,突变体FRAPD-TGm2-Y34 W的60℃半衰期和65℃比酶活力分别达到100.5 min和134.2 U/mg,较FRAPD-TGm2提升89.1%和28.5%。此外,发现了远端位点His201和Asn32对FRAPD-TGm2比酶活力和热稳定性具有显著影响。结果表明,基于动态互相关性和折叠自由能变分析的酶分子改造能有效提高TGase的热稳定性。; 关键词茂原链霉菌谷氨酰胺转氨酶热稳定性动态互相关性折叠自由能; Keywords Streptomyces mobaraensis transglutaminase thermostability dynamic cross-correlation folding free energy; 分类号 TS201.25 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名β-葡萄糖苷酶催化活性改造及在毕赤酵母中的高效表达: 3; 作者吴涛旭阳鹏辉李阳阳刘松; 机构江南大学江南大学生物工程学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期126-133,共8页; 基金国家重点研发计划项目(2021YFC2101400)。; 文摘 β-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.21)能催化底物非还原末端的β-D-葡萄糖苷键水解释放葡萄糖和相应配基,是纤维素糖化过程中的关键酶之一。篮状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)来源的β-葡萄糖苷酶bgl3A热稳定性较好,但催化活性还亟待提高。该研究中,通过Discovery Studio 2022柔性对接模块构建了bgl3A和底物pNPG的复合物结构;基于结合能预测模块对bgl3A催化活性位点6以内的氨基酸残基进行虚拟突变,计算突变前后酶对pNPG的结合能变化;对结合能变化小于-0.7 kcal/mol的20个突变体进行表达、纯化和酶学性质分析。与bgl3A相比,突变体bgl3A-N237Y的比酶活和k_(cat)/K_(m)分别提升了22%和25%。将bgl3A-N237Y在毕赤酵母中表达,通过信号肽替换和共表达分子伴侣使其摇瓶发酵酶活力达106.6 U/mL,较优化前提高75%。研究得到高活性bgl3A突变体及其生产菌将有助于提高其工业化应用效果。; 关键词 Β-葡萄糖苷酶催化活性底物结合能毕赤酵母高效表达; Keywords β-glucosidase catalytic activity substrate binding energy Komagataella phaffii high-level expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程] TQ426.97 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名黑曲霉酸性果胶裂解酶在大肠杆菌中的表达和酶学性质研究: 4; 作者张海云马佳宁李阳阳阳鹏辉宋伟艳刘松; 机构江南大学未来食品科学中心江南大学生物工程学院大连理工大学化工学院; 出处《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期22-29,共8页; 基金国家重点研发计划项目(2019YFA0706900)。; 文摘酸性果胶裂解酶能以β-反式消去作用断裂果胶中的α-1,4糖苷键形成不饱和寡聚半乳糖醛酸,对食品等工业中高酯化果胶降解具有重要意义。该研究将黑曲霉Aspergillus niger AG11来源的酸性果胶裂解酶(pelA)在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,并进行了蛋白标签优化和酶学性质研究。最终确定在N端融合碳水化合物结合结构域(carbohydrate-binding structural domain,CBM)时,pelA的胞内酶活力最高,达到3.25 U/mL,比初始条件下提高4.12倍。对CBM切除前后pelA的酶学性质进行测定,结果表明pelA的比酶活力、最适反应温度及最适反应pH分别为15.45 U/mg、40℃和5.0,pelA在30~50℃孵育2 h保持80%以上活性,这与pelA+CBM相同,在40℃、pH为4.0~5.0时孵育2 h,相对酶活力保持在60%以上,此时pelA+CBM具有80%以上的活性。以柑橘果胶为底物,pelA的K m和k cat分别为4.44 mmol/L和31.44 s^(-1)。该研究结果为pelA的分子改造和在工业生产中的应用奠定了基础。; 关键词黑曲霉酸性果胶裂解酶胞内表达蛋白标签优化酶学性质; Keywords Aspergillus niger acid pectin lyase intracellular expression optimization of melting labels enzymatic properties; 分类号 TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	操作
1	分子改造提高L-天冬酰胺酶的催化活性	李玉曾波阳鹏辉李阳阳刘松	《食品与发酵工业》北大核心	2025	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于动态互相关性和折叠自由能变分析的谷氨酰胺转氨酶热稳定性改造	阳鹏辉邱文轩叶佳才堵国成刘松	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2024	在线阅读下载PDF 职称材料
3	β-葡萄糖苷酶催化活性改造及在毕赤酵母中的高效表达	吴涛旭阳鹏辉李阳阳刘松	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2024	在线阅读下载PDF 职称材料
4	黑曲霉酸性果胶裂解酶在大肠杆菌中的表达和酶学性质研究	张海云马佳宁李阳阳阳鹏辉宋伟艳刘松	《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心	2023	在线阅读下载PDF 职称材料