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CaMV 35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达分析
被引量：
5
1
作者
阳淑金
宋爱萍
+6 位作者
何深颖
朱晓晨
孙静
高姣姣
王银杰
陈发棣
蒋甲福
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期554-559,共6页
[目的]由于CaMV 35S启动子转化菊花存在外源基因表达量低、基因沉默等问题,本研究对35S启动子、2×35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达进行了分析,以期为高效菊花转化提供理论指导。[方法]通过设计引物,利用PCR从p CAMBIA1301 ...
[目的]由于CaMV 35S启动子转化菊花存在外源基因表达量低、基因沉默等问题,本研究对35S启动子、2×35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达进行了分析,以期为高效菊花转化提供理论指导。[方法]通过设计引物,利用PCR从p CAMBIA1301 Vector中克隆了35S启动子、2×35S启动子的序列并插入pORE R2载体中,分别获得了重组载体p ORE R2-35S:GUS和p ORE R2-2×35S:GUS,通过农杆菌介导法将构建的遗传转化载体分别导入切花菊品种‘神马’中。[结果]试验共转化2 296个菊花叶盘,经过筛选共得到16个过量表达的转基因株系。经PCR验证,目标片段已经成功插入转基因株系基因组。荧光定量PCR分析和染色分析显示,在转基因菊花中2×35S比35S启动子表现出驱动GUS基因高量表达的特性。[结论]在选择合适菊花品种的基础上,2×35S比35S启动子可以更加高效地促进基因表达。
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关键词
菊花
转基因
35S启动子
GUS表达
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职称材料
菊花高效瞬时转化体系建立及稳定遗传植株再生
被引量：
4
2
作者
邓叶
阳淑金
+5 位作者
杜新平
董彬
任丽萍
房伟民
陈发棣
蒋甲福
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期48-53,共6页
[目的]本试验的目的是通过瞬时转化解决菊花转基因中存在的两大难题:转化效率低和表达水平低。[方法]通过农杆菌注射渗透法将含有GUS基因(编码β-葡糖苷酸酶)的表达载体pORE R1-2×35S∷GUS转入菊花‘优香’叶片中,进行瞬时表达,并...
[目的]本试验的目的是通过瞬时转化解决菊花转基因中存在的两大难题:转化效率低和表达水平低。[方法]通过农杆菌注射渗透法将含有GUS基因(编码β-葡糖苷酸酶)的表达载体pORE R1-2×35S∷GUS转入菊花‘优香’叶片中,进行瞬时表达,并组织培养转化后的叶片,利用GUS化学染色法和RT-PCR进行转化植株鉴定。[结果]菊花‘优香’瞬时表达的转化效率高达76.7%,外源基因(GUS)的表达水平也较理想,尤以第4和第5片完全展开叶(从形态学上端向形态学下端数)表现最佳。经过3~4个月的组织培养和抗性筛选,瞬时转化的‘优香’叶片再生出稳定遗传的转基因株系,转化效率达38.9%。[结论]本试验提供的菊花瞬时表达的方法高效、简单,并能实现稳定遗传。
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关键词
菊花
农杆菌侵染
瞬时表达
GUS
再生
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职称材料
题名
CaMV 35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达分析
被引量：
5
1
作者
阳淑金
宋爱萍
何深颖
朱晓晨
孙静
高姣姣
王银杰
陈发棣
蒋甲福
机构
南京农业大学园艺学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期554-559,共6页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金(KYZ201147)
国家自然科学基金项目(31171987
+2 种基金
31372100)
教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-12-0890)
江苏省"青蓝工程"中青年学术带头人培养计划项目
文摘
[目的]由于CaMV 35S启动子转化菊花存在外源基因表达量低、基因沉默等问题,本研究对35S启动子、2×35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达进行了分析,以期为高效菊花转化提供理论指导。[方法]通过设计引物,利用PCR从p CAMBIA1301 Vector中克隆了35S启动子、2×35S启动子的序列并插入pORE R2载体中,分别获得了重组载体p ORE R2-35S:GUS和p ORE R2-2×35S:GUS,通过农杆菌介导法将构建的遗传转化载体分别导入切花菊品种‘神马’中。[结果]试验共转化2 296个菊花叶盘,经过筛选共得到16个过量表达的转基因株系。经PCR验证,目标片段已经成功插入转基因株系基因组。荧光定量PCR分析和染色分析显示,在转基因菊花中2×35S比35S启动子表现出驱动GUS基因高量表达的特性。[结论]在选择合适菊花品种的基础上,2×35S比35S启动子可以更加高效地促进基因表达。
关键词
菊花
转基因
35S启动子
GUS表达
Keywords
chrysanthemum
transgenic
35S promoter
GUS expression
分类号
S682.11 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
菊花高效瞬时转化体系建立及稳定遗传植株再生
被引量：
4
2
作者
邓叶
阳淑金
杜新平
董彬
任丽萍
房伟民
陈发棣
蒋甲福
机构
南京农业大学园艺学院
出处
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期48-53,共6页
基金
江苏省"双创计划"人才资助项目
文摘
[目的]本试验的目的是通过瞬时转化解决菊花转基因中存在的两大难题:转化效率低和表达水平低。[方法]通过农杆菌注射渗透法将含有GUS基因(编码β-葡糖苷酸酶)的表达载体pORE R1-2×35S∷GUS转入菊花‘优香’叶片中,进行瞬时表达,并组织培养转化后的叶片,利用GUS化学染色法和RT-PCR进行转化植株鉴定。[结果]菊花‘优香’瞬时表达的转化效率高达76.7%,外源基因(GUS)的表达水平也较理想,尤以第4和第5片完全展开叶(从形态学上端向形态学下端数)表现最佳。经过3~4个月的组织培养和抗性筛选,瞬时转化的‘优香’叶片再生出稳定遗传的转基因株系,转化效率达38.9%。[结论]本试验提供的菊花瞬时表达的方法高效、简单,并能实现稳定遗传。
关键词
菊花
农杆菌侵染
瞬时表达
GUS
再生
Keywords
chrysanthemum
Agrobacterium infiltration
transient expression
GUS
plant regeneration
分类号
S682.1 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CaMV 35S启动子在菊花中驱动GUS外源基因的表达分析
阳淑金
宋爱萍
何深颖
朱晓晨
孙静
高姣姣
王银杰
陈发棣
蒋甲福
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
在线阅读
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职称材料
2
菊花高效瞬时转化体系建立及稳定遗传植株再生
邓叶
阳淑金
杜新平
董彬
任丽萍
房伟民
陈发棣
蒋甲福
《南京农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
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