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梅花鹿鹿茸总蛋白对庆大霉素诱导肾毒性的保护作用及其机制 被引量:5
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作者 孙航 阮豪南 +1 位作者 王露露 张晶 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期636-643,共8页
目的研究梅花鹿鹿茸总蛋白(SVPr)对庆大霉素(GM)诱导的肾损伤的保护作用及其机制。方法(1)体外培养HEK293细胞分为正常对照组(给予等量PBS)、GM模型组(GM 3 g·L^(-1)孵育24 h)和GM+SVPr组(给予SVPr 1,2和4 g·L^(-1)孵育24 h后... 目的研究梅花鹿鹿茸总蛋白(SVPr)对庆大霉素(GM)诱导的肾损伤的保护作用及其机制。方法(1)体外培养HEK293细胞分为正常对照组(给予等量PBS)、GM模型组(GM 3 g·L^(-1)孵育24 h)和GM+SVPr组(给予SVPr 1,2和4 g·L^(-1)孵育24 h后,分别加入GM 3 g·L^(-1)共同孵育24 h)。以MTT法测定GM对HEK293细胞存活率的影响;以生化试剂盒方法分别测定HEK293细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、细胞裂解液中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。(2)将42只ICR小鼠随机分为正常对照组(ig蒸馏水10 d,第3~10天ip给予生理盐水)、GM模型组(ig蒸馏水10 d,第3~10天ip给予GM 100 mg·kg^(-1))、阳性对照组(ig给予芥子酸20 mg·kg^(-1)10 d,第3~10天给药前6 h ip给予GM100 mg·kg^(-1))和SVPr组(分别ig给予SVPr 50,100和200 mg·kg^(-1)10 d,第3~10天给药前6 h ip给予GM100 mg·kg^(-1))。实验结束后记录小鼠体质量和肾质量,计算肾指数;以生化试剂盒方法分别检测小鼠血清中血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的水平,肾组织中过氧化氢酶(CAT)和SOD活性、MDA和GSH含量;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;HE染色观察肾组织病理变化。结果体外细胞实验结果表明,SVPr 1,2和4 g·L^(-1)预处理可缓解GM 3 g·L^(-1)诱导的HEK293细胞存活率的降低(P<0.01);缓解GM诱导的HEK293细胞GSH和SOD的降低,及MDA和LDH水平的升高(P<0.01)。小鼠实验结果表明,SVPr 50,100和200 mg·kg^(-1)和阳性药芥子酸20 mg·kg^(-1)均显著抑制GM 100 mg·kg^(-1)诱导的小鼠肾指数、BUN、Cr、MDA、TNF-α和IL-6水平的升高(P<0.05,P<0.01),以及SOD,CAT和GSH水平的降低(P<0.05,P<0.01),并改善肾组织病理变化。结论 SVPr可有效减轻GM诱导的小鼠肾损伤,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。 展开更多
关键词 梅花鹿鹿茸总蛋白 庆大霉素 氧化应激 炎症反应 肾损伤
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鹿茸中多种水溶性成分的综合提取工艺的研究 被引量:3
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作者 阮豪南 罗佳承 +2 位作者 王圳伊 王露露 张晶 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第3期93-97,共5页
为了建立鹿茸中3个水溶性成分的综合提取工艺,获得高纯度的鹿茸蛋白、鹿茸多糖及鹿茸胶原蛋白,以充分利用鹿茸资源,扩展鹿茸的应用范围。依次采用低浓度乙醇回流法、煎煮法和复合酶解法,自鹿茸中提取鹿茸蛋白、多糖及胶原蛋白,其中对蛋... 为了建立鹿茸中3个水溶性成分的综合提取工艺,获得高纯度的鹿茸蛋白、鹿茸多糖及鹿茸胶原蛋白,以充分利用鹿茸资源,扩展鹿茸的应用范围。依次采用低浓度乙醇回流法、煎煮法和复合酶解法,自鹿茸中提取鹿茸蛋白、多糖及胶原蛋白,其中对蛋白提取溶剂浓度、提取时间和料液比进行了单因素优化,对多糖提取方法、提取时间和料液比进行了单因素优化,以各组分提取质量为指标,计算得率和提取率;以Bradford法、苯酚-硫酸法、羟脯氨酸法分别测定蛋白、多糖和胶原蛋白的含量;明确了鹿茸中多种水溶性成分综合提取工艺参数;并以不同种类鹿茸的多种水溶性成分的综合提取进行提取工艺的验证。结果显示,鹿茸中水溶性成分的最佳综合提取工艺为:鹿茸粉经乙醚及95%乙醇脱之后,以35%乙醇为溶剂,回流提取2 h,获得鹿茸蛋白;残渣煎煮3次,1 h/次,获得鹿茸多糖;残渣加入0.5 mol/L醋酸溶液和4%胃蛋白酶于37℃下提取6 h得鹿茸胶原蛋白。采用此系统工艺提取法,花二杠茸、花鹿三岔茸、马鹿二杠茸和马鹿三岔茸中蛋白提取率分别为20.100%、18.379%、17.285%和14.130%,含量达88.250%以上;多糖提取率分别为4.760%、4.588%、4.255%和3.981%,含量达89.450%以上;胶原蛋白提取率分别为3.983%、3.728%、3.522%和2.836%,含量达88.600%以上。表明采用本提取工艺可顺序提取鹿茸中多种水溶性物质,获得高纯度的鹿茸蛋白、多糖及胶原蛋白;相同鹿源鹿茸的二杠茸水溶性成分含量高于三岔茸水溶性成分含量;花鹿茸水溶性成分含量高于马鹿茸水溶性成分含量。此工艺简单,安全易行,提取率稳定,适于推广。 展开更多
关键词 鹿茸 鹿茸蛋白 鹿茸多糖 胶原蛋白 工艺优化
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