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猪流行性腹泻病毒HNxp23株的分离鉴定及其基因特性分析
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作者 饶丹 秦锋 +11 位作者 阮梦凡 葛雨 张明旭 杨喜梅 李美佳 陈文雪 于林洋 赵攀登 胡静 刘向楠 郑全芳 董建国 《中国兽医杂志》 2025年第9期79-86,共8页
为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功... 为了研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的遗传变异情况,本试验对2023年9月河南省西平县某规模化猪场疑似感染PEDV的腹泻猪进行样品采集、PCR鉴定、病毒分离、间接免疫荧光鉴定和电子显微镜观察,并对病毒重要基因进行测序分析。结果显示,成功分离得到1株PEDV毒株,命名为HNxp23。遗传进化分析结果显示,HNxp23毒株纤突蛋白基因S、膜蛋白基因M和辅助蛋白基因ORF3均与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022位于同一分支,属于GⅡa亚型。氨基酸同源性分析结果显示,HNxp23毒株S和ORF3蛋白与中国黑龙江分离毒株CH-HLJJS-2022同源性最高,分别为98.7%和99.4%;M蛋白与中国北京分离毒株LZW同源性最高,为99.3%。S蛋白氨基酸抗原表位分析结果显示,与CV777毒株相比,HNxp23毒株S蛋白在抗原表位COE区、SS2区、SS6区和2C10区分别存在19、1、1和0个氨基酸差异。结果表明,本试验分离毒株HNxp23属于PEDV的GⅡa亚型,S蛋白在COE区易发生氨基酸突变。本试验结果可为河南地区PEDV的流行特征分析以及PEDV疫苗和药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) S基因 M基因 ORF3基因
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塞内加谷病毒2C蛋白对细胞因子调控的研究
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作者 董建国 鲁绍芳 +7 位作者 葛雨 赵文肖 阮梦凡 于雪婷 张宁 张永恒 饶丹 赵留涛 《中国预防兽医学报》 2025年第6期632-636,共5页
为了解塞内加谷病毒(SVV)感染后其2C蛋白对宿主细胞分泌细胞因子水平的影响,本实验经PCR扩增SVV 2C基因后连接pEGFP-C1真核表达载体,构建表达2C蛋白的重组质粒pEGFP-C1-2C,将该质粒转染293T细胞后12 h、24 h和36 h收集细胞,经western b... 为了解塞内加谷病毒(SVV)感染后其2C蛋白对宿主细胞分泌细胞因子水平的影响,本实验经PCR扩增SVV 2C基因后连接pEGFP-C1真核表达载体,构建表达2C蛋白的重组质粒pEGFP-C1-2C,将该质粒转染293T细胞后12 h、24 h和36 h收集细胞,经western blot检测2C蛋白的表达水平,结果显示,重组质粒pEGFP-C1-2C转染后各时间点均大量表达2C蛋白,且其达量无明显差异。再次收集上述不同时间点细胞,采用荧光定量PCR检测细胞中的IL-1β、趋化因子CCL-2、CCL-5以及TNF-αmRNA的转录水平。结果显示:与对照组相比,2C蛋白于SVV感染后12 h显著促进IL-1βmRNA的转录水平(P<0.05),于24 h极显著促进IL-1βm RNA的转录水平(P<0.001);于各时间点均极显著促进CCL-2 mRNA的转录水平(P<0.001),于12 h极显著促进CCL-5 mRNA的转录水平(P<0.001);于12 h和36 h极显著促进TNF-α转录水平(P<0.001或P<0.01)。本研究首次系统阐明SVV 2C蛋白对宿主细胞IL-1β、CCL-2、CCL-5及TNF-α等关键细胞因子的动态调控作用,提示2C蛋白在SVV感染过程中可能通过持续诱导宿主趋化因子介导其的炎症反应,为深入研究病毒调控宿主免疫反应及药物开发奠定了基础。 展开更多
关键词 塞内加谷病毒 2C蛋白 细胞因子
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