牛多杀性巴氏杆菌OmpA抗原间接ELISA方法的建立

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作者 王润清 孙航 +4 位作者 孙雨 李歌 李琦 侯晓林 阚威 《中国动物检疫》 2025年第2期87-94,共8页

为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化... 为建立一种快速检测牛多杀性巴氏杆菌的方法,分析多杀性巴氏杆菌OmpA序列信号肽与跨膜疏水区序列,对选择的目的基因片段进行稀有密码子优化,将化学合成后的核苷酸序列连接至pET32a载体上,构建相应的重组质粒pET32a-OmpA;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞株中,经扩大培养成功诱导表达出了纯度较高的包涵体OmpA蛋白,将OmpA重组蛋白作为诊断抗原,经反应条件优化建立了间接ELISA抗体检测方法。经试验验证,该方法对其他相关的牛类病原无交叉反应,阳性血清稀释度为1:256时仍呈阳性,组内与组间变异系数均低于10%。结果表明,该方法特异性与敏感性较好,且具有良好的重复性与稳定性。本研究为进一步开发成熟的牛多杀性巴氏杆菌抗体检测试剂盒奠定基础。 展开更多

关键词 牛多杀性巴氏杆菌 OmpA蛋白 原核表达 蛋白纯化 ELISA

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中草药对奶牛隐性乳房炎的体外抑菌试验 被引量：8

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作者 胡少辉 阚威 +6 位作者 周长卿 马呈瑞 张连梅 徐燕霞 曹会萍 赵兴绪 张勇 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期17-22,27,共7页

为了寻求对奶牛隐性乳房炎有良好疗效的中草药,选取具有抗菌消炎作用的13种中草药,运用水煎法提取其有效成分;从兰州周边6个奶牛场采集奶样,从中分离得到4种引起乳房炎的主要致病菌;利用提取的中草药有效成分对这4种致病菌做体外抑菌试... 为了寻求对奶牛隐性乳房炎有良好疗效的中草药,选取具有抗菌消炎作用的13种中草药,运用水煎法提取其有效成分;从兰州周边6个奶牛场采集奶样,从中分离得到4种引起乳房炎的主要致病菌;利用提取的中草药有效成分对这4种致病菌做体外抑菌试验,运用试管稀释法测定中药单味药和复方的最小抑菌浓度.结果表明:黄连、大黄、蒲公英、鱼腥草4味中药对引起奶牛隐性乳房炎的4种病原菌的抑菌效果良好;板兰根、金银花、连翘、黄柏、大青叶、紫花地丁具一定抑菌效果,而王不留行、黄芪、天花粉抑菌效果较差.同时还发现,复方中同时含有黄连、大黄、蒲公英、鱼腥草4种药物的复方抑菌效果较好. 展开更多

关键词 奶牛 中草药 隐性乳房炎 病原菌 抑菌试验

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不同培养条件对绵羊卵母细胞体外成熟的影响 被引量：2

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作者 徐燕霞 曹会萍 +7 位作者 马呈瑞 阚威 李展 张小宇 胡少辉 张连梅 常卫华 张勇 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期35-40,共6页

通过使用不同的卵母细胞采集方法、不同的培养液、培养时间和细胞因子对绵羊卵母细胞的体外成熟培养的影响进行了研究.结果表明：切卵法和抽吸法对卵母细胞成熟的影响前者优于后者,差异极显著（P〈0.01）；培养液中添加FSH、LH 及FBS对... 通过使用不同的卵母细胞采集方法、不同的培养液、培养时间和细胞因子对绵羊卵母细胞的体外成熟培养的影响进行了研究.结果表明：切卵法和抽吸法对卵母细胞成熟的影响前者优于后者,差异极显著（P〈0.01）；培养液中添加FSH、LH 及FBS对绵羊卵母细胞的影响显著高于添加发情羊血清的且差异极显著（P〈0.01）；绵羊的卵母细胞培养20 h的成熟率极显著低于培养22 h和24 h的成熟率（P〈0.01）,培养22 h和24 h的成熟率差异不显著（P〉0.05）,培养24 h和培养26 h的成熟率差异极显著（P〈0.01）,培养26 h卵母细胞老化对随后的体外受精不利；成熟液（培养液＋FBS、LH、FSH、E2）中分别加入骨形态发生蛋白15（bone morphogenetie protein,BMP15）和成纤维细胞生长因子8 b（fibroblast growth factor 8b,FGF8b）2种细胞因子,成熟液中添加 BMP15组与添加FGF8b组卵母细胞的成熟率差异极显著（P〈0.01）,成熟液中添加 BMP15和对照组卵母细胞成熟率的差异极显著（P〈0.01）,加入 FGF8b组与对照组卵母细胞成熟率差异不显著（P〉0.05）.利用切卵法在培养液中加入 FSH、LHE2和细胞因子BMP15,培养22~24 h可以大大提高绵羊卵母细胞体外培养的成熟率. 展开更多

关键词 绵羊 卵母细胞 体外成熟 BMP15

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牛源荚膜血清型A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其种特异性基因的序列分析 被引量：5

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作者 阚威 王谢忠 +6 位作者 李兆才 蔡金山 王文勇 马艳萍 韩蓉 周继章 王云平 《中兽医医药杂志》 2019年第4期18-22,共5页

从病死牛组织中分离到4株致病菌,编号分别为P1、P2、P3、P4。经菌落形态学观察、培养特性、生化反应和小鼠毒力试验,初步鉴定为多杀性巴氏杆菌。参考多杀性巴氏杆菌16S rRNA和种特异性kmt1基因以及荚膜血清型基因A(capA)、B(capB)、D(ca... 从病死牛组织中分离到4株致病菌,编号分别为P1、P2、P3、P4。经菌落形态学观察、培养特性、生化反应和小鼠毒力试验,初步鉴定为多杀性巴氏杆菌。参考多杀性巴氏杆菌16S rRNA和种特异性kmt1基因以及荚膜血清型基因A(capA)、B(capB)、D(capD)、E(capE)和F(capF)合成引物,利用多重PCR扩增16S rRNA、kmt1和荚膜血清型基因,对PCR产物测序并进行同源性分析。结果显示,P1~P4都扩增出了16S rRNA、kmt1和荚膜血清型A型基因的特异性目的条带;P1~P4的16S rRNA、kmt1、A型基因序列与Genbank数据库中的多杀性巴氏杆菌相应序列具有高度同源性(>99.0%);P2、P3、P4间的16S rRNA基因同源性较高(>99.0%),而P1与其它3株(P2~P4)同源性较低,P1~P4间的kmt1基因、荚膜血清型A型的同源性较高(>99.0%)。说明本次分的4株病原菌P1~P4均为荚膜血清型A型多杀性巴氏杆菌。 展开更多

关键词 牛 多杀性巴氏杆菌 16S RRNA kmt1 荚膜 A型 多重PCR

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双峰驼黄体细胞的分离与培养 被引量：1

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作者 张小宇 胡俊杰 +6 位作者 张勇 马友记 张晶 阚威 李展 贺钰烜 赵兴绪 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1-4,共4页

为了探索双峰驼黄体细胞的percoll液分离及体外培养方法,观察黄体细胞的生物学特性,采用胶原酶消化法从双峰驼黄体组织中分离并获得妊娠期双峰驼黄体细胞,通过形态学观察确定了大小黄体细胞的生长特性.结果表明:胶原酶消化可获得数量较... 为了探索双峰驼黄体细胞的percoll液分离及体外培养方法,观察黄体细胞的生物学特性,采用胶原酶消化法从双峰驼黄体组织中分离并获得妊娠期双峰驼黄体细胞,通过形态学观察确定了大小黄体细胞的生长特性.结果表明:胶原酶消化可获得数量较多,生长状态良好的双峰驼黄体细胞,而小黄体细胞的数量远远多于大黄体细胞,其形态学和生物学特性具有典型类固醇分泌细胞的特征.试验建立的体外双峰驼黄体细胞原代培养的方法,所获细胞生物学特征稳定,纯度较高,适用于体外试验研究. 展开更多

关键词 双峰驼 原代培养 黄体细胞 形态学

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风场风谱模型的分形维数研究 被引量：10

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作者 李倩倩 李春 +1 位作者 杨阳 阚威 《能源工程》 2016年第2期28-31,37,共5页

为定量地描述湍流风场,降低湍流风谱模型选用时的盲目性,采用基于分形学的计盒维数法和Hausdorff维数法计算并分析风场风速时间序列数据的分形维数。选用Kaimal、SMOOTH和NWTCUP等湍流风谱模型,在不同风速和不同湍流强度的条件下进行风... 为定量地描述湍流风场,降低湍流风谱模型选用时的盲目性,采用基于分形学的计盒维数法和Hausdorff维数法计算并分析风场风速时间序列数据的分形维数。选用Kaimal、SMOOTH和NWTCUP等湍流风谱模型,在不同风速和不同湍流强度的条件下进行风场仿真,得出不同波动程度的风速。利用MATLAB求解出每组数据的分形维数,并与某一风场的实测风速数据的分形维数进行对比,得出NWTCUP模型的分形维数与实测数据的分形维数最为接近。初步研究结果表明,分形维数可以作为选择湍流风谱模型的一个重要定量参数。 展开更多

关键词 分形学 湍流风谱 风场 分形维数

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牦牛衣原体灭活疫苗(GN6株)的保存期试验研究 被引量：1

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作者 张志平 杨继元 +8 位作者 蔡金山 晁易林 阚威 胡广卫 沈艳丽 赵全邦 李静 李兆才 周继章 《青海畜牧兽医杂志》 2017年第3期5-7,共3页

将20150710批牦牛衣原体病灭活疫苗(GN6株)置4℃冰箱分别保存12个月,20140720苗置4℃冰箱保存24个月,2批苗其外观没有发生改变;免疫后30d时,20150710批苗免疫的个体,产生免疫抗体的滴度虽然不高,但群体免疫抗体阳性可达72.2%,保存24个月... 将20150710批牦牛衣原体病灭活疫苗(GN6株)置4℃冰箱分别保存12个月,20140720苗置4℃冰箱保存24个月,2批苗其外观没有发生改变;免疫后30d时,20150710批苗免疫的个体,产生免疫抗体的滴度虽然不高,但群体免疫抗体阳性可达72.2%,保存24个月的20140720批苗免疫的牦牛,只有少数个体可以产生较高滴度的抗体,绝大多数个体产生抗体滴度低,群体免疫抗体阳性率只达6.54%。由此结果说明:将牦牛衣原体病灭活疫苗(GN6株),置4℃冰箱保存的保存期定为12个月比较切实可行。 展开更多

关键词 牦牛衣原体 灭活疫苗 保存期

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2022年青海省动物疫病预防控制中心兽医实验室检测能力比对结果分析 被引量：1

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作者 游潇倩 魏梦君 +3 位作者 张晓英 曾占豪 阚威 孙生祯 《青海畜牧兽医杂志》 2022年第5期68-70,67,共4页

本次比对项目包括猪流行性腹泻病原检测(PCR法)、非洲猪瘟病原检测(q-PCR法)、塞内卡病毒病病原检测(q-PCR法)、小反刍兽疫病原检测(q-PCR法)、猪瘟抗体检测(ELISA法)、口蹄疫抗体检测(液相阻断法)、布鲁氏菌病抗体检测(虎红凝集法)等7... 本次比对项目包括猪流行性腹泻病原检测(PCR法)、非洲猪瘟病原检测(q-PCR法)、塞内卡病毒病病原检测(q-PCR法)、小反刍兽疫病原检测(q-PCR法)、猪瘟抗体检测(ELISA法)、口蹄疫抗体检测(液相阻断法)、布鲁氏菌病抗体检测(虎红凝集法)等7个项目5种方法。根据比对结果,排除异类,比对项目检测结果准确率为100%。 展开更多

关键词 检测能力 比对 兽医实验室

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核桃叶等中药单味制剂和复合制剂驱杀青海血蜱的试验研究

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作者 张志平 王晓润 +6 位作者 贺永祥 陶玉莲 沈艳丽 赵全邦 胡广卫 阚威 蔡金山 《中兽医医药杂志》 2020年第3期5-7,共3页

考察核桃叶、蒲公英、紫花地丁、对叶百部4种中药单味制剂和复合制剂对青海血蜱的驱杀效果。在36 h内进行实验室活性青海血蜱和田间羊体青海血蜱驱杀试验研究。实验室活性青海血蜱驱杀试验结果显示,中药复合制剂杀灭青海血蜱效果优于4... 考察核桃叶、蒲公英、紫花地丁、对叶百部4种中药单味制剂和复合制剂对青海血蜱的驱杀效果。在36 h内进行实验室活性青海血蜱和田间羊体青海血蜱驱杀试验研究。实验室活性青海血蜱驱杀试验结果显示,中药复合制剂杀灭青海血蜱效果优于4种单味制剂;中药复合制剂杀死青海血蜱89只,青海血蜱死亡率为89.00%;田间羊体青海血蜱驱杀试验结果显示,中药复合制剂杀灭青海血蜱效果优于4种单味制剂,中药复合制剂杀死青海血蜱115只,青海血蜱死亡率为91.26%。结果表明,核桃叶等中药复合制剂对青海血蜱驱杀效果显著。 展开更多

关键词 中药 蜱 驱杀青海血蜱实验

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风突变效应对风力机振动特性影响研究 被引量：10

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作者 丁勤卫 李春 +1 位作者 叶舟 阚威 《振动与冲击》 EI CSCD 北大核心 2016年第21期47-52,共6页

风是影响风力机气动特性和结构特性的最直接的因素,风速突变将诱发风力机更强的气动载荷。为分析风力机在高突变湍流风作用下结构动力学振动特性,以NREL实测数据为湍流风数据源,并添加拟序结构刻画风速突变,以NREL Wind PACT 1.5 MW桩... 风是影响风力机气动特性和结构特性的最直接的因素,风速突变将诱发风力机更强的气动载荷。为分析风力机在高突变湍流风作用下结构动力学振动特性,以NREL实测数据为湍流风数据源,并添加拟序结构刻画风速突变,以NREL Wind PACT 1.5 MW桩柱式风力机为样机,分别研究了风力机叶片和塔架的动力学响应。结果表明:添加拟序结构前后,轮毂点处风速分形维数均在1.5左右;拟序结构的添加使得基础湍流风具有更大的风突变以及更高的湍流强度;切出风速工况,风力机叶尖位移同时为挥舞和摆振;拟序结构的添加使得叶片和塔架振动加速度成倍增加。 展开更多

关键词 风力机 拟序结构 位移 振动 加速度

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基于Hurst指数的风速时间序列研究 被引量：7

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作者 袁全勇 杨阳 +2 位作者 李春 阚威 叶柯华 《应用数学和力学》 CSCD 北大核心 2018年第7期798-810,共13页

为研究风速时间序列的长程相关性和自相似性,采用重标度极差分析和去趋势波动分析对风速时间序列进行相关性分析,计算风速时间序列的Hurst指数,并对其进行了功率谱密度分析,计算其谱指数.结果表明,两种方法计算所得Hurst指数都较为接近1... 为研究风速时间序列的长程相关性和自相似性,采用重标度极差分析和去趋势波动分析对风速时间序列进行相关性分析,计算风速时间序列的Hurst指数,并对其进行了功率谱密度分析,计算其谱指数.结果表明,两种方法计算所得Hurst指数都较为接近1,说明风速时间序列具有显著的自相似性和长程正相关性;但R/S分析及DFA所得Hurst指数有所差异,这一差异说明DFA可体现出非平稳风速时间序列的幂率特征.此外,对风速时间序列Hurst指数及谱指数的分析还表明了风速波动具有"1/f噪声"特征.为风速分形混沌特性研究及风速短时预测等提供了理论依据. 展开更多

关键词 风速时间序列 去趋势波动分析 重标度极差 HURST指数 谱分析

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青海省一起羊布鲁氏菌病疫情紧急流行病学调查 被引量：8

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作者 张燕 沈朝建 +6 位作者 蔡金山 王云平 林元清 阚威 胡辉忠 奎军 吕彩虹 《中国动物检疫》 CAS 2020年第12期14-17,共4页

2020年3月13日,青海省一养羊户发生一起人畜布鲁氏菌病疫情。为掌握疫病发生原因,调查疫病可能来源,评估可能传播风险,青海省动物疫病预防控制中心会同相关人员组成工作组,赶赴养殖现场,通过座谈、实地查看、实验室检测等方式开展了紧... 2020年3月13日,青海省一养羊户发生一起人畜布鲁氏菌病疫情。为掌握疫病发生原因,调查疫病可能来源,评估可能传播风险,青海省动物疫病预防控制中心会同相关人员组成工作组,赶赴养殖现场,通过座谈、实地查看、实验室检测等方式开展了紧急流行病学调查。调查认为,养羊户引进感染羊,且引进后未隔离观察就直接混群放牧可能是导致本次疫情暴发的原因。由此,建议加大排查监测力度,及时发现并处理阳性畜;加强宣传,积极开展布鲁氏菌病防控知识培训,提升牧民规范饲养和主动防范布鲁氏菌病的意识。 展开更多

关键词 布鲁氏菌病 紧急流行病学调查 羊

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青海省2017—2019年州县级兽医系统实验室检测能力比对 被引量：2

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作者 拉华 王谢忠 +8 位作者 游潇倩 张茂华 阚威 孙生帧 马艳萍 刘蓉菁 魏梦君 张晓英 赵全邦 《中国动物检疫》 CAS 2021年第2期58-62,共5页

为全面了解和提升兽医系统实验室检测能力,2017—2019年青海省动物疫病预防控制中心连续3年组织州县级兽医实验室开展检测能力比对工作。根据每年疫病的流行态势,设置PCR、ELISA以及传统类检测等比对项目。结果显示:2017—2019年实验室... 为全面了解和提升兽医系统实验室检测能力,2017—2019年青海省动物疫病预防控制中心连续3年组织州县级兽医实验室开展检测能力比对工作。根据每年疫病的流行态势,设置PCR、ELISA以及传统类检测等比对项目。结果显示:2017—2019年实验室总体准确率分别为50.00%、56.82%、74.47%,样品总正确率分别为90.75%、93.56%、93.48%,整体呈上升趋势;各实验室PCR、ELISA、传统类检测项目的正确率差异不显著(P>0.05);州级实验室的检测正确率明显好于县级(P<0.05)。结果表明,州县级实验室检测能力逐年提升,绝大多数实验室具备PCR、ELASA、传统类检测等检测能力,但部分县级实验室的个别项目检测能力有待提高。建议进一步加大经费投入,加强基层实验室管理、业务培训等,整体提升县级实验室的检测能力。 展开更多

关键词 兽医系统实验室 检测能力 比对 青海省

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甘肃部分地区动物源肠球菌的分离鉴定及耐药性研究 被引量：1

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作者 白亚彤 阚威 +1 位作者 刘沛 杨孝朴 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第6期25-32,共8页

【目的】研究甘肃省部分地区动物源肠球菌的耐药情况。【方法】采集300份猪、牛和羊粪便样品,利用培养基和PCR方法进行肠球菌的分离鉴定,药敏纸片法检测肠球菌对12种抗生素的耐药性,微量肉汤稀释法检测万古霉素最小抑菌浓度,PCR检测万... 【目的】研究甘肃省部分地区动物源肠球菌的耐药情况。【方法】采集300份猪、牛和羊粪便样品,利用培养基和PCR方法进行肠球菌的分离鉴定,药敏纸片法检测肠球菌对12种抗生素的耐药性,微量肉汤稀释法检测万古霉素最小抑菌浓度,PCR检测万古霉素耐药基因。【结果】共分离肠球菌246株,肠球菌耐药率最高的3种抗生素为苯唑西林、复方新诺明和克林霉素,多重耐药菌占82.11%;不同动物源肠球菌的耐药性差异显著(P<0.05),猪源肠球菌中多重耐药菌占比最高,为94.4%;不同肠球菌的耐药性差异显著(P<0.05),多重耐药性屎肠球菌占比100%;肠球菌对万古霉素耐药率为24.39%,携带的万古霉素耐药基因为van C1和/或van C2/3。【结论】甘肃部分地区动物源肠球菌的耐药率高,多重耐药现象严重,且存在万古霉素耐药性转移的风险。 展开更多

关键词 肠球菌 家畜:耐药性 万古霉素 耐药基因

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羊流产衣原体病的治疗试验

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作者 解安敏 王文勇 +4 位作者 祁贤贵 范文凯 蔡金山 阚威 周继章 《青海畜牧兽医杂志》 2023年第6期20-23,共4页

将衣原体抗体和抗原检测均为阳性的36只绵羊分为A、B、C 3组,每组12只,开展药物治疗试验研究,A、B组分别用盐酸四环素和泰妙菌素治疗,C组为对照组,不做任何治疗。用药16 d后,用实时荧光定量PCR检测3组绵羊的阴道拭子和眼拭子样品,结果显... 将衣原体抗体和抗原检测均为阳性的36只绵羊分为A、B、C 3组,每组12只,开展药物治疗试验研究,A、B组分别用盐酸四环素和泰妙菌素治疗,C组为对照组,不做任何治疗。用药16 d后,用实时荧光定量PCR检测3组绵羊的阴道拭子和眼拭子样品,结果显示:A、B组试验羊衣原体均转为阴性,C组仍为阳性,表明用上述药物治疗衣原体有效。 展开更多

关键词 绵羊 衣原体 药物治疗

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2022年青海省部分牧区羊只棘豆中毒情况调查及分析

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作者 马利青 阚威 +10 位作者 黄金云 张立成 王小红 切环 王贵元 李长云 李秀萍 简莹娜 胡勇 王戈平 王光华 《青海畜牧兽医杂志》 2023年第4期55-58,共4页

2022年8月,青海省部分牧区陆续出现羊只死亡病例。根据对患羊临床症状的了解,并经剖解检查、当地有毒杂草调研以及实验室相关毒素检测,判断羊只死亡是由棘豆中毒而引起的。

关键词 羊 有毒杂草 毒素检测 棘豆中毒

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公路桥梁中钻孔灌注桩的施工质量控制措施 被引量：1

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作者 阚威 《新材料·新装饰》 2022年第9期118-120,共3页

文章阐述了钻孔灌注桩施工的原理,说明了公路桥梁中钻孔灌注桩施工的优势,分析了公路桥梁钻孔灌注桩施工的要点,提出了公路桥梁施工中钻孔灌注桩施工的质量控制措施。

关键词 公路桥梁 钻孔灌注桩 质量控制

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