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EMA-qPCR检测空肠弯曲活菌方法研究 被引量:1
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作者 闻子钰 顾一心 +5 位作者 梁昊 王佳奇 鞠长燕 马艳萍 张茂俊 段永翔 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期821-825,共5页
目的建立一种快速定量检测食品中“活的”空肠弯曲菌的技术方案。方法通过对103 CFU/m^10^6CFU/mL的空肠弯曲菌进行叠氮溴化乙锭(EMA)的前处理研究,建立区分死菌与活菌的EMA前处理技术,与荧光定量PCR检测弯曲菌的方法相结合,建立EMA-qPC... 目的建立一种快速定量检测食品中“活的”空肠弯曲菌的技术方案。方法通过对103 CFU/m^10^6CFU/mL的空肠弯曲菌进行叠氮溴化乙锭(EMA)的前处理研究,建立区分死菌与活菌的EMA前处理技术,与荧光定量PCR检测弯曲菌的方法相结合,建立EMA-qPCR组合检测技术,并进行模拟食品标本的验证。结果空肠弯曲菌在103 CFU/mL^10^6CFU/mL内,EMA的最优使用浓度为5μg/mL,5μg/mL的EMA-qPCR可区分出死/活空肠弯曲菌混合物中的死菌和活菌,并成功应用于模拟食品标本中“活的”空肠弯曲菌的检测。结论EMA-qPCR可作为快速定量检测样本中“活的”空肠弯曲菌的方法。 展开更多
关键词 叠氮溴化乙锭(EMA) 荧光定量PCR(qPCR) 活菌 空肠弯曲菌
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ACE2在不同物种间的同源性分析及其对2019-nCoV宿主范围的启示
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作者 李彦君 陈娇珊 +2 位作者 赵锦 闻子钰 孙彩军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期525-529,共5页
目的分析不同物种间ACE2的同源性,并探讨2019-nCoV利用其作为受体在人与动物间跨物种传播的可能性。方法从NCBI网站中下载不同物种ACE2的氨基酸序列,使用MEGA 7软件和在线程序BLAST和iTOL进行分析。结果ACE2全长氨基酸序列(1-805)在哺... 目的分析不同物种间ACE2的同源性,并探讨2019-nCoV利用其作为受体在人与动物间跨物种传播的可能性。方法从NCBI网站中下载不同物种ACE2的氨基酸序列,使用MEGA 7软件和在线程序BLAST和iTOL进行分析。结果ACE2全长氨基酸序列(1-805)在哺乳动物中(尤其是非人灵长类动物)同源性较高。进一步分析与2019-nCoV的S蛋白结合的ACE2肽酶结构域(ACE2-PD)序列(19-615),发现反刍动物(牛、羊)和猫与人类ACE2-PD的识别率进一步提高,而蝙蝠略有下降。ACE2蛋白上与S蛋白直接相互作用的20个关键氨基酸(接口氨基酸)序列比对发现,猕猴与人类的接口氨基酸序列完全相同,反刍动物(牛、羊)和猫的接口氨基酸与人类相似。结论灵长类动物可作为良好的动物感染模型,反刍动物(牛、羊)和猫也有可能是2019-nCoV的潜在感染动物。因此,应积极推进动物间2019-nCoV的病原学和血清学检测。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶2(ACE2) 2019-nCoV 同源性分析 系统发育分析 跨物种传播
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