表观遗传学修饰对BDNF基因表达的影响 被引量：2

1

作者 钟小林 李昌琪 +1 位作者 李芳 张建一 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期191-195,共5页

脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）是继神经生长因子（NGF）之后发现的又一重要的神经营养因子。它能够维持神经元在中枢及周围神经系统正常的生理功能,对神经元的存活、分化、生长发育起重要作用,并能促... 脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）是继神经生长因子（NGF）之后发现的又一重要的神经营养因子。它能够维持神经元在中枢及周围神经系统正常的生理功能,对神经元的存活、分化、生长发育起重要作用,并能促进损伤神经元的再生等。 展开更多

关键词 脑源性神经营养因子(BDNF) 表观遗传学 DNA甲基化 组蛋白乙酰化 染色质重塑

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一种可溶性单抗ScFv片段的表达及鉴定 被引量：1

2

作者 钟小林 高会广 +1 位作者 吉清 黄刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期691-694,共4页

目的　利用E .coliHB2 15 1表达结肠癌单抗MC3的单链可变区片段 (Singlechainvariablefragment,ScFv) ,纯化并鉴定其抗原结合活性 ,为结肠癌体内诊断和治疗性研究提供靶向载体分子。方法　利用呈现ScFv抗体的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2 ... 目的　利用E .coliHB2 15 1表达结肠癌单抗MC3的单链可变区片段 (Singlechainvariablefragment,ScFv) ,纯化并鉴定其抗原结合活性 ,为结肠癌体内诊断和治疗性研究提供靶向载体分子。方法　利用呈现ScFv抗体的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2 15 1进行可溶性抗体表达 ,经点印迹和Western印迹检测可溶性单抗ScFv的表达水平 ,经ELISA检测可溶性ScFv的抗原结合活性。用双脱氧法对组成ScFvDNA的VH和VLDNA进行序列测定。结果　可溶性MC3ScFv获得了成功表达 ,表达产物主要位于周质腔中 ,其分子量约为 3 2× 10 3。来自所获得的 3个克隆周质提取物均能抑制单抗与高水平表达MC3结合抗原的AGS细胞结合 ,抑制率分别为 41.19%、3 6.89%、3 3 .77%。对ScFv的VH和VLDNA的测序结果表明所获抗体的可变区基因属IgG1亚族 ,κ型。结论　利用大肠杆菌HB2 15 1成功表达了具有抗原结合活性的MC3ScFv ,为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。 展开更多

关键词 结肠癌 单克隆抗体 单链可变区片段 噬菌体

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村民自治:走向农村和谐社会之路 被引量：5

3

作者 钟小林 饶永星 《农业考古》 北大核心 2006年第6期75-78,共4页

建设农村和谐社会是新时期党构建社会主义和谐社会的重要组成部分。而构建和谐社会必须依托一定的社会机制体制。村民自治是当代中国农村普遍存在的一种社区自治制度。经过二十多年的建设与发展,它不断走向成熟,功能不断扩展,是当代中... 建设农村和谐社会是新时期党构建社会主义和谐社会的重要组成部分。而构建和谐社会必须依托一定的社会机制体制。村民自治是当代中国农村普遍存在的一种社区自治制度。经过二十多年的建设与发展,它不断走向成熟,功能不断扩展,是当代中国农村走向和谐社会的必由之路。 展开更多

关键词 农村 村民自治 和谐社会

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NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选 被引量：1

4

作者 钟小林 秦茂林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期763-766,共4页

目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因 ,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因 ,克隆入穿梭载体pExchange 1neo ,酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株 ,G418长期筛选 ,RT PC... 目的　从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因 ,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU3 5细胞株。方法　RT PCR扩增目的基因 ,克隆入穿梭载体pExchange 1neo ,酶切及测序鉴定。重组载体转染MESPU3 5胚胎干细胞株 ,G418长期筛选 ,RT PCR检测转染细胞NT3水平。结果　RT PCR得到长度为 777bp的基因片段 ,克隆后酶切鉴定正确 ,测序结果经BLAST对比 ,与GenBank中小鼠NT 3序列完全一致。成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株。结论　从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因 ,所获得的NT3稳定表达MESPU3 5 展开更多

关键词 NT3 克隆 胚胎干细胞 小鼠

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浅析指数基金的指数化投资方法 被引量：4

5

作者 钟小林 《证券市场导报》 北大核心 2003年第2期18-22,共5页

按其选取投资组合方式的不同,指数基金指数化投资的方法大致可划分为三种:完全复制法、优化选样法和分层抽样法。

关键词 完全复制法 优化选样法 分层抽样法 指数基金 指数化投资方法

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品种创新是我国指数基金发展的必然要求

6

作者 钟小林 《企业经济》 北大核心 2003年第3期176-177,共2页

关键词 品种创新 指数基金 发展 基金品种 创新 证券市场

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芥菜转基因再生体系的建立 被引量：4

7

作者 杨朝辉 雷建军 +5 位作者 曹必好 钟小林 李蓉芬 江渝 彭家和 何凤田 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期496-501,共6页

以叶用和茎用芥菜的子叶、叶片及下胚轴为外植体 ,通过筛选 12种含不同种类和浓度激素的培养基 ,综合分析与确定影响芥菜转基因再生体系各因素的最佳值 ,以及对再生抗性苗的PCR、Southern、Northern及抗虫鉴定 ,筛选到了能稳定表达外源... 以叶用和茎用芥菜的子叶、叶片及下胚轴为外植体 ,通过筛选 12种含不同种类和浓度激素的培养基 ,综合分析与确定影响芥菜转基因再生体系各因素的最佳值 ,以及对再生抗性苗的PCR、Southern、Northern及抗虫鉴定 ,筛选到了能稳定表达外源基因的转基因植株 。 展开更多

关键词 芥菜 转基因再生体系 外植体 培养基 抗虫育种 CPTI基因 农杆菌介导

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新改良PCR／LDR／毛细管电泳技术产前诊断胎儿β-地中海贫血的可行性研究 被引量：5

8

作者 廖茜 易萍 +6 位作者 郑英如 俞丽丽 钟小林 黄寅虎 韩磊 朱玉娟 李力 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期197-201,共5页

目的研究采用新改良聚合酶链反应(PCR)/连接酶检测反应(LDR)/毛细管电泳技术产前诊断胎儿β-地中海贫血的可行性。方法使用不同浓度梯度的正常DNA与微量β-地中海贫血突变杂合子DNA混合后进行PCR扩增,扩增产物进行LDR反应后通过毛细管... 目的研究采用新改良聚合酶链反应(PCR)/连接酶检测反应(LDR)/毛细管电泳技术产前诊断胎儿β-地中海贫血的可行性。方法使用不同浓度梯度的正常DNA与微量β-地中海贫血突变杂合子DNA混合后进行PCR扩增,扩增产物进行LDR反应后通过毛细管电泳技术检测其连接产物。采用CEQ8000型遗传分析仪分析LDR产物,并观察其灵敏度。结果将含有相同浓度CD17(A→T)突变的扩增产物作为LDR模板,采用8U DNA连接酶进行连接反应,检测灵敏度可达1:5000,产物峰的面积随着正常人外周血DNA浓度的增加而减少,至1:10 000处不能与杂峰区分,且无CD17(A→T)突变扩增产物的阴性对照未检测到LDR产物。正常孕妇血浆DNA中加入20pg CD17(A→T)突变杂合子外周血DNA扩增产物,LDR产物峰可明显与杂峰区分。结论新改良PCR/LDR/毛细管电泳技术有望通过孕妇血浆DNA检测进行β-地中海贫血的产前诊断。 展开更多

关键词 Β地中海贫血 产前诊断 电泳 毛细管

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人HMGB1 B Box的表达及其生物活性 被引量：3

9

作者 张艳 何凤田 +7 位作者 黎松 李蓉芬 钟小林 高会广 吉清 戴双双 陈麟凤 邢效如 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期756-761,共6页

经RTPCR从人新鲜扁桃体组织中扩增人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的Bbox(88～162残基)的cDNA,构建于载体pUC19,经测序后与GenBank中报道的已知序列完全一致,再构建于原核表达载体pQE80LDHFR中,表达并鉴定目的蛋白.经Ni2+亲和层析柱、多粘... 经RTPCR从人新鲜扁桃体组织中扩增人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的Bbox(88～162残基)的cDNA,构建于载体pUC19,经测序后与GenBank中报道的已知序列完全一致,再构建于原核表达载体pQE80LDHFR中,表达并鉴定目的蛋白.经Ni2+亲和层析柱、多粘菌素B层析柱纯化获得高纯度的DHFRHMGB1Bbox蛋白,然后将此重组HMGB1Bbox加入到人外周血单核细胞(PBMCs)中,37℃,5%CO2下,刺激PBMCs6h,用ELISA检测PBMCs释放TNFα、IL6的量,经检测后证明纯化后的重组HMGB1Bbox能显著地刺激PBMCs释放致炎因子TNFα、IL6.HMGB1Bbox的表达及其生物活性的初步研究,为进一步研究HMGB1Bbox的作用机制以及新型抗炎制剂的研发奠定基础. 展开更多

关键词 HMGB1 B BOX RT-PCR 表达 纯化 ELISA 生物活性

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大鼠场景性恐惧记忆再激活过程中海马HDAC2的表达变化 被引量：4

10

作者 张娟 黄伏连 +7 位作者 钟小林 胡招兰 王洪涛 张文娟 乔小青 黄艳青 李芳 李昌琪 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期154-160,共7页

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在场景性恐惧记忆再激活过程中的表达变化。方法:对大鼠进行不可逃避的电击刺激与中性刺激(训练环境)联结匹配训练,建立大鼠场景性恐惧条件化模型,之后采用免疫组织化学、Weste... 目的:探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在场景性恐惧记忆再激活过程中的表达变化。方法:对大鼠进行不可逃避的电击刺激与中性刺激(训练环境)联结匹配训练,建立大鼠场景性恐惧条件化模型,之后采用免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法检测实验组(恐惧记忆唤起后30 min、2 h、6 h、24 h组和不进行恐惧记忆唤起的no-recall组)和对照组(与实验组相同的处理方式但没有足底电击的刺激)大鼠海马中HDAC2的表达变化。结果:免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法检测结果均显示场景性恐惧记忆唤起后30 min与24 h,HDAC2在大鼠海马中的表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义。其它时间点及no-recall组HDAC2的表达与对照组相比,没有统计学意义。结论:场景性恐惧记忆唤起后30 min与24 h,HDAC2在大鼠海马中表达水平显著升高,此变化可能与恐惧记忆产生的相关行为(恐惧记忆的消退行为、焦虑行为等)有一定的联系。 展开更多

关键词 PTSD HDAC2 场景性恐惧记忆再激活 大鼠

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烫伤大鼠肝葡萄糖激酶、肌己糖激酶活性及红细胞三磷酸腺苷含量的变化 被引量：10

11

作者 周建新 钟小林 +2 位作者 李蓉芬 叶上宇 董燕麟 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 1994年第3期178-181,共4页

为进一步探讨损伤后糖代谢状况，我们测定了３０％体表烫伤后大鼠不同时间的血糖和血乳酸，并比较休克期（伤后６ｈ）和高代谢期（伤后７２ｈ）的肝葡萄糖激酶及比目鱼肌已糖激酶（Ⅱ型）活性。结果显示血乳酸水平在伤后６ｈ和４８ｈ各... 为进一步探讨损伤后糖代谢状况，我们测定了３０％体表烫伤后大鼠不同时间的血糖和血乳酸，并比较休克期（伤后６ｈ）和高代谢期（伤后７２ｈ）的肝葡萄糖激酶及比目鱼肌已糖激酶（Ⅱ型）活性。结果显示血乳酸水平在伤后６ｈ和４８ｈ各有一个高峰，可能分别是应激和代谢紊乱的表现。血糖水平在伤后６ｈ明显升高，但６ｈ内波动很大。伤后７２ｈ肝葡萄糖激酶活性显著降低（Ｐ＜０．０５），可能与创伤后血糖升高，糖异生增强及胰岛素抵抗等现象有关。伤后比目鱼肌已糖激酶活性及红细胞三磷酸腺苷（ＡＴＰ）含量未发现明显变化。 展开更多

关键词 灼伤 葡萄糖激酶 己糖激酶 乳酸盐

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影响细胞ELISA结果的主要因素 被引量：3

12

作者 李蓉芬 陈敏 +2 位作者 康运生 钟小林 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期871-872,共2页

关键词 ELISA 影响因素 细胞状态 细胞固定 封闭液

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hERR1对乳腺癌细胞生长活性及ER转录激活功能的影响 被引量：4

13

作者 陈健 陈敏 +6 位作者 陈彬 周长保 李渝萍 彭家和 李蓉芬 钟小林 周度金 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第17期1527-1530,共4页

目的　构建hERR1高表达的乳腺癌细胞株 ,研究hERR1对乳腺癌细胞株生长活性的影响及其机制。方法　PCR构建hERR1真核表达载体 ,转染乳腺癌细胞株 ,G418筛选稳定表达细胞株 ;MTT法研究hERR1高表达株的生长速率 ;瞬时转染结合CAT活性分析 ... 目的　构建hERR1高表达的乳腺癌细胞株 ,研究hERR1对乳腺癌细胞株生长活性的影响及其机制。方法　PCR构建hERR1真核表达载体 ,转染乳腺癌细胞株 ,G418筛选稳定表达细胞株 ;MTT法研究hERR1高表达株的生长速率 ;瞬时转染结合CAT活性分析 ,研究hERR1对ER转录功能的影响。结果　筛选了hERR1高表达乳腺癌细胞株 ;局部高表达的hERR1在体外抑制乳腺癌细胞株的生长 ;hERR1以剂量依赖方式抑制ER转录激活功能。结论　局部高表达hERR1可能通过与ER竞争结合ERE ,抑制ER的转录活化功能 。 展开更多

关键词 hERR1 乳腺癌 基因表达调控

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浅议我国证券市场交易制度的创新

14

作者 钟小林 《华南金融研究》 2002年第2期56-57,共2页

外国股市的实践证明,基于做市商制度的报价驱动交易制具有保持市场的稳定性和流动性的独特功能,而我国沪深主板市场当前的一个突出问题就是市场稳定性差、投机性强,因此,我国主板市场有必要进行交易制度的创新,即在原来的指令驱动交易... 外国股市的实践证明,基于做市商制度的报价驱动交易制具有保持市场的稳定性和流动性的独特功能,而我国沪深主板市场当前的一个突出问题就是市场稳定性差、投机性强,因此,我国主板市场有必要进行交易制度的创新,即在原来的指令驱动交易制度的基础上,适时引入做市商制度,实施混合交易制度,从而发挥两种交易制度的综合优势。 展开更多

关键词 证券市场 中国 指令驱动系统 报价驱动系统 做市商制度

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人IL-16C端cDNA的克隆表达及初步鉴定 被引量：6

15

作者 甘立霞 曹廷兵 钟小林 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期532-537,共6页

人 Ｉ Ｌ１６ 是近年报道的一个新的细胞因子，其 Ｃ 端 １３０ 个氨基酸的分泌型 Ｉ Ｌ１６ 广泛地参与了体内的免疫调节及炎症反应，并具有抑制 Ｈ Ｉ Ｖ 复制等多种功能．经从 Ｃｏｎ Ａ 刺激的人外周血单核细胞中分离总 ... 人 Ｉ Ｌ１６ 是近年报道的一个新的细胞因子，其 Ｃ 端 １３０ 个氨基酸的分泌型 Ｉ Ｌ１６ 广泛地参与了体内的免疫调节及炎症反应，并具有抑制 Ｈ Ｉ Ｖ 复制等多种功能．经从 Ｃｏｎ Ａ 刺激的人外周血单核细胞中分离总 Ｒ Ｎ Ａ，采用 Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ、分子克隆及序列测定的方法获得了 Ｉ Ｌ１６ Ｃ 端 １３０ 个氨基酸编码区的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ，并在生物 素化融合蛋白表达系统中表达和纯化了该蛋白．结果表明：所得到的中国人 Ｉ Ｌ１６ Ｃ端的编码序列与国外报道的序列完全一致；已获得的 ３３ ｋ Ｄ 融合蛋白易于纯化，这一工作为进一步研究 Ｉ Ｌ１６ 的功能奠定了基础 ． 展开更多

关键词 CDNA 克隆 表达 白细胞介素16

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炎性疼痛致大鼠海马CREB结合蛋白的表达变化 被引量：3

16

作者 李花 曹文宇 +6 位作者 徐杨 罗雁威 钟小林 张建伟 李昌琪 罗学港 戴茹萍 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2011年第5期546-549,共4页

目的探讨完全弗氏佐剂(CompleteFreund’sAdjuvant,CFA)致大鼠炎性疼痛后海马区CREB结合蛋白(CREB Binding Protein,CBP)的表达变化及意义。方法大鼠随机分为正常组和实验组,实验组大鼠左侧足底皮下注射CFA和生理盐水混合溶剂100μl,建... 目的探讨完全弗氏佐剂(CompleteFreund’sAdjuvant,CFA)致大鼠炎性疼痛后海马区CREB结合蛋白(CREB Binding Protein,CBP)的表达变化及意义。方法大鼠随机分为正常组和实验组,实验组大鼠左侧足底皮下注射CFA和生理盐水混合溶剂100μl,建立炎性疼痛模型,分为注射CFA后6 h、1 d、3 d、7 d和14 d组。采用Von Frey纤维观察不同时间点大鼠机械缩足阈值(Paw withdrawalthreshold,PWT)的变化;采用免疫组化法检测海马CBP的表达变化。结果足底注射CFA后1 h PWT即下降,并在6 h后达到最低值,3 d后逐渐上调,至14 d仍低于基础值。正常组大鼠海马各区均可见CBP大量表达。实验组大鼠两侧海马各区尤其是CA1区和齿状回(Dentate Gyrus,DG)区域CBP的表达随时间点变化呈现出先降低后升高再降低的双相表达趋势,即注射CFA后6 h、1 d,CBP表达下降,至注射CFA后3 d,CBP表达明显上调;7 d时CBP表达再次出现下调,持续至14 d。结论 CFA能诱导大鼠产生为期2周以上的炎性痛病程;炎性疼痛时海马区CBP的表达呈现出双相性表达趋势,提示海马区的基因表达变化在炎性疼痛的产生和持续过程中起着重要的作用。 展开更多

关键词 炎性疼痛 海马 CBP 基因转录 大鼠

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NF-κB参与小鼠β-防御素3基因急性时相表达的转录调节 被引量：3

17

作者 杨卫华 周建新 +1 位作者 钟小林 廖荣霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期128-130,共3页

目的　分析急性时相反应时调节小鼠 β 防御素 3基因表达的转录因子。 方法　通过腹腔注射外源性脂多糖(LPS)建立小鼠急性时相反应 ,经Northernblot方法检测mBD3mRNA在组织中的表达 ;EMSA和Southwesternblot分析细胞核蛋白中的转录因子... 目的　分析急性时相反应时调节小鼠 β 防御素 3基因表达的转录因子。 方法　通过腹腔注射外源性脂多糖(LPS)建立小鼠急性时相反应 ,经Northernblot方法检测mBD3mRNA在组织中的表达 ;EMSA和Southwesternblot分析细胞核蛋白中的转录因子。结果　内毒素注射后仅在肝脏组织中检测到mBD3mRNA ;肝脏细胞核蛋白中有与mBD3基因调节区特异DNA片段结合的转录因子 ,分子量在 ( 4 3 0～ 66 2 )× 10 3之间。结论　小鼠急性时相反应时NF κB参与 β 防御素 展开更多

关键词 NF-ΚB Β-防御素 急性时相反应 转录调节

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PCR-SSCP检测急性白血病患者N-ras基因突变及临床意义初探 被引量：2

18

作者 刘红 彭家和 +4 位作者 江渝 钟小林 曹廷兵 张立 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期629-631,共3页

目的　探讨N ras基因突变与急性白血病发生的关系。方法　采取骨髓和外周血白细胞提取DNA ,用PCR SSCP分析技术分别对急性白血病患者、正常对照组的N ras基因突变进行检测。结果　 84例急性白血病患者中 2 5例发生N ras基因突变 ,基因... 目的　探讨N ras基因突变与急性白血病发生的关系。方法　采取骨髓和外周血白细胞提取DNA ,用PCR SSCP分析技术分别对急性白血病患者、正常对照组的N ras基因突变进行检测。结果　 84例急性白血病患者中 2 5例发生N ras基因突变 ,基因变异频率为 2 9 8% ,其中急性淋巴细胞白血病为 18 6% ,急性髓细胞白血病为 41 4% ;11例随访 6个月 ,7例N ras基因突变消失 ,4例N ras基因突变持续存在 ;正常对照组未发现N ras基因突变。结论　N 展开更多

关键词 N-RAS基因 急性白血病 突变

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HEPC1和HEPC2真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达 被引量：2

19

作者 王元忠 周建新 +1 位作者 钟小林 廖荣霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期834-836,共3页

目的　构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH 3T3细胞后的表达情况。方法　从小鼠肝组织中分离总RNA ,采用RT PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA ,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后... 目的　构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH 3T3细胞后的表达情况。方法　从小鼠肝组织中分离总RNA ,采用RT PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA ,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后,用脂质体将重组子分别转染至NIH3T3细胞中,G418进行长期筛选,然后用RT PCR和dot ELISA检测HEPC1和HEPC2的表达。结果　RT PCR获得预期大小的片段,重组子pcDNA3 HEPC1和pcDNA3 HEPC2酶切正确,测序表明HEPC1有1个碱基与GenBank中报告的不同,但其位于密码子的第3位在此不改变编码的氨基酸,HEPC2则完全与GenBank中报道的一致,经RT PCR和dot ELISA检测HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH3T3细胞中均有表达。结论　成功构建了小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH 3T3细胞中获得了表达,为下一步探讨HEPC1和HEPC2的功能及作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 HEPCIDIN PCDNA3 NIH3T3细胞 转染 小鼠

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Grb2在MCF-7乳腺癌细胞中的核定位研究 被引量：1

20

作者 陈敏 陈彬 +4 位作者 李渝萍 陈健 李强 钟小林 周度金 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第20期1799-1801,共3页

目的　构建Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,并观察Grb2在MCF 7乳腺癌细胞的核定位情况。方法　用PCR方法扩增Grb2cDNA ,与红色荧光蛋白表达质粒pDsRed1 C重组构建融合蛋白表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,酶切、测序鉴定后 ,... 目的　构建Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,并观察Grb2在MCF 7乳腺癌细胞的核定位情况。方法　用PCR方法扩增Grb2cDNA ,与红色荧光蛋白表达质粒pDsRed1 C重组构建融合蛋白表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,酶切、测序鉴定后 ,瞬时转染MCF 7乳腺癌细胞株 ,用荧光显微镜观察Grb2的核定位情况。结果　pDsRed1 C/Grb2质粒有正确的阅读框 ,融合表达蛋白DsRed1 C/Grb2可定位于MCF 7乳腺癌细胞核内。结论　成功构建了Grb2的红色荧光蛋白融合表达质粒pDsRed1 C/Grb2 ,在MCF 7乳腺癌细胞株中 ,Grb2除存在于胞浆外 ,也可定位于细胞核内 ,可能与其参与核内基因的转录调控有关。 展开更多

关键词 MCF-7 乳腺癌细胞株 融合表达质粒 观察 胞浆 转染 定位研究 红色荧光蛋白 核定 转录调控

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