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液质联用法测定奶粉中单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)的含量 被引量:2
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作者 金一宝 栗晖 +3 位作者 于治国 赵星 张冬梅 蒋宇扬 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期126-130,共5页
目的建立奶粉中单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)的含量测定方法。方法通过有机溶剂提取和C18SPE小柱对样品进行处理,采用RP-HPLC与MS联用法测定。色谱柱为WatersC4300A柱(2.1mm×100mm,3.5μm),流动相为乙酸铵-甲醇溶液,... 目的建立奶粉中单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)的含量测定方法。方法通过有机溶剂提取和C18SPE小柱对样品进行处理,采用RP-HPLC与MS联用法测定。色谱柱为WatersC4300A柱(2.1mm×100mm,3.5μm),流动相为乙酸铵-甲醇溶液,梯度洗脱,MS检测器选用负离子SIR模式。结果分析测定无干扰,GM1质量浓度在0.500-50.0μg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,定量限为0.500μg·L^-1,批内与批间RSD均小于5%,回收率在94.4%-113.8%内。结论该法专属性强、灵敏度高、结果准确、重现性好,适用于奶粉中GM1的定量分析。 展开更多
关键词 神经节苷脂GM1 高效液相色谱-质谱联用法 含量测定
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液相色谱-质谱法对奶粉中唾液酸含量的测定 被引量:13
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作者 栗晖 金一宝 +3 位作者 刘红霞 于治国 高春梅 蒋宇扬 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第S1期193-194,共2页
A simple and sensitive ion-paring HPLC-MS/MS method with negative ion mode has been developed and validated for the quantification of SA in milk.The separation was performed on C18 column with a mobile phase consistin... A simple and sensitive ion-paring HPLC-MS/MS method with negative ion mode has been developed and validated for the quantification of SA in milk.The separation was performed on C18 column with a mobile phase consisting of 4 mmol/L tetrabutylammonium hydroxide-methanol at a flow rate of 0.2 mL/min under the gradient elution.The retention time of SA was 6.1 min.Triple-quadrupole MS/MS detection was operated in negative mode by monitoring the transition of m/z 308.1>87.1 for SA.Validation results indicated that the lower limit of quantification was 0.060 mg/L and the assay showed a linear range of 0.1-100 mg/L and gave a correlation coefficient(r) of 0.998.The relative standard deviations were less than 10% at all tested concentration levels.The method has been successfully applied to the analysis of SA in milk,milk powder and breast milk. 展开更多
关键词 sialic ACID ION-PAIR HPLC-MS/MS
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不同产地龙葵药材的高效液相色谱-蒸发光散射检测指纹图谱 被引量:9
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作者 王珏 金一宝 +1 位作者 王铁杰 李晓帆 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期809-815,共7页
采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)来研究不同产地龙葵药材品质的差异,为龙葵药材质量标准的制定提供参考依据。使用Phenomenex C18色谱柱,流动相为乙腈-20%(v/v)甲醇水溶液(含0.03%(v/v)三乙胺),梯度洗脱,蒸发管... 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)来研究不同产地龙葵药材品质的差异,为龙葵药材质量标准的制定提供参考依据。使用Phenomenex C18色谱柱,流动相为乙腈-20%(v/v)甲醇水溶液(含0.03%(v/v)三乙胺),梯度洗脱,蒸发管温度为40℃。利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”对所采集的色谱图进行相似度比对,选择相似度在0.9~1.0之间的色谱图归一化拟合成龙葵的标准指纹图谱,并利用对照品进行色谱峰指认。研究结果表明,不同产地来源的龙葵药材之间具有显著的差异,依据HPLC-ELSD采集到的非挥发类成分可对中药材进行区分。该方法为龙葵药材的真实性、优良性和稳定性评价提供了一种新的、具有广阔应用前景的技术手段。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 蒸发光散射检测 龙葵 指纹图谱
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基于液相色谱-质谱联用技术的代谢组学方法在细胞种属分类中的应用 被引量:2
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作者 栗晖 于治国 +4 位作者 祖旭宇 刘峰 金一宝 蒋宇扬 刘红霞 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期387-390,共4页
细胞内的代谢产物可以反映细胞的生理状态。为了考察基于胞内代谢物的指纹图谱对不同种属细胞进行区分的可行性,利用基于超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱(UPLC-TOFMS)技术的代谢组学方法对5种不同来源的细胞进行分类,获得了小分子代... 细胞内的代谢产物可以反映细胞的生理状态。为了考察基于胞内代谢物的指纹图谱对不同种属细胞进行区分的可行性,利用基于超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱(UPLC-TOFMS)技术的代谢组学方法对5种不同来源的细胞进行分类,获得了小分子代谢产物的差异表达谱,并采用主成分分析(PCA)数据处理方法对各类细胞进行模式识别。研究结果表明,不同的细胞种属之间均能呈现显著性差异。该研究可从分子水平对细胞种属进行分类,为细胞种属的鉴定与评价提供了一种新的技术方法,为细胞组学的深入研究提供了一种潜在的、非常具有应用前景的技术手段。 展开更多
关键词 超高效液相色谱-飞行时间质谱 代谢组学 细胞分类 主成分分析
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RP-HPLC法同时测定参芪肝康胶囊中阿魏酸与6,7-二甲氧基香豆素的含量
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作者 王婷 赵云丽 +2 位作者 高晓霞 金一宝 于治国 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期555-558,共4页
目的建立同时测定参芪肝康胶囊中阿魏酸与6,7一二甲氧基香豆素的HPLC法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以甲醇-体积分数为0.5%的冰醋酸溶液(体积比为35:65)为流动相,流速:1.0mL·min^-1,检... 目的建立同时测定参芪肝康胶囊中阿魏酸与6,7一二甲氧基香豆素的HPLC法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm),以甲醇-体积分数为0.5%的冰醋酸溶液(体积比为35:65)为流动相,流速:1.0mL·min^-1,检测波长:316nm,柱温:25℃。结果阿魏酸与6,7-二甲氧基香豆素的线性分别为0.06—0.60mg·L“(,.=0.9991)、0.60~12.00mg·L^-1(,=D.9998)和1.808—18.080mg·L^-1(r=0.9996)、18.08~361.60mg·L^-1(,=0.9998),平均回收率分别为98.5%和99.4%,RSD分别为1.3%和2.0%。结论所建立的RP-HPLC法可用于参芪肝康胶囊中阿魏酸与6,7-二甲氧基香豆素的含量测定。 展开更多
关键词 参芪肝康胶囊 阿魏酸 6 7-二甲氧基香豆素 RP-HPLC
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甘西鼠尾草对缺氧/复氧H9c2大鼠心肌细胞的保护作用 被引量:5
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作者 胡伟慧 金一宝 +3 位作者 韩东岐 江坤 郭兴杰 王铁杰 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期140-143,164,共5页
目的探究甘西鼠尾草对培养H9c2大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法采用体外细胞培养方法培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤心肌细胞模型,用甘西鼠尾草进行细胞给药,干预细胞生长过程。将培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为... 目的探究甘西鼠尾草对培养H9c2大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制。方法采用体外细胞培养方法培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤心肌细胞模型,用甘西鼠尾草进行细胞给药,干预细胞生长过程。将培养的H9c2大鼠心肌细胞随机分为6组,分别为缺氧/复氧模型组(hypoxia/reoxygenation,H/R组);正常对照组(control,C组);缺氧/复氧模型+维拉帕米(verapamil)阳性对照组(H/R+V组);缺氧/复氧模型+甘西鼠尾草低、中和高剂量(0.01、0.1和1.0mg·L^(-1))干预组(H/R+L、M、H组)。使用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium,MTT)法测定细胞存活率;收集所培养的细胞上清液测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性;使用荧光酶标仪,测定能够反映细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平高低的荧光吸光度值。结果甘西鼠尾草可明显提高心肌细胞存活率,有效减少细胞内LDH漏出量和胞浆内MDA的含量,并降低细胞内ROS水平。结论甘西鼠尾草对缺氧/复氧损伤心肌细胞具有显著的保护作用,其作用机制可能与其增强细胞清除氧自由基能力、减少脂质过氧化物的产生有关。 展开更多
关键词 甘西鼠尾草 H9c2大鼠心肌细胞 缺氧/复氧
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基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究Pokemon诱导的胞内脂代谢变化 被引量:3
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作者 金一宝 李上富 +5 位作者 王珏 高丹 刘红霞 蒋宇扬 殷果 王铁杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期162-168,共7页
Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Poke... Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Pokemon高表达的HL7702细胞,分别收集转染后不同时间点的细胞。利用基于液相色谱-质谱联用技术的代谢组学方法,分析胞内代谢物的成分。根据多元统计分析的结果选出差异显著的候选代谢物,通过数据库(METLIN和HMDB)检索、二级图谱比对进行结构解析,确证了36种代谢物。通过KEGG数据库检索发现这些代谢物主要与脂质合成相关。进一步分析发现脂质合成途径中乙酰辅酶羧化酶和脂肪酸合成酶均被激活。结果显示,Pokemon可通过激活细胞中脂质合成通路而影响细胞的代谢。 展开更多
关键词 液相色谱-质谱联用 POKEMON 代谢组学 脂质合成
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不同采收期龙葵药材质量研究 被引量:5
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作者 王珏 金一宝 +1 位作者 王铁杰 李晓帆 《中国现代中药》 CAS 2018年第1期66-69,73,共5页
目的:比较不同采收期龙葵的药效作用、指纹图谱和药效物质成分含量,评价不同采收期龙葵药材的品质。方法:采用MTS法测定龙葵药材的细胞毒活性,同时利用高效液相色谱-蒸发光检测器技术对不同采收期的龙葵药材进行了色谱采集,通过指纹图... 目的:比较不同采收期龙葵的药效作用、指纹图谱和药效物质成分含量,评价不同采收期龙葵药材的品质。方法:采用MTS法测定龙葵药材的细胞毒活性,同时利用高效液相色谱-蒸发光检测器技术对不同采收期的龙葵药材进行了色谱采集,通过指纹图谱相似度评价软件对采集到的8组数据进行相似度评价,并对其中的主要活性成分去半乳糖替告皂苷进行了定量分析。结果:发现不同的采收期对龙葵的细胞毒活性有较大的影响。不同采收期指纹图谱相似性存在显著差异,去半乳糖替告皂苷的含量在不同采收期时存在波动变化。结论:不同采收期的龙葵药材品质存在差异。 展开更多
关键词 龙葵 高效液相色谱法 采收期 指纹图谱 细胞毒性 去半乳糖替告皂苷
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