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固定破膜对流式细胞仪检测抗体平均荧光值和阳性细胞比例的影响研究
1
作者
郭夏宁
刘雨欣
+5 位作者
余松
李蓉
杨晔
李嘉庆
曹萌
栾晶
《中国免疫学杂志》
北大核心
2025年第8期1997-2002,共6页
目的:按常规髓系细胞染色方案,分别采用固定破膜法与非固定破膜法对脾脏细胞和外周血细胞进行孵育染色,流式细胞术检测后对比分析染色效果。方法:取3只8周龄C57雄性小鼠外周血和脾脏,分为固定破膜组和非固定破膜组进行染色,流式细胞术...
目的:按常规髓系细胞染色方案,分别采用固定破膜法与非固定破膜法对脾脏细胞和外周血细胞进行孵育染色,流式细胞术检测后对比分析染色效果。方法:取3只8周龄C57雄性小鼠外周血和脾脏,分为固定破膜组和非固定破膜组进行染色,流式细胞术检测各荧光抗体平均荧光强度(MFI)和阳性细胞占比。结果:小鼠外周血样本中,固定破膜组7-AADPerCP-Cyanine5.5、CD147-PE MFI低于非固定破膜组,F4/80-FITC、MHC ClassⅡ(I-A/I-E)-APC-R700、Ly-6c-APC-Cy7、CD206-BV421、CD45-BV510、CD11b-BV605、CD11c-BV650、CD86-BV786 MFI高于非固定破膜组;固定破膜组与非固定破膜组各免疫细胞比例均高度接近。小鼠脾脏样本中,固定破膜组除CD147-PE MFI低于非固定破膜组,其余抗体MFI均高于非固定破膜组;树突状细胞、Mon/Ly-6c^(low)细胞比例均低于非固定破膜组,其余髓系细胞亚群比例均高于非固定破膜组。结论:外周血细胞中,固定破膜可提高抗体MFI,但基本不影响各免疫细胞比例。脾脏细胞中,固定破膜可提高抗体MFI,但对各免疫细胞比例的影响较大,为得到稳定且可靠的检测结果,建议尽量选择可替代的细胞表面抗原进行检测,或通过必要的预实验优化方案。
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关键词
流式细胞术
固定破膜
平均荧光强度
阳性细胞比
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职称材料
题名
固定破膜对流式细胞仪检测抗体平均荧光值和阳性细胞比例的影响研究
1
作者
郭夏宁
刘雨欣
余松
李蓉
杨晔
李嘉庆
曹萌
栾晶
机构
陈志南院士工作站
空军军医大学口腔医院麻醉科
出处
《中国免疫学杂志》
北大核心
2025年第8期1997-2002,共6页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(82302032)
陕西省教育厅重点科学研究计划项目(21JS040)
+1 种基金
陕西省科技厅自然科学基础研究计划一般项目(2021JQ-777)
广西代谢性疾病研究重点实验室开放课题项目(2020-924h-03)。
文摘
目的:按常规髓系细胞染色方案,分别采用固定破膜法与非固定破膜法对脾脏细胞和外周血细胞进行孵育染色,流式细胞术检测后对比分析染色效果。方法:取3只8周龄C57雄性小鼠外周血和脾脏,分为固定破膜组和非固定破膜组进行染色,流式细胞术检测各荧光抗体平均荧光强度(MFI)和阳性细胞占比。结果:小鼠外周血样本中,固定破膜组7-AADPerCP-Cyanine5.5、CD147-PE MFI低于非固定破膜组,F4/80-FITC、MHC ClassⅡ(I-A/I-E)-APC-R700、Ly-6c-APC-Cy7、CD206-BV421、CD45-BV510、CD11b-BV605、CD11c-BV650、CD86-BV786 MFI高于非固定破膜组;固定破膜组与非固定破膜组各免疫细胞比例均高度接近。小鼠脾脏样本中,固定破膜组除CD147-PE MFI低于非固定破膜组,其余抗体MFI均高于非固定破膜组;树突状细胞、Mon/Ly-6c^(low)细胞比例均低于非固定破膜组,其余髓系细胞亚群比例均高于非固定破膜组。结论:外周血细胞中,固定破膜可提高抗体MFI,但基本不影响各免疫细胞比例。脾脏细胞中,固定破膜可提高抗体MFI,但对各免疫细胞比例的影响较大,为得到稳定且可靠的检测结果,建议尽量选择可替代的细胞表面抗原进行检测,或通过必要的预实验优化方案。
关键词
流式细胞术
固定破膜
平均荧光强度
阳性细胞比
Keywords
Flow cytometry
Fixation and permeabilization
Mean fluorescence intensity
Positive cell proportion
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
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1
固定破膜对流式细胞仪检测抗体平均荧光值和阳性细胞比例的影响研究
郭夏宁
刘雨欣
余松
李蓉
杨晔
李嘉庆
曹萌
栾晶
《中国免疫学杂志》
北大核心
2025
0
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