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山柰酚调控Notch1/Hes1信号通路对视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿的影响
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作者 刘梦婷 葛申 +3 位作者 郭一俊 李伟博 吴文思 苏晶 《眼科新进展》 北大核心 2025年第10期761-768,共8页
目的探讨山柰酚(KPF)治疗视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿(RVO-ME)的作用机制。方法光凝法构建SD大鼠RVO模型。20只SD大鼠随机分为Control组(正常大鼠,注射生理盐水)、Model组(RVO模型大鼠,注射生理盐水)、低KPF组[RVO模型大鼠,注射KPF(8 mg... 目的探讨山柰酚(KPF)治疗视网膜静脉阻塞继发黄斑水肿(RVO-ME)的作用机制。方法光凝法构建SD大鼠RVO模型。20只SD大鼠随机分为Control组(正常大鼠,注射生理盐水)、Model组(RVO模型大鼠,注射生理盐水)、低KPF组[RVO模型大鼠,注射KPF(8 mg·kg^(-1)·d^(-1))]以及高KPF组[RVO模型大鼠,注射KPF(16 mg·kg^(-1)·d^(-1))],每组5只,实验共进行14 d。眼底照相观察大鼠视网膜血管情况;HE染色观察大鼠视网膜结构变化。将HRMECs随机分为对照组(不做任何干预)、CoCl_(2)组(300μmol·L^(-1) CoCl_(2)干预)、低剂量KPF组(300μmol·L^(-1) CoCl_(2)+20μmol·L^(-1) KPF干预)、高剂量KPF组(300μmol·L^(-1) CoCl_(2)+30μmol·L^(-1) KPF干预)以及通路抑制剂组(DAPT组)(300μmol·L^(-1) CoCl_(2)+20μmol·L^(-1) DAPT干预),干预24 h。CCK-8法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移率;ELISA法检测细胞炎症相关因子[白细胞介素(IL)-6与肿瘤坏死因子(TNF)-ɑ]表达水平;FITC-dextran法评价内皮细胞单层通透性;免疫荧光法检测细胞紧密连接蛋白1(ZO-1)的表达手水平;Western blot法检测细胞相关蛋白(ZO-1、Occludin、Notch1以及Hes1)表达水平;RT-PCR法检测细胞相关蛋白mRNA表达水平。结果眼底照片显示,Model组大鼠视网膜静脉血流中断,视网膜水肿隆起,KPF干预后大鼠眼底血流通畅,水肿缓解;HE染色结果显示,Model组大鼠视网膜排列紊乱,内外核层迂曲水肿严重;KPF干预后大鼠视网膜结构清晰,水肿改善。与CoCl_(2)组相比,低剂量KPF组与高剂量KPF组HRMECs的细胞迁移率均下降,细胞活力均提高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA检测结果显示,与CoCl_(2)组相比,低剂量KPF组、高剂量KPF组以及DAPT组细胞的IL-6与TNF-ɑ的表达水平均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。FITC-dextran实验结果显示,与CoCl_(2)组相比,低剂量KPF组、高剂量KPF组以及DAPT组细胞的通透系数均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,与CoCl_(2)组相比,低剂量KPF组、高剂量KPF组以及DAPT组细胞中ZO-1表达水平均增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。Western blot以及RT-PCR检测结果显示,与CoCl_(2)组相比,低剂量KPF组、高剂量KPF组以及DAPT组细胞中ZO-1与Occludin蛋白以及mRNA相对表达水平均增加,Notch1与Hes1蛋白以及mRNA相对表达水平均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论KPF可通过抑制Notch1/Hes1信号通路发挥抗炎作用并改善细胞间紧密连接,从而治疗RVO-ME。 展开更多
关键词 KPF Notch 紧密连接 炎症 HRMECs 视网膜静脉阻塞 黄斑水肿
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