鹦鹉热衣原体重组主要外膜蛋白诱导肉鸡免疫应答观察 被引量：1

1

作者 郝永新 何诚 +3 位作者 赵德明 武艳 朱虹 端青 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第12期1065-1067,共3页

用鹦鹉热衣原体 (Chlamydiapsittaci,Cps)重组主要外膜蛋白 (RecombinentMajorOuter Membraneprotein ,r MOMP)制作成油佐剂疫苗 ,经颈部皮下免疫 5d肉鸡。在免疫前 1d、免疫后 14d、2 1d和 30d分别翅静脉采血 ,以常规血凝抑制试验检测... 用鹦鹉热衣原体 (Chlamydiapsittaci,Cps)重组主要外膜蛋白 (RecombinentMajorOuter Membraneprotein ,r MOMP)制作成油佐剂疫苗 ,经颈部皮下免疫 5d肉鸡。在免疫前 1d、免疫后 14d、2 1d和 30d分别翅静脉采血 ,以常规血凝抑制试验检测抗体效价 ;用MTT法检测全血淋巴细胞对r MOMP的特异性增殖反应 ;免疫 30d使用鹦鹉热衣原体强毒株(BJF5株 )攻毒 ,观察临床症状 ,计算病变程度和保护率。结果表明免疫 14d后产生抗体 ,效价达 4 .2 (log2 ) ,免疫后 30d效价达到 5 .0 (log2 ) ;免疫组血液T淋巴细胞对r MOMP的增殖指数明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。试验表明r MOMP在肉鸡体内可诱导对Cps特异性的体液免疫和细胞免疫应答 ,并能抵抗Cps强毒的攻击 ,显示r MOMP免疫肉鸡具有良好的免疫原性和保护性。 展开更多

关键词 鹦鹉热衣原体 重组主要外膜蛋白 肉鸡 免疫应答

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肉鸡自然感染和实验性感染鹦鹉热衣原体的病理学观察

2

作者 郝永新 杨建民 +2 位作者 何诚 宁章勇 赵德明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第6期17-20,共4页

关键词 鹦鹉热衣原体 实验性感染 肉鸡生产 病理学观察 自然感染 人兽共患传染病 衣原体病 呼吸困难 非特异性 接触性

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朊蛋白抗体研究与应用

3

作者 郝永新 杨建民 +2 位作者 赵德明 秦秀慧 马李颖 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第10期33-34,共2页

关键词 朊蛋白 Prion疾病 PrP^c 应用 抗体 中枢神经系统 朊病毒疾病 退行性疾病

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慢病毒与慢病毒病研究进展

4

作者 郝永新 杨建民 +1 位作者 宁章勇 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2004年第7期33-35,共3页

人的艾滋病与动物慢病毒病的相关性和相似性 ,使慢病毒和慢病毒病成为医学和兽医学领域最为关注的问题之一。作者就慢病毒的病原特性、致病机制及相关几种常见动物慢病毒病作一论述。

关键词 慢病毒 慢病毒病 病原特性 致病机制 动物 反转录病毒

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奶牛朊病毒基因克隆与序列分析 被引量：12

5

作者 杨建民 赵德明 +3 位作者 郝永新 李宁 于书敏 秦秀慧 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期685-688,共4页

根据已报道正常牛朊蛋白(PrPC)基因(PRNP)序列设计引物,采用PCR法扩增了6头荷斯坦奶牛的PRNP基因,将其克隆到T-Vector。序列测定及分析表明所克隆的奶牛PRNP基因片段为795bp,该基因内无内含子,包含了牛PRNP完整编码区序列,编码264个氨... 根据已报道正常牛朊蛋白(PrPC)基因(PRNP)序列设计引物,采用PCR法扩增了6头荷斯坦奶牛的PRNP基因,将其克隆到T-Vector。序列测定及分析表明所克隆的奶牛PRNP基因片段为795bp,该基因内无内含子,包含了牛PRNP完整编码区序列,编码264个氨基酸的前体蛋白,推测其分子量约34ku。其中2头共同含有未曾报道的牛PRNP多态性位点M120I,无义突变G234A,但未引起酶切位点变异,未发现插入或缺失变异;与已报道牛PRNP序列(GenBank收录号为D10613)相比,两者核苷酸序列同源性为99%,其编码的氨基酸同源性为99%。 展开更多

关键词 基因克隆 朊病毒 无义突变 正常 克隆 PCR法 前体蛋白 荷斯坦奶牛 序列分析 变异

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朊病毒致病机理研究进展 被引量：5

6

作者 杨建民 郝永新 +1 位作者 宁章勇 赵德明 《中国畜牧兽医》 CAS 2004年第10期34-37,共4页

朊病毒病是由一种新型蛋白感染因子引起的人和动物可转移神经退化性疾病 ,又称海绵状脑病 ,最终可导致患者死亡。作者就朊病毒的致病机理 ,从朊病毒学说 ,致病性、生物学特性进行阐述 ,并从病原基因遗传结构特点 ,致病蛋白的结构特点和... 朊病毒病是由一种新型蛋白感染因子引起的人和动物可转移神经退化性疾病 ,又称海绵状脑病 ,最终可导致患者死亡。作者就朊病毒的致病机理 ,从朊病毒学说 ,致病性、生物学特性进行阐述 ,并从病原基因遗传结构特点 ,致病蛋白的结构特点和形成机制作以综述 ,为该类疾病的防治提供理论依据。 展开更多

关键词 朊病毒 致病机理 疾病特征 分子生物学

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利用SYBR Green检测衣原体Real-Time PCR方法的建立 被引量：2

7

作者 杨建民 郝永新 +1 位作者 赵德明 何诚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期84-90,共7页

利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物，能够扩增627bp特异片段；使用定量标准基因组DNA，本方法能准确检测最少250fg衣原体DNA。Real-TimePCR方法与免疫荧光方法... 利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物，能够扩增627bp特异片段；使用定量标准基因组DNA，本方法能准确检测最少250fg衣原体DNA。Real-TimePCR方法与免疫荧光方法的检测结果表明：检测4种衣原体临床样本，Real-TimePCR敏感性均在96％～98%；特异性均为100％；这两种方法符合率达97％以上（n=60）；批内和批间重复性试验结果表明，本方法具有良好的准确性。本方法的建立对于快速、准确检测临床样本种特异性衣原体提供了一种切实有效的方法。 展开更多

关键词 SYBR Green 衣原体 REAL-TIME PCR 检测

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鸡隐孢子虫病治疗试验 被引量：2

8

作者 鲍嘉铭 郝永新 +5 位作者 杨建民 史晓 陈廷和 刘国华 陈国新 武乾明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2002年第5期16-18,共3页

关键词 鸡 隐孢子虫病 治疗试验 灭焦敏 高免血清 卵囊裂解物

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大熊猫朊病毒基因克隆与序列分析 被引量：1

9

作者 杨建民 赵德明 +3 位作者 李宁 宁章勇 郝永新 秦秀慧 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第3期29-32,共4页

根据已报道的哺乳动物朊病毒基因序列设计引物对，采用PCR方法扩增了大熊猫的朊病毒基因，将其克隆到T-Easy载体，序列测定及分析表明所克隆的大熊猫PRNP基因(GeneBank收录号为AF327449)片段为795bp，编码264个氨基酸的前体蛋白，推测... 根据已报道的哺乳动物朊病毒基因序列设计引物对，采用PCR方法扩增了大熊猫的朊病毒基因，将其克隆到T-Easy载体，序列测定及分析表明所克隆的大熊猫PRNP基因(GeneBank收录号为AF327449)片段为795bp，编码264个氨基酸的前体蛋白，推测其分子量约28．5ku。与已报道的牛(GeneBank收录号为AF455119)、绵羊(GeneBank收录号为AF367623)的相应序列作比较分析，核苷酸序列同源性分别为99％和83％，其编码的氨基酸同源性均为100％。在所克隆的大熊猫PRNP基因中未发现与朊病毒敏感性连锁的氨基酸多态性位点。 展开更多

关键词 大熊猫 朊病毒 基因克隆 Prion基因 序列分析

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实验动物恒河猴朊病毒基因分析

10

作者 杨建民 赵德明 +4 位作者 郝永新 阚广捍 李宁 秦秀慧 马李颖 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第1期38-41,共4页

目的　通过对拟应用于航天飞船模拟试验的实验动物恒河猴进行朊病毒基因检测和分析 ,了解其朊病毒疾病易感性 ,进而为该试验所用实验动物质量提供朊病毒疾病的遗传数据。方法　根据已报道的猴朊病毒基因序列设计引物对 ,采用PCR方法扩... 目的　通过对拟应用于航天飞船模拟试验的实验动物恒河猴进行朊病毒基因检测和分析 ,了解其朊病毒疾病易感性 ,进而为该试验所用实验动物质量提供朊病毒疾病的遗传数据。方法　根据已报道的猴朊病毒基因序列设计引物对 ,采用PCR方法扩增恒河猴朊病毒基因 ,将其克隆到T—VECTOR ,序列测定及分析。结果　序列测定及分析表明所克隆的恒河猴PRNP基因片段为 76 2bp ,该基因内无内含子 ,包含了PRNP完整编码区序列 ,编码 2 5 3个氨基酸的前体蛋白 ,推测其相对分子质量约 2 7 6× 10 3。与已报道的猴的相应序列作比较 ,核苷酸序列同源性分别为 95 %以上 ,其编码的氨基酸同源性均为 95 %以上。其中发现了已报道的多态性位点N97S ,H10 0N和未曾见报道的Q5 2E点突变位点 ,以及沉默突变位点A78G ,T84C ,T4 95C ,A5 6 4G ,C6 5 4 ,未发现与朊病毒敏感性连锁的氨基酸多态位点P10 2L、M12 9V ,N171S和E2 19K。结论　航天医学实验所用 17只恒河猴不存在朊病毒敏感性基因。 展开更多

关键词 恒河猴 朊病毒 基因序列 PPNP 实验动物 同源性 航天医学 传染性海绵状脑病

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奶牛PrP^c结构蛋白多肽合成与免疫学特性分析

11

作者 杨建民 赵德明 +2 位作者 郝永新 王辉暖 李宁 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第1期3-7,共5页

目的预测奶牛PrPc结构蛋白抗原表位,人工合成特定序列奶牛PrPc多肽用于抗体制备,同时为研究特定表位结构蛋白的功能特性提供有效手段。方法运用Goldenkey分子生物学软件对牛PrPc结构蛋白的抗原表位及其二级结构进行了分析比较,结合现有... 目的预测奶牛PrPc结构蛋白抗原表位,人工合成特定序列奶牛PrPc多肽用于抗体制备,同时为研究特定表位结构蛋白的功能特性提供有效手段。方法运用Goldenkey分子生物学软件对牛PrPc结构蛋白的抗原表位及其二级结构进行了分析比较,结合现有牛PrPc单克隆抗体识别表位从中筛选了一段显示表位特征的氨基酸残基序列,应用固相合成法合成15个氨基酸残基的奶牛PrPc多肽,并利用MBS法将其与KLH偶连制成免疫原,应用于动物免疫及多克隆抗体的制备,对该多抗与PrPc的反应性进行了检测。结果偶连后的牛PrPc多肽具有免疫原性,并获得了抗牛PrPc多克隆抗体。结论奶牛PrPc合成肽抗原的获得和应用,可以部分替代天然抗原,为进一步制备PrP单克隆抗体,以及Prion疾病的深入研究提供了有利条件,同时为研究特定表位结构蛋白的功能特性提供了新的途径。 展开更多

关键词 PrP^c 合成肽 KLH 免疫学特性 奶牛

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鸡隐孢子虫病治疗试验

12

作者 鲍嘉铭 郝永新 +5 位作者 杨建民 史晓 陈廷和 刘国华 陈国新 武乾明 《山东家禽》 2001年第6期8-11,共4页

作者以高免血清和隐孢子虫卵囊裂解物等10种药物,对113例人工感染鸡病例分4批次共12组进行了治疗试验,以临床症状、剖检变化、排出卵囊的数量及增重额度等指标判定疗效,其结果表明,高免血清及卵囊裂解物对本病具有良好的治疗效果,尤其... 作者以高免血清和隐孢子虫卵囊裂解物等10种药物,对113例人工感染鸡病例分4批次共12组进行了治疗试验,以临床症状、剖检变化、排出卵囊的数量及增重额度等指标判定疗效,其结果表明,高免血清及卵囊裂解物对本病具有良好的治疗效果,尤其高免血清的疗效更佳,为本病的治疗创出了新路。 展开更多

关键词 药物种类 剂量 鸡隐孢子虫病 治疗

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单抗捕捉ELISA检测AEV抗体方法的研究 被引量：5

13

作者 杨建民 秦卓明 +2 位作者 苏敬良 赵继勋 郝永新 《动物医学进展》 CSCD 2002年第1期72-75,共4页

本研究初步建立了检测ＡＥＶ抗体的单抗捕捉ＥＬＩＳＡ　方法。ＡＥＶ腹水单抗（腹水效价为１　∶１×１０６）最佳稀释度为１∶２００，ＡＥＶ抗原工作浓度为１６．０８　μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１∶１　００，　兔抗鸡酶标抗体... 本研究初步建立了检测ＡＥＶ抗体的单抗捕捉ＥＬＩＳＡ　方法。ＡＥＶ腹水单抗（腹水效价为１　∶１×１０６）最佳稀释度为１∶２００，ＡＥＶ抗原工作浓度为１６．０８　μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１∶１　００，　兔抗鸡酶标抗体工作浓度为１∶５００。经阻断试验、交叉试验、重复试验，以及与进口试剂　盒　进行平行检测４０份血清，总符合率为９２．５％，表明该方法特异性强、重复性好、敏感性高，　是一种有应用前景的方法。 展开更多

关键词 禽脑脊髓炎 单克隆抗体 单抗捕捉ELISA 抗体检测 鸡

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羊痒病诊断和控制新措施 被引量：1

14

作者 Katherine l.O'Rourke 郝永新 杨建民 《中国畜牧兽医》 CAS 2003年第2期50-51,共2页

关键词 羊 痒病 诊断 控制 发病机理 预防

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传染性海绵状脑病的一种特征性标识

15

作者 GINO MIELE 杨建民 郝永新 《中国畜牧兽医》 CAS 2003年第2期47-48,共2页

关键词 传染性海绵状脑病 特征性标识 造血细胞 基因表达 红细胞系 DDRT—PCR 中枢神经系统

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