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虎源高致病性禽流感病毒H5N1在实验小鼠体内分布与含量测定
被引量：
4
1
作者
常爽
郑晓一
+3 位作者
杨松涛
邹啸环
丁壮
夏咸柱
《动物医学进展》
CSCD
2006年第5期56-59,共4页
将本实验室分离、鉴定的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株第3代鸡胚尿囊液进行10-3倍稀释,接种小鼠,待小鼠死亡后无菌采取心、肝、脾、肺、肾、脑六种脏器分别研磨制成乳剂,接种MDCK细胞,以细胞病变为判定指标,计...
将本实验室分离、鉴定的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株第3代鸡胚尿囊液进行10-3倍稀释,接种小鼠,待小鼠死亡后无菌采取心、肝、脾、肺、肾、脑六种脏器分别研磨制成乳剂,接种MDCK细胞,以细胞病变为判定指标,计算病死小鼠不同脏器内病毒含量。同时用RT-PCR、血凝-血凝抑制试验以及电镜负染的方法进行鉴定和观察。结果显示,可在小鼠的肺脏、肝脏、肾脏、脑组织中检出所接种的病毒,肺脏中的病毒含量最高,脑中的病毒含量次之,肝脏和肾脏中的病毒含量最少。可在肺、肝、肾、脑组织与感染细胞培养物中扩增出与理论值一致的核酸条带,肺乳剂上清液感染细胞培养物中可检出1∶23的血凝效价,电镜观察在肺乳剂上清液及其感染细胞培养物中可见到典型的流感病毒颗粒。
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关键词
虎源高致病性禽流感病毒
小鼠
体内分布
含量测定
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职称材料
犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究
被引量：
2
2
作者
乔军
夏咸柱
+4 位作者
杨松涛
郝峰
高玉伟
郑晓一
黄耕
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期412-416,共5页
以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向...
以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞,通过RT-PCR法进行转录水平的检测,并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36 h后就可检测到目的基因的转录;在转染72 h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明,3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答,这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。
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关键词
犬冠状病毒
基因疫苗表达载体
构建
免疫原性
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职称材料
题名
虎源高致病性禽流感病毒H5N1在实验小鼠体内分布与含量测定
被引量：
4
1
作者
常爽
郑晓一
杨松涛
邹啸环
丁壮
夏咸柱
机构
解放军军事医学科学院军事兽医研究所
吉林大学生命科学院
吉林大学畜牧兽医学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
2006年第5期56-59,共4页
基金
吉林省农业重大科技专项资助项目(20040202-3-1)
全军医学科研十五计划课题(04Z016)
国家自然科学基金课题(30471Z95)
文摘
将本实验室分离、鉴定的虎源高致病性禽流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2003(H5N1)株第3代鸡胚尿囊液进行10-3倍稀释,接种小鼠,待小鼠死亡后无菌采取心、肝、脾、肺、肾、脑六种脏器分别研磨制成乳剂,接种MDCK细胞,以细胞病变为判定指标,计算病死小鼠不同脏器内病毒含量。同时用RT-PCR、血凝-血凝抑制试验以及电镜负染的方法进行鉴定和观察。结果显示,可在小鼠的肺脏、肝脏、肾脏、脑组织中检出所接种的病毒,肺脏中的病毒含量最高,脑中的病毒含量次之,肝脏和肾脏中的病毒含量最少。可在肺、肝、肾、脑组织与感染细胞培养物中扩增出与理论值一致的核酸条带,肺乳剂上清液感染细胞培养物中可检出1∶23的血凝效价,电镜观察在肺乳剂上清液及其感染细胞培养物中可见到典型的流感病毒颗粒。
关键词
虎源高致病性禽流感病毒
小鼠
体内分布
含量测定
Keywords
high pathogenic Avian influenza virus （HPAIV）
mouse
distribution in vivo
content
分类号
S858.3 [农业科学—临床兽医学]
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究
被引量：
2
2
作者
乔军
夏咸柱
杨松涛
郝峰
高玉伟
郑晓一
黄耕
机构
中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
[
吉林大学生命科学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期412-416,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30000123)
文摘
以pVAX1为载体首次构建了犬冠状病毒病基因的3种真核表达质粒。首先将犬冠状病毒大熊猫株(CCV DXMV)纤突蛋白(S)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)基因进行了克隆和序列测定。将测序后的质粒pTS、pTM和pTN分别双酶切,回收目的基因片段并将其定向克隆到真核表达质粒pVAX1中得到重组质粒pVAXS、pVAXM和pVAXN。将这3种真核表达质粒通过脂质体介导法转染MDCK细胞,通过RT-PCR法进行转录水平的检测,并用间接ELISA法检测目的蛋白的表达情况。结果在pVAXS、pVAXM、pVAXN转染MDCK细胞36 h后就可检测到目的基因的转录;在转染72 h后可检测到3种目的蛋白的表达。动物免疫试验表明,3种真核表达载体能有效地诱导机体产生细胞免疫与体液免疫应答,这为CCV基因疫苗的研究奠定了良好的基础。
关键词
犬冠状病毒
基因疫苗表达载体
构建
免疫原性
Keywords
canine coronavirus
gene vaccine vector
construction
immunogenicity
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
虎源高致病性禽流感病毒H5N1在实验小鼠体内分布与含量测定
常爽
郑晓一
杨松涛
邹啸环
丁壮
夏咸柱
《动物医学进展》
CSCD
2006
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
犬冠状病毒基因疫苗表达载体的构建及其免疫原性研究
乔军
夏咸柱
杨松涛
郝峰
高玉伟
郑晓一
黄耕
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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职称材料
已选择
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