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抗逆转基因旱稻转化体系的优化
被引量：
3
1
作者
刘青
李朝炜
+3 位作者
朱昀
苗苗
邢文岳
魏景芳
《江苏农业科学》
北大核心
2015年第11期42-45,共4页
以粳糯型常规旱稻品种"冀旱糯3号"为受体材料,利用农杆菌转化法将bar基因和lea-1基因转入旱稻细胞,建立了适用于旱稻的高效转化体系,最终获得转基因植株,并对转基因植株进行PCR检测。结果表明:当农杆菌浓度(以D_(600 nm)表示)...
以粳糯型常规旱稻品种"冀旱糯3号"为受体材料,利用农杆菌转化法将bar基因和lea-1基因转入旱稻细胞,建立了适用于旱稻的高效转化体系,最终获得转基因植株,并对转基因植株进行PCR检测。结果表明:当农杆菌浓度(以D_(600 nm)表示)为0.2时,转化效果最好。在筛选抗性愈伤时,除草剂的最佳浓度为40 mg/L,对抗性愈伤组织进行预分化能提高其分化率,对转基因植株进行分子检测,优化后的转化率提高到37.5%。
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关键词
旱稻
除草剂
农杆菌
PCR
LEA基因
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职称材料
不同品种小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化
被引量：
4
2
作者
李朝炜
姚彬
+2 位作者
苗苗
邢文岳
潘家祥
《湖北农业科学》
2015年第13期3279-3282,共4页
以4种不同基因型小麦(Triticum aestivum)品种成熟胚作为外植体进行培养,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及植株分化再生的影响。结果显示不同小麦品种对培养条件的反应各不相同。各品种小麦成熟胚的最高愈伤诱导率所需的2,4-D浓度不同,...
以4种不同基因型小麦(Triticum aestivum)品种成熟胚作为外植体进行培养,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及植株分化再生的影响。结果显示不同小麦品种对培养条件的反应各不相同。各品种小麦成熟胚的最高愈伤诱导率所需的2,4-D浓度不同,石4185和科麦一号的最适浓度为2.0 mg/L;扬麦12和Bobwhite的最适浓度为4.0 mg/L。4种小麦品种成熟胚愈伤组织再分化的最适条件也有所差别,在MS培养基中添加2.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA利于石4185和Bobwhite成熟胚的愈伤组织分化;科麦一号成熟胚的分化最适条件为1.0 mg/L KT和0.5 mg/L NAA;扬麦12成熟胚的分化则采用1.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA效果最佳。此外,继代培养时间的延长会不同程度地影响小麦成熟胚愈伤的分化。
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关键词
小麦(Triticum
aestivum)
成熟胚
愈伤组织
诱导
分化
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职称材料
地高辛标记对旱稻进行southern杂交分析主要影响因素的优化和验证
被引量：
1
3
作者
邢文岳
苏乐乐
+2 位作者
李朝炜
魏景芳
朱昀
《江苏农业科学》
北大核心
2017年第8期41-43,共3页
以转基因旱稻和野生型旱稻为材料,对通过地高辛随机引物标记法进行的旱稻基因组Southern杂交条件进行了优化分析,包括探针制备效率、DNA样品量、酶切体系及转膜时间等。结果表明:影响探针制备效率的首要因素是温度而不是时间;DNA上样量...
以转基因旱稻和野生型旱稻为材料,对通过地高辛随机引物标记法进行的旱稻基因组Southern杂交条件进行了优化分析,包括探针制备效率、DNA样品量、酶切体系及转膜时间等。结果表明:影响探针制备效率的首要因素是温度而不是时间;DNA上样量在10~30μg均可以获得高质量的杂交图;60μL体系15 h即可酶切彻底并获得良好的杂交效果;转膜时间6 h即可。本研究所优化的地高辛标记的旱稻杂交分析结果稳定重复性好,具有较高的灵敏度和信噪比。
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关键词
旱稻
地高辛
Southern杂交方法
优化
验证
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职称材料
题名
抗逆转基因旱稻转化体系的优化
被引量：
3
1
作者
刘青
李朝炜
朱昀
苗苗
邢文岳
魏景芳
机构
河北科技大学生物科学与工程学院
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2015年第11期42-45,共4页
基金
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(编号:2011ZX08001-003)
文摘
以粳糯型常规旱稻品种"冀旱糯3号"为受体材料,利用农杆菌转化法将bar基因和lea-1基因转入旱稻细胞,建立了适用于旱稻的高效转化体系,最终获得转基因植株,并对转基因植株进行PCR检测。结果表明:当农杆菌浓度(以D_(600 nm)表示)为0.2时,转化效果最好。在筛选抗性愈伤时,除草剂的最佳浓度为40 mg/L,对抗性愈伤组织进行预分化能提高其分化率,对转基因植株进行分子检测,优化后的转化率提高到37.5%。
关键词
旱稻
除草剂
农杆菌
PCR
LEA基因
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
S511.01 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
不同品种小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化
被引量：
4
2
作者
李朝炜
姚彬
苗苗
邢文岳
潘家祥
机构
河北科技大学生物科学与工程学院
出处
《湖北农业科学》
2015年第13期3279-3282,共4页
基金
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2009ZX08002-005B)
文摘
以4种不同基因型小麦(Triticum aestivum)品种成熟胚作为外植体进行培养,研究不同培养条件对愈伤组织诱导及植株分化再生的影响。结果显示不同小麦品种对培养条件的反应各不相同。各品种小麦成熟胚的最高愈伤诱导率所需的2,4-D浓度不同,石4185和科麦一号的最适浓度为2.0 mg/L;扬麦12和Bobwhite的最适浓度为4.0 mg/L。4种小麦品种成熟胚愈伤组织再分化的最适条件也有所差别,在MS培养基中添加2.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA利于石4185和Bobwhite成熟胚的愈伤组织分化;科麦一号成熟胚的分化最适条件为1.0 mg/L KT和0.5 mg/L NAA;扬麦12成熟胚的分化则采用1.0 mg/L KT和0.1 mg/L NAA效果最佳。此外,继代培养时间的延长会不同程度地影响小麦成熟胚愈伤的分化。
关键词
小麦(Triticum
aestivum)
成熟胚
愈伤组织
诱导
分化
Keywords
wheat（Triticum aestivum）
mature embryo
callus
induction
differentiation
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
Q943.1 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
地高辛标记对旱稻进行southern杂交分析主要影响因素的优化和验证
被引量：
1
3
作者
邢文岳
苏乐乐
李朝炜
魏景芳
朱昀
机构
河北科技大学
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2017年第8期41-43,共3页
基金
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(编号:2016ZX08001003-006)
河北科技大学五大平台开放基金课题(编号:SW21)
文摘
以转基因旱稻和野生型旱稻为材料,对通过地高辛随机引物标记法进行的旱稻基因组Southern杂交条件进行了优化分析,包括探针制备效率、DNA样品量、酶切体系及转膜时间等。结果表明:影响探针制备效率的首要因素是温度而不是时间;DNA上样量在10~30μg均可以获得高质量的杂交图;60μL体系15 h即可酶切彻底并获得良好的杂交效果;转膜时间6 h即可。本研究所优化的地高辛标记的旱稻杂交分析结果稳定重复性好,具有较高的灵敏度和信噪比。
关键词
旱稻
地高辛
Southern杂交方法
优化
验证
分类号
S511.01 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗逆转基因旱稻转化体系的优化
刘青
李朝炜
朱昀
苗苗
邢文岳
魏景芳
《江苏农业科学》
北大核心
2015
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
不同品种小麦成熟胚愈伤组织的诱导与分化
李朝炜
姚彬
苗苗
邢文岳
潘家祥
《湖北农业科学》
2015
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
地高辛标记对旱稻进行southern杂交分析主要影响因素的优化和验证
邢文岳
苏乐乐
李朝炜
魏景芳
朱昀
《江苏农业科学》
北大核心
2017
1
在线阅读
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职称材料
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