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亚砷酸钠对人肝星状细胞的激活作用及其与铁死亡的关系
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作者 迪丽娜尔·亚尔麦麦提 黄菲 +2 位作者 丁关鑫 赵丽君 吴顺华 《山东医药》 CAS 2023年第26期1-4,9,共5页
目的 观察亚砷酸钠(NaAsO_(2))对人肝星状细胞的激活作用,并探讨其与铁死亡的关系。方法 体外培养人肝星状细胞LX-2,将细胞分为NaAsO_(2)组和对照组,NaAsO_(2)组分别加入5、10、15μmol/LNaAsO_(2)培养24 h,对照组正常培养。倒置显微镜... 目的 观察亚砷酸钠(NaAsO_(2))对人肝星状细胞的激活作用,并探讨其与铁死亡的关系。方法 体外培养人肝星状细胞LX-2,将细胞分为NaAsO_(2)组和对照组,NaAsO_(2)组分别加入5、10、15μmol/LNaAsO_(2)培养24 h,对照组正常培养。倒置显微镜下观察细胞形态变化;比色法检测谷胱甘肽(GSH)含量;荧光探针法检测细胞脂质活性氧(ROS);RT-PCR法检测铁死亡指标溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)以及纤维化指标α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ) mRNA;采用Spearman相关分析法分析纤维化指标与铁死亡指标的相关性。结果 NaAsO_(2)组中随着NaAsO_(2)浓度升高,细胞触角逐渐回缩,细胞数量减少,细胞间距变宽。与对照组比较,NaAsO_(2)不同浓度组细胞GSH含量均减少,其中15μmol/LNaAsO_(2)组GSH含量低于10、5μmol/LNaAsO_(2)组,10μmol/LNaAsO_(2)组低于5μmol/LNaAsO_(2)组(P均<0.05)。与对照组比较,NaAsO_(2)不同浓度组脂质ROS荧光强度增强。与对照组比较,5、10、15μmol/LNaAsO_(2)组α-SMA、CollagenⅠmRNA表达水平均升高,且15μmol/LNaAsO_(2)组高于5、10μmol/LNaAsO_(2)组,10μmol/LNaAsO_(2)组高于5μmol/LNaAsO_(2)组(P均<0.05);与对照组比较,5、10、15μmol/LNaAsO_(2)组SLC7A11、GPX4 mRNA表达水平均降低,且15μmol/LNaAsO_(2)组低于10、5μmol/LNaAsO_(2)组,10μmol/LNaAsO_(2)组低于5μmol/LNaAsO_(2)组。α-SMA mRNA与GPX4、SLC7A11 mRNA表达呈负相关(r分别为-0.72、-0.92,P均<0.01),CollagenⅠmRNA与GPX4、SLC7A11 mRNA表达亦呈负相关(r分别为-0.67、-0.90,P均<0.01)。结论 NaAsO_(2)能够改变肝星状细胞形状,促进细胞纤维化基因表达,引起肝星状细胞激活;在此过程中,SLC7A11、GPX4基因表达下调导致ROS堆积,促进肝星状细胞铁死亡;上述作用随着NaAsO_(2)浓度升高而增强。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 人肝星状细胞 铁死亡 肝纤维化
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亚砷酸钠对人肝星状细胞活化的影响及机制 被引量：2
2
作者 李昂 黄菲 +3 位作者 迪丽娜尔·亚尔麦麦提 丁关鑫 日沙来提·塔依尔 吴顺华 《山东医药》 CAS 2022年第19期12-15,共4页
目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对人肝星状细胞(LX-2细胞)活化的影响及机制。方法体外培养LX-2细胞,取对数生长期LX-2细胞,分别加入浓度为0、5、15、20、30、40、50μmol/L的NaAsO_(2)培养液,用MTT法检测细胞活力并确定NaAsO_(2)实验浓度... 目的探讨亚砷酸钠(NaAsO_(2))对人肝星状细胞(LX-2细胞)活化的影响及机制。方法体外培养LX-2细胞,取对数生长期LX-2细胞,分别加入浓度为0、5、15、20、30、40、50μmol/L的NaAsO_(2)培养液,用MTT法检测细胞活力并确定NaAsO_(2)实验浓度。取对数生长期LX-2细胞随机分为对照组及NaAsO_(2)低、中、高浓度组,分别用0、5、10、15μmol/L的NaAsO_(2)干预48 h。用透射电子显微镜观察细胞自噬变化,用Western blotting法检测细胞活化蛋白(ɑ-SMA)及自噬蛋白(AKT、Hes1、mTOR)表达。结果随着NaAsO_(2)染毒浓度的增加,细胞增殖抑制率逐渐升高;根据细胞半数抑制浓度及细胞活性选择5、10、15μmol/L为NaAsO_(2)实验浓度。对照组可观察到自噬小体、自噬溶酶体。NaAsO_(2)低、中、高浓度组细胞间隙逐渐增宽,观察到“假狄氏间隙”,自噬小体数量增加,脂滴的分布更加密集,可见部分线粒体肿胀、空泡化,大量线粒体嵴断裂;NaAsO_(2)高浓度组以上变化最为明显。与对照组比较,NaAsO_(2)低、中、高浓度组ɑ-SMA蛋白相对表达量逐渐升高(P均<0.05);AKT、mTOR蛋白表达逐渐降低,Hes1蛋白表达逐渐升高(P均<0.05)。结论NaAsO_(2)可诱导LX-2细胞活化,其机制可能与促进细胞自噬有关。 展开更多
关键词 肝脏疾病 人肝星状细胞 亚砷酸钠 细胞活化 细胞自噬
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