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题名人多药耐药基因1在CHO细胞中的表达及功能研究
被引量：1
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作者
辛中帅
奚涛
罗学刚
林超
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机构
中国药科大学生命科学与技术学院
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出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第6期594-598,共5页
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基金
国家重点基础研究发展计划("九七三"计划)资助项目(No.G1998051116)~~
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文摘
目的:构建人多药耐药基因(MDR1)的真核表达载体,转染CHO细胞,研究MDR1基因在真核细胞中的表达及功能。方法:将MDR1全长基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),利用阳离子脂质体转染CHO细胞,RT-PCR检测MDR1转染阳性细胞,并用G418筛选稳定表达MDR1基因的细胞,通过测定细胞对Rh123的外排作用以及对阿霉素的耐受性确定MDR1基因在正常细胞中的功能。结果:酶切鉴定和测序结果证明构建的重组表达载体pcDNA-MDR1序列正确。RT-PCR分析以及荧光显微镜观察结果表明:该重组表达载体已在CHO细胞中有效转录并稳定表达。Rh123外排和MTT药敏实验结果显示:转染pcDNA-MDR1的CHO细胞对Rh123外排作用显著高于未转染的CHO细胞,并且转染后的CHO细胞对阿霉素的耐药性也有显著提高。结论:成功构建了稳定表达MDR1并具有多药耐药功能的细胞株,有望成为多药耐药性药物研究的细胞模型。
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关键词
MDR1基因
多药耐药
CHO细胞
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Keywords
MDR1 gene
Muhidrug resistance
CHO cells
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分类号
R346
[医药卫生—基础医学]
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题名门冬胰岛素外源性DNA残留量的荧光法检测
被引量：2
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作者
吕萍
王洪明
辛中帅
李晶
梁成罡
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机构
中国食品药品检定研究院
山东省滨州市药品检验所
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出处
《中国医药科学》
2012年第5期36-37,共2页
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基金
重大新药创制:生物技术药物质量标准和质量控制技术平台(2012ZX09304010)
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文摘
目的建立门冬胰岛素外源性DNA残留量的荧光检测方法,用于门冬胰岛素的质量控制。方法参照《中国药典》三部附录及相关资料方法,对门冬胰岛素外源性DNA残留的荧光检测法进行研究,确定检测方法的最适条件,并对方法的线性、加样回收率、精密度、耐用性、重复性等方面进行方法学验证。结果建立了门冬胰岛素原料药中外源性DNA残留量的荧光检测方法,并进行了方法学验证。结论该方法操作简便、准确快捷,且无需标准宿主DNA,可用于门冬胰岛素质量标准中外源性DNA残留量的检测方法。
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关键词
荧光法
外源性DNA残留
门冬胰岛素
质量控制
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Keywords
Fluorescence method
Residual exogenous DNA
Insulin aspart
Quality control
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分类号
R927.2
[医药卫生—药学]
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