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HcTLR1通过MyD88-NF-κB信号通路参与三角帆蚌抗菌免疫应答
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作者 路俊怡 姜立妍 +3 位作者 龙凯 王韬 吴正理 李艳红 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期19-30,共12页
Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)家族是一类进化保守的病原体识别受体,在检测和防御微生物病原体的先天免疫中发挥着重要作用。为了探究HcTLR1基因在三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)抗菌应答中的作用,使用cDNA末端快速克隆技术(Rapid... Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)家族是一类进化保守的病原体识别受体,在检测和防御微生物病原体的先天免疫中发挥着重要作用。为了探究HcTLR1基因在三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)抗菌应答中的作用,使用cDNA末端快速克隆技术(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)获得HcTLR1基因cDNA全长序列,采用实时荧光定量PCR分析比较HcTLR1基因在三角帆蚌不同组织和不同免疫刺激后的表达水平,利用双链RNA干扰技术分析敲低该基因后MyD88依赖性通路及相关免疫基因的变化。结果显示,HcTLR1基因开放阅读框全长为3687 bp,编码1228个氨基酸。预测的HcTLR1蛋白结构包含多个亮氨酸富集的重复序列(Leucine-rich repeat,LRR)结构域、1个跨膜结构域和1个胞内Toll/白细胞介素-1(Toll-IL-1 receptor domain,TIR)受体。此外,HcTLR1基因在血细胞中表达量最高,且对维氏气单胞菌GL1(Aeromonas veronii GL1)和病原体相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)刺激呈现出差异显著的时间依赖性变化。敲低HcTLR1基因后,维氏气单胞菌GL1刺激所激活的MyD88相关通路基因、抗菌肽、溶菌酶、防御素、乳清酸性蛋白、脂多糖结合蛋白/杀菌通透性增加蛋白2和白细胞介素17等基因的表达水平显著降低。结果表明,HcTLR1参与了三角帆蚌在微生物感染过程中MyD88依赖性信号通路的活化,并促进了血细胞抵抗机制。 展开更多
关键词 三角帆蚌 HcTLR1基因 先天性免疫 RNA干扰
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