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三角褐指藻PtCryP基因的克隆及敲除载体构建
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作者 赵靖悦 龚林 +2 位作者 雷娜娜 陈由强 何文锦 《福建轻纺》 2019年第12期8-16,共9页
文章旨在获得三角褐指藻中隐花色素PtCryP的全长序列并进行生物信息分析,且利用CRISPR/Cas9系统的pKS diaCas-sgRNA质粒,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了三角褐指的敲除载体,并通过DNA测序确定插入了sgRNA序列。PtCry... 文章旨在获得三角褐指藻中隐花色素PtCryP的全长序列并进行生物信息分析,且利用CRISPR/Cas9系统的pKS diaCas-sgRNA质粒,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了三角褐指的敲除载体,并通过DNA测序确定插入了sgRNA序列。PtCryP基因的开放阅读框全长为1575 bp,编码524个氨基酸,预测的等电点8.30,理论分子量58.98 kD。通过结构域分析,隐花色素蛋白的典型结构域存在于PtCryP蛋白中。本研究首次构建了三角褐指藻PtCryP的CRISPR/Cas9敲除载体,为下一步三角褐指藻CryP的表达和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 三角褐指藻 PtCryP基因 生物信息学分析 CRISPR/Cas9
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激光捕获显微切割技术在生物学方面的应用 被引量:1
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作者 陈璐瑶 吴钧坚 +3 位作者 龚琳 赵靖悦 陈由强 何文锦 《福建轻纺》 2020年第8期8-14,共7页
激光捕获显微切割(Laser capture microdissection,LCM)技术是在不破坏组织结构的前提下,从冰冻或石蜡包埋的复杂生物样品中,分离纯化单一类型细胞群或单个目标细胞的新兴的革命性技术。该技术使进一步精细地研究组织中异质细胞成为可能... 激光捕获显微切割(Laser capture microdissection,LCM)技术是在不破坏组织结构的前提下,从冰冻或石蜡包埋的复杂生物样品中,分离纯化单一类型细胞群或单个目标细胞的新兴的革命性技术。该技术使进一步精细地研究组织中异质细胞成为可能,文章介绍了激光捕获显微切割技术的原理、发展以及在肿瘤病理学和植物学等方面的应用,并且对目前该技术在应用过程中存在的问题以及未来发展方向进行了讨论。 展开更多
关键词 激光捕获显微切割 肿瘤病理学 植物学
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三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因克隆、过表达载体构建及生物信息学分析
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作者 雷娜娜 叶浩盈 +5 位作者 赵靖悦 龚林 胡荣飞 何文锦 陈由强 薛婷 《福建农业科技》 2019年第9期1-7,共7页
通过RT-PCR的方法克隆三角褐指藻的△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA序列,利用双酶切技术构建重组表达载体,并对该基因进行相关的生物信息学分析。结果表明:三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA全长为834 bp,编码278个氨基酸,预测的等电点... 通过RT-PCR的方法克隆三角褐指藻的△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA序列,利用双酶切技术构建重组表达载体,并对该基因进行相关的生物信息学分析。结果表明:三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因的cDNA全长为834 bp,编码278个氨基酸,预测的等电点为9-13,理论分子量32348-91。△5-脂肪酸延长酶基因中存在1个内含子,该酶属于ELO系列延长酶,可能定位于内质网中,包含多个跨膜区域和保守区域。亲缘关系分析表明,三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶与假微型海链藻的亲缘关系最近。试验还成功构建了三角褐指藻△5-脂肪酸延长酶基因过表达重组质粒pPha-T1-5e,为下一步三角褐指藻中相关油脂代谢基因的表达和功能验证奠定基础。 展开更多
关键词 三角褐指藻 △5-脂肪酸延长酶 克隆 生物信息学分析 载体构建
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球等鞭金藻Cry1-like基因克隆及生物信息学分析
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作者 龚林 赵靖悦 +4 位作者 雷娜娜 胡荣飞 陈由强 薛婷 何文锦 《福建轻纺》 2020年第1期4-11,共8页
隐花色素(cryptochrome)基因家族作为蓝光受体的一大类,广泛存在于动植物体内,介导了植物和动物的各种光响应。文章通过实验克隆出球等鞭金藻(Isochrysis galbana)一条隐花色素基因,该基因DNA全长2916 bp,cDNA全长2316 bp,由771个氨基... 隐花色素(cryptochrome)基因家族作为蓝光受体的一大类,广泛存在于动植物体内,介导了植物和动物的各种光响应。文章通过实验克隆出球等鞭金藻(Isochrysis galbana)一条隐花色素基因,该基因DNA全长2916 bp,cDNA全长2316 bp,由771个氨基酸组成。对其进行相关生信分析,预测该基因是球等鞭金藻Cry1基因(文中称为Cry1-like基因),克隆得到的Cry1-like基因能够为后续球等鞭金藻隐花色素基因结构与功能研究提供依据。 展开更多
关键词 隐花色素 球等鞭金藻 Cry1-like基因 生物信息分析
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