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中间球海胆氨基酸代谢酶GDH基因表达及其功能受HIF-1α基因调控的机制
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作者 宁冰玉 王皓霖 +3 位作者 孙景贤 赵谭军 常亚青 湛垚垚 《大连海洋大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期926-937,共12页
为了阐明中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)氨基酸代谢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)基因表达及其功能受转录因子HIF-1α基因调控的分子机制,利用基因步移、双荧光素酶报告基因检测及RNA干扰等技术,克隆分析了中间球海胆GD... 为了阐明中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)氨基酸代谢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)基因表达及其功能受转录因子HIF-1α基因调控的分子机制,利用基因步移、双荧光素酶报告基因检测及RNA干扰等技术,克隆分析了中间球海胆GDH基因的启动子序列及其结构特征,验证了中间球海胆中GDH基因启动子区与HIF-1α基因的结合位点及调控关系,解析了GDH基因表达受HIF-1α基因调控对中间球海胆体腔细胞和性腺能量产生的影响。结果表明:中间球海胆GDH基因启动子全长为1067 bp,包含12种基本调控元件、14种不同转录因子的结合位点及1个CpG岛,启动子核心区为-984~-363 bp;在GDH基因启动子区(-683~-649 bp和-280~-264 bp)中存在与HIF-1α基因的结合位点且两者存在正调控关系;抑制中间球海胆HIF-1α基因表达后,中间球海胆体腔细胞和性腺中的GDH基因的相对表达(mRNA和蛋白水平)及相对总GDH酶活力均呈现下降趋势且伴有ATP相对含量的显著降低。研究表明,海胆中HIF-1α基因可通过正向调控GDH基因的转录活性影响该基因的表达,最终影响海胆不同组织中的能量(ATP)水平。 展开更多
关键词 中间球海胆 缺氧诱导因子-1Α GDH基因启动子 转录调控 能量产生
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刺参精子冷冻保存方法研究 被引量:3
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作者 赵谭军 尹文露 +4 位作者 邹炀 刘丽 宋坚 常亚青 湛垚垚 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期57-65,共9页
为获得适宜的刺参Apostichopus japonicus精子冷冻保存技术,综合借鉴现有水产动物精子冷冻保存方法,对刺参精子降温方式、冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度进行了筛选,在筛选出适宜的刺参精子降温方式基础上,分别以煮沸... 为获得适宜的刺参Apostichopus japonicus精子冷冻保存技术,综合借鉴现有水产动物精子冷冻保存方法,对刺参精子降温方式、冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度进行了筛选,在筛选出适宜的刺参精子降温方式基础上,分别以煮沸消毒海水和超纯水为溶剂,加入葡萄糖、NaCl、KCl、海藻糖、无水CaCl2和冷冻保存剂[二甲基亚砜(DMSO)、甘油(Gly)或1,2-丙二醇(1,2-G)]配制冷冻保存剂终体积分数为5%、10%和15%的冷冻保存液(Aj-1~Aj-27),以体积比为1∶1、1∶2和1∶3的比例混合精子与冷冻保存液进行冷冻保存,冷冻48 h后分别在37℃和30℃水浴条件下进行精子复苏,以精子活率、快速运动时间和精子寿命为指标,综合筛选冷冻保存刺参精子的适宜冷冻保存液、精子与冷冻保存液混合比例及复苏温度。结果表明:将刺参精子与以超纯水为溶剂配制的Aj-20精子冷冻保存液(12 g/L葡萄糖、7 g/L NaCl、0.7 g/L KCl、5 g/L海藻糖、0.1 g/L无水CaCl2和终体积分数为10%的DMSO)以体积比为1∶2的比例混合,以三步法降温方式冷冻保存,并在30℃水浴短时迅速复苏,该技术方法为本研究筛选到的最优刺参精子冷冻保存方法;与本研究中其他冷冻技术方法相比,应用该优选方法冷冻保存的刺参精子在复苏后精子活率最大(19.00±4.00)%、快速运动时间最长(1178.67 s±14.57 s)、寿命最久(2817.33 s±93.76 s);应用该优选方法冷冻保存72、120、408 h的精子复苏后受精率可达70%以上(精子与卵子数量比为1×106∶1),受精的卵囊孵化率可达到50%。研究表明,本研究中筛选获得的冷冻保存液配方及其冷冻保存方法比较适宜刺参精子的长期冷冻保存,具有应用于生产实践的潜力。 展开更多
关键词 刺参 精子 低温冷冻保存 孵化率
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水产动物精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术研究进展 被引量:1
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作者 赵谭军 刘丽 +1 位作者 常亚青 湛垚垚 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期748-754,共7页
生殖细胞及胚胎的低温冷冻保存不仅是水产动物种质资源保存的重要技术手段之一,也是为水产动物优良新品种创制和培育提供基础育种材料的主要途径。精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术是近年来水产研究领域新兴的一种低温冷冻保存技术,... 生殖细胞及胚胎的低温冷冻保存不仅是水产动物种质资源保存的重要技术手段之一,也是为水产动物优良新品种创制和培育提供基础育种材料的主要途径。精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术是近年来水产研究领域新兴的一种低温冷冻保存技术,与传统冷冻保存的精子或胚胎相比,冷冻保存的精原干细胞及胚胎干细胞具有自我更新及多向分化的潜能,同时还具有可以进行体外分化与移植等优势。本文综述了近年来水产动物精原干细胞和胚胎干细胞冷冻保存技术研究及其应用成果,以期进一步丰富和完善水产动物精子和胚胎冷冻及保存技术的资料体系,为充分利用低温冷冻保存技术提高水产经济动物优质种质资源保护和新种创制效率提供参考。 展开更多
关键词 水产动物 精原干细胞 胚胎干细胞 冷冻保存
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皮氏蛾螺形态性状对体质量与软体部质量的相关性及通径分析 被引量:11
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作者 韩森荣 李春茂 +5 位作者 李婷婷 孙继红 邹雯静 赵谭军 湛垚垚 常亚青 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期976-984,共9页
为明确中国北方沿海自然皮氏蛾螺Volutharpa ampullacea Perryi群体形态性状对两种质量性状(体质量和软体部质量)的影响,对自然环境下采集的100个皮氏蛾螺的8个形态性状(壳高X_(1)、壳宽X_(2)、壳口高X_(3)、壳口宽X_(4)、体螺层高X_(5... 为明确中国北方沿海自然皮氏蛾螺Volutharpa ampullacea Perryi群体形态性状对两种质量性状(体质量和软体部质量)的影响,对自然环境下采集的100个皮氏蛾螺的8个形态性状(壳高X_(1)、壳宽X_(2)、壳口高X_(3)、壳口宽X_(4)、体螺层高X_(5)、体螺层宽X_(6)、螺旋部高X_(7)和螺旋部宽X_(8))和2个质量性状(体质量Y_(1)和软体部质量Y_(2))进行了测量,采用相关性分析、通径分析和多元回归分析等方法研究了中国黄海北部皮氏蛾螺形态性状对其质量性状的影响。结果表明:皮氏蛾螺各性状间均呈极显著相关(P<0.01),其中,壳宽对体质量的影响最大,而体螺层高则对软体部质量影响最大;经多元回归分析,剔除对体质量影响不显著的形态性状,建立了以体质量为因变量,以形态性状为自变量的最优回归方程Y_(1)=-51.102+0.819X_(5)+0.792X_(3)+0.757X_(2)+0.593X_(8)(R^(2)=0.786);剔除对软体部质量影响不显著的形态性状,建立了以软体部质量为因变量,以形态性状为自变量的最优回归方程Y_(2)=-50.078+0.934X_(5)+0.544X_(2)+0.628X_(3)+0.621X_(7)(R^(2)=0.789)。研究表明,在以体质量为选择目标进行皮氏蛾螺的亲本选择时,应首先以壳宽为首要选择的性状,同时加强壳口高的协同选择;而在以软体部质量为选择目标进行皮氏蛾螺亲本选择时,则应首先以体螺层高为首要选择的性状,同时加强壳口高的协同选择。 展开更多
关键词 皮氏蛾螺 形态性状 质量性状 通径分析 回归分析
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皮氏蛾螺黏液粗蛋白对肝癌细胞增殖及荷瘤小鼠肿瘤生长的影响 被引量:1
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作者 于凌慧 赵谭军 +5 位作者 陈思梦 李娜 徐静 李春茂 湛垚垚 常亚青 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期592-601,共10页
为明确皮氏蛾螺Volutharpa ampullacea Perryi黏液粗蛋白的抗肿瘤作用,以人肝癌细胞Hep-G2和H荷瘤小鼠为研究对象,采用显微观察、流式细胞术和qRT-PCR等方法,通过体外和体内试验,分析了皮氏蛾螺黏液粗蛋白对人肝癌细胞Hep-G2增殖及H荷... 为明确皮氏蛾螺Volutharpa ampullacea Perryi黏液粗蛋白的抗肿瘤作用,以人肝癌细胞Hep-G2和H荷瘤小鼠为研究对象,采用显微观察、流式细胞术和qRT-PCR等方法,通过体外和体内试验,分析了皮氏蛾螺黏液粗蛋白对人肝癌细胞Hep-G2增殖及H荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。结果表明:与未经处理的对照组相比,0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白处理组Hep-G2细胞在形态上呈现变形严重、核浓缩且核膜模糊、胞质出现空泡、线粒体肿胀及细胞表面微绒毛显著减少等现象;0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白处理组Hep-G2细胞中G2/M期细胞比例显著高于对照组(P<0.05);0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白处理12 h时,小鼠Hep-G2细胞中的细胞周期蛋白基因(CCNB1)和细胞周期蛋白依赖性激酶基因(CDK1)相对表达水平显著低于对照组(P<0.05);0.66 g/L皮氏蛾螺黏液粗蛋白注射组(预防组和治疗组,注射剂量为30 mg/kg)荷瘤小鼠体内肿瘤的平均质量极显著低于模型对照组(P<0.01)。研究表明,皮氏蛾螺黏液粗蛋白在体内外均有抗肝癌作用,具有成为海洋源抗肝癌药物的开发潜力。 展开更多
关键词 皮氏蛾螺 黏液粗蛋白 肝癌细胞Hep-G2 H22荷瘤小鼠 抗肿瘤
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