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热处理消除激光选区熔化GH4169高温合金微观组织及高温拉伸性能各向异性
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作者 赵海生 房立家 +1 位作者 刘欢 窦开沁 《材料工程》 北大核心 2025年第3期54-62,共9页
激光选区熔化GH4169高温合金具有明显的定向柱状枝晶凝固组织,会引起严重的力学性能各向异性,增加服役风险。本工作以激光选区熔化(SLM)技术制备的GH4169高温合金为研究对象,设计两种不同的热处理制度:热等静压+标准固溶+双时效和热等静... 激光选区熔化GH4169高温合金具有明显的定向柱状枝晶凝固组织,会引起严重的力学性能各向异性,增加服役风险。本工作以激光选区熔化(SLM)技术制备的GH4169高温合金为研究对象,设计两种不同的热处理制度:热等静压+标准固溶+双时效和热等静压+均匀化热处理+标准固溶+双时效对所制备合金进行后热处理,探究两种热处理制度对激光选区熔化GH4169高温合金微观组织及高温拉伸性能各向异性的影响。结果表明:均匀化热处理消除了Laves相,沉积态GH4169合金的柱状晶组织向等轴晶组织转变。高温拉伸结果显示,未经均匀化处理GH4169合金横向与纵向的高温抗拉强度比和塑性比分别为1.10(1145/1040)和0.83(10.2/12.2),均匀化热处理态GH4169合金横向与纵向的高温抗拉强度比和塑性比分别为1.00(1041/1038)和1.00(8.6/8.6)。激光选区熔化GH4169合金微观组织与力学性能各向异性被消除。 展开更多
关键词 激光选区熔化 GH4169高温合金 均匀化热处理 各向异性 微观组织 高温拉伸性能
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空间等离子体云精细化仿真及传播特性研究
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作者 谢守志 赵海生 +3 位作者 许正文 任光亮 王成 葛淑灿 《电波科学学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期56-64,共9页
在电离层中释放钐(Sm)等活泼金属气体,通过光致电离或化学电离,能够人工生成空间等离子体云,以其作为散射体,可开展超短波超视距通信和探测研究。本文开展了电离层Sm释放的精细化效应仿真研究,考虑了热层风场、地磁场、Sm释放速度和流... 在电离层中释放钐(Sm)等活泼金属气体,通过光致电离或化学电离,能够人工生成空间等离子体云,以其作为散射体,可开展超短波超视距通信和探测研究。本文开展了电离层Sm释放的精细化效应仿真研究,考虑了热层风场、地磁场、Sm释放速度和流量、运载器飞行速度等参量对Sm在电离层中扩散过程的影响。同时,采用射线追踪方法,研究了空间等离子体云的电波传播特性。结果表明释放参数和环境参数对等离子体云的形态和演化过程具有重要影响,等离子云在不同剖面形态各异,沿地磁场方向及风场方向出现明显拉伸,进一步对等离子体云的传播效应产生影响,导致电波在等离子体云不同剖面传播特性出现差异。 展开更多
关键词 电离层 化学物质释放 空间等离子体云 电波传播
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东亚地区Es特性研究 被引量:7
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作者 赵海生 许正文 +1 位作者 吴振森 吴健 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期38-45,共8页
Es是发生在电离层E层高度上的偶发不规则结构,其电子密度最高可达E层背景电子密度的100倍以上.远东地区是全球Es的高发区,其相关研究具有独特性和典型性,该地区Es形态学特性的深入研究对于探索Es成因及揭示其本质具有重要意义.本文利用... Es是发生在电离层E层高度上的偶发不规则结构,其电子密度最高可达E层背景电子密度的100倍以上.远东地区是全球Es的高发区,其相关研究具有独特性和典型性,该地区Es形态学特性的深入研究对于探索Es成因及揭示其本质具有重要意义.本文利用中国电离层垂测网50余年的垂测数据,结合日本垂测网数据对东亚地区Es的强度特性、空间分布特性、日变化、季节变化以及长期变化趋势进行了深入分析,得到一些有意义的结论. 展开更多
关键词 偶发E层 Es强度 空间分布 日变化 季节变化 长期趋势
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保温时间对K452高温合金钎焊接头组织与性能的影响 被引量:5
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作者 赵海生 潘晖 +1 位作者 张学军 刘永超 《航空材料学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期43-48,共6页
采用钴基钎料及镍基合金粉料,分别在1170℃保温10min、60min和120min的钎焊工艺下,对K452镍基铸造高温合金进行真空钎焊实验,通过扫描电镜和能谱分析仪进行了接头显微组织观察与物相分析,并测试钎焊接头的高温力学性能。结果表明:在保温... 采用钴基钎料及镍基合金粉料,分别在1170℃保温10min、60min和120min的钎焊工艺下,对K452镍基铸造高温合金进行真空钎焊实验,通过扫描电镜和能谱分析仪进行了接头显微组织观察与物相分析,并测试钎焊接头的高温力学性能。结果表明:在保温60min的工艺规范下,界面实现较好的结合,钎缝内部孔洞缺陷较少,钎缝组织均匀,有利于钎焊接头性能的提高;在更长的保温时间120min下,钎缝内部又有蚀孔缺陷形成,且较多的白色块状化合物在合金粉颗粒间聚集长大,但界面结合良好,钎焊接头性能较高,900℃抗拉强度达到400MPa,900℃/100MPa持久寿命为141h55min。 展开更多
关键词 K452高温合金 钴基钎料 镍基合金粉 微观组织 拉伸性能
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三频信标高精度TEC测量新方法 被引量:4
5
作者 赵海生 许正文 +4 位作者 吴健 王占阁 刘琨 李娜 陈金松 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期201-207,共7页
电子总含量(TEC)是电离层探测的主要参量之一,作为层析(CT)的输入参量,TEC测量精度直接影响电离层CT成像的结果.过去主要采用双频信标测量TEC,由于相位积分常数的求解、系统硬件延迟等误差,使得TEC测量结果不能满足电离层CT高精度重建... 电子总含量(TEC)是电离层探测的主要参量之一,作为层析(CT)的输入参量,TEC测量精度直接影响电离层CT成像的结果.过去主要采用双频信标测量TEC,由于相位积分常数的求解、系统硬件延迟等误差,使得TEC测量结果不能满足电离层CT高精度重建成像的要求.三频相干信标技术的出现,使得电离层天基测量技术有了新的发展.提出了基于三频信标的传播时延相位联合测量反演TEC的方法,融合三频信标在电子密度随机起伏探测和相位积分常数计算两方面的优势,进一步提高了TEC的测量精度.模拟结果显示利用此方法的三频信标TEC测量结果提高了电离层CT的精度. 展开更多
关键词 电离层探测 三频信标 双频信标 TEC 电离层CT成像
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K640合金钎焊接头组织及工艺控制 被引量:5
6
作者 赵海生 潘晖 +1 位作者 孙计生 李大斌 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期17-19,24,共4页
采用不同的工艺参数对铸造钴基高温合金K640进行了钎焊实验,通过扫描电镜、能谱分析仪和X射线衍射仪对钎焊接头进行了微观组织观察、典型物相成分测试及物相分析。结果表明:不同钎焊工艺参数下的钎缝均由钴基固溶体、碳化物M23C6、硼化... 采用不同的工艺参数对铸造钴基高温合金K640进行了钎焊实验,通过扫描电镜、能谱分析仪和X射线衍射仪对钎焊接头进行了微观组织观察、典型物相成分测试及物相分析。结果表明:不同钎焊工艺参数下的钎缝均由钴基固溶体、碳化物M23C6、硼化物M3B2+钴基固溶体共晶,以及块状及颗粒状碳化物MC组成。当钎焊温度较低或保温时间较短时,钎缝中央生成大量的M3B2;随着钎焊温度的升高及保温时间的延长,钎缝中M3B2、MC减少,M23C6增多、长大。 展开更多
关键词 K640合金 钎焊 微观组织 工艺参数
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乌鲁木齐地区电离层环境长期变化特性研究 被引量:4
7
作者 赵海生 吴振森 +4 位作者 许正文 吴健 张雅彬 徐彬 薛昆 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期398-405,共8页
电离层环境变化对电子信息系统具有重要影响,其可能引起短波通信质量下降甚至中断,导致导航信号闪烁和误差增加等.研究电离层环境特性对于评估空间环境对通信、雷达及导航装备的影响具有重要意义.本文根据乌鲁木齐电波环境观测站50余年... 电离层环境变化对电子信息系统具有重要影响,其可能引起短波通信质量下降甚至中断,导致导航信号闪烁和误差增加等.研究电离层环境特性对于评估空间环境对通信、雷达及导航装备的影响具有重要意义.本文根据乌鲁木齐电波环境观测站50余年数据,研究了乌鲁木齐地区电离层F层临界频率、F层底高、Es层临界频率的日变化、季节变化和长期变化情况,同时根据HWM07高空风场模型研究了乌鲁木齐地区高空风场的昼夜和季节变化特性. 展开更多
关键词 电离层 电离层日变化 电离层季节变化
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三频卫星信标测量TEC方法探讨及数值模拟 被引量:2
8
作者 赵海生 许正文 +1 位作者 吴健 於晓 《装备环境工程》 CAS 2010年第4期9-13,共5页
针对三频信标高精度探测的特点,开展了部分比较和模拟工作,结果表明采用三频信标获得的TEC精度高于双频信标。电离层CIT成像的结果显示,采用三频信标能够探测出较小尺度的电离层扰动,而双频信标对小尺度扰动的探测结果往往无能为力。
关键词 三频信标 双频信标 TEC 电离层CIT成像
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基坑支护可拆型锚杆技术研究及应用 被引量:8
9
作者 赵海生 《岩土力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1766-1770,1774,共6页
为了避免给周围后续工程造成施工障碍和引起法律上的纠纷,基坑支护中的临时锚杆在失去作用后应将其拆除。通过对锚杆荷载传递特性的分析和在现场原型试验研究的基础上,提出了一种仅拆除拉杆材料的可拆型锚杆技术。该技术通过在拉杆材料... 为了避免给周围后续工程造成施工障碍和引起法律上的纠纷,基坑支护中的临时锚杆在失去作用后应将其拆除。通过对锚杆荷载传递特性的分析和在现场原型试验研究的基础上,提出了一种仅拆除拉杆材料的可拆型锚杆技术。该技术通过在拉杆材料和注浆体之间设置隔离措施来拆卸锚杆,并通过带传力杆的承载体将锚拉力分散传递于注浆体中。工程实例表明该技术方法简单可行,且由于受力合理,可拆型锚杆的技术性能也较普通锚杆明显有所提高。 展开更多
关键词 基坑 锚拉支护 拉杆 可拆型锚杆 无粘结钢绞线
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多数据源电离层层析成像方法 被引量:2
10
作者 赵海生 许正文 《电波科学学报》 EI CSCD 北大核心 2011年第4期649-653,822,共6页
卫星信标电离层层析成像(CIT)是一种高度不适定性问题,有限视角、稀疏布站等原因造成电离层CIT数据采集严重不完整,CIT结果精度不高,尤其是垂直误差可达50km以上。为了解决CIT结果精度不高的问题,提出一种融合地面垂测、斜测数据、顶部... 卫星信标电离层层析成像(CIT)是一种高度不适定性问题,有限视角、稀疏布站等原因造成电离层CIT数据采集严重不完整,CIT结果精度不高,尤其是垂直误差可达50km以上。为了解决CIT结果精度不高的问题,提出一种融合地面垂测、斜测数据、顶部探测仪数据和三频卫星信标数据的多数据源电离层联合CIT方法。该方法采用建立在实测数据基础上的迭代初值,与实际偏离较小,能够提高CIT反演结果的精度;同时地基设备和顶部探测设备有较高的垂直分辨率,与卫星信标结合能够有效解决有限视角问题,提高CIT结果的垂直分辨率。 展开更多
关键词 CIT成像 多数据源融合 三频信标 TEC
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预制打入桩断桩的检测及其处理 被引量:2
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作者 赵海生 柳锋波 +1 位作者 何剑 雒焕常 《水力发电》 北大核心 2003年第1期43-46,共4页
结合某电站排洪沟挡潮闸的预制打入桩工程桩的检测实例 ,对于预制打入桩进行了低应变、高应变试验和静载试验 ,三种检测方法的检测结果能够相互验证 ,结果一致。并利用高应变测试设备对断桩进行了处理 ,在处理过程中用高应变法实行监测 ... 结合某电站排洪沟挡潮闸的预制打入桩工程桩的检测实例 ,对于预制打入桩进行了低应变、高应变试验和静载试验 ,三种检测方法的检测结果能够相互验证 ,结果一致。并利用高应变测试设备对断桩进行了处理 ,在处理过程中用高应变法实行监测 ,可有效地避免盲目锤击 ,确保达到预期的处理目标 ,取得了较好的效果。 展开更多
关键词 预制打入桩 检测 断桩 监测
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基桩浅部缺陷位置及程度的振动理论分析方法 被引量:5
12
作者 赵海生 《土木工程学报》 EI CSCD 北大核心 2005年第6期83-88,共6页
浅部缺陷桩特别是浅部严重缺陷桩在低应变测试时主要表现为振动而非通常情况下所分析的波动,致使通常的评判缺陷深度及程度的准则不再适用。本文采用振动理论,将浅部缺陷以上桩段假设为刚体,缺陷处的桩身假设为弹簧,通过对浅部缺陷桩的... 浅部缺陷桩特别是浅部严重缺陷桩在低应变测试时主要表现为振动而非通常情况下所分析的波动,致使通常的评判缺陷深度及程度的准则不再适用。本文采用振动理论,将浅部缺陷以上桩段假设为刚体,缺陷处的桩身假设为弹簧,通过对浅部缺陷桩的纵向振动分析,提出了一种利用频谱分析技术分析浅部缺陷位置和程度的方法,检测实例验证了该方法的正确性。 展开更多
关键词 浅部缺陷 缺陷位置 缺陷程度 刚体 纵向振动 刚度
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细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及体外表达(英文) 被引量:2
13
作者 赵海生 王一 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第5期979-983,共5页
目的: 构建表达人类晶状体来源的上皮生长因子 p52(LEDGFp52)重组腺病毒载体,检测 LEDGFp52 重组腺病毒能否在真核细胞中有效表达目的基因。方法: 将 LEDGFp52 基因片段亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack- CMV上构建腺病毒穿梭载体 pAdTra... 目的: 构建表达人类晶状体来源的上皮生长因子 p52(LEDGFp52)重组腺病毒载体,检测 LEDGFp52 重组腺病毒能否在真核细胞中有效表达目的基因。方法: 将 LEDGFp52 基因片段亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack- CMV上构建腺病毒穿梭载体 pAdTrack- CMV-LEDGFp52,将腺病毒穿梭载体 pAdTrack- CMV- LEDGFp52 与5 型腺病毒骨架质粒 pAdeasy- 1 共转染 BJ5183 细菌, 经细菌内同源重组产生携带 LEDGFp52 基因的重组腺病毒载体 pAd- LEDGFp52, 将 pAd- LEDGFp52 经脂质体法转化293 细胞包装产生重组腺病毒 Ad- LEDGFp52, 将 Ad-LEDGFp52 体外转染 293 细胞, CPE 法及 westernblot 观察目的基因的表达。结果: 构建了表达 LEDGFp52 基因的重组腺病毒质粒, E.coli 内成功同源重组腺病毒, 在 293 细胞内包装产生重组腺病毒 Ad- LEDGFp52, 滴度可达 5×1012 pfu/L。在真核细胞中有效表达目的基因 LEDGFp52, 出现显著的 CPE 效应。结论: 成功构建表达 LEDGFp52 的重组腺病毒载体, 为进一步进行 LEDGF p52 基因功能的研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 LEDGFp52基因 腺病毒载体 体外表达
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rhLEDGF p52基因原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化 被引量:2
14
作者 赵海生 王一 《眼科新进展》 CAS 2007年第1期25-29,共5页
目的构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,获得rhLEDGFp52蛋白。方法利用基因重组技术将rhLEDGFp52基因构建于原核表达载体pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经免疫蛋白印迹试验... 目的构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,获得rhLEDGFp52蛋白。方法利用基因重组技术将rhLEDGFp52基因构建于原核表达载体pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,经免疫蛋白印迹试验对rhLEDGFp52进行鉴定并用Ni-NTAHis.Bind.Resin方法进行纯化。结果成功构建rhLEDGFp52基因原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得可溶性形式表达,rhLEDGFp52蛋白表达量占菌体蛋白总量的34.63%.WesternBlot结果显示rhLEDGF2蛋白能够特异性与LEDGF-ab结合。Ni-NTAHis.Bind.Resin方法进行纯化后的rhLEDGFp52,最终质量浓度达520mg·L-1,分析其纯度达87.93%.结论成功获得rhLEDGFp52蛋白,这为深入研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 晶状体上皮 p52基因 表达 蛋白纯化
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细菌内同源重组法构建LEDGFp52基因腺病毒载体及其体外表达 被引量:1
15
作者 赵海生 王一 《眼科新进展》 CAS 2006年第12期900-903,共4页
目的构建表达人类晶状体来源的上皮生长因子p52(lens epithelium derivedgrowthfactor p52,LEDGFp52)重组腺病毒载体,检测LEDGFp52重组腺病毒能否在真核细胞中有效表达目的基因。方法将LEDGFp52基因片段亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-... 目的构建表达人类晶状体来源的上皮生长因子p52(lens epithelium derivedgrowthfactor p52,LEDGFp52)重组腺病毒载体,检测LEDGFp52重组腺病毒能否在真核细胞中有效表达目的基因。方法将LEDGFp52基因片段亚克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上构建腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-LEDGFp52,将腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-LEDGFp52与5型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染BJ5183细菌,经细菌内同源重组产生携带LEDGFp52基因的重组腺病毒载体pAd-LEDGFp52,将pAd-LEDGFp52经脂质体法转化293细胞包装产生重组腺病毒Ad-LEDGFp52,将Ad-LEDGFp52体外转染293细胞,CPE法及Westernblot观察目的基因的表达。结果构建了表达LEDGFp52基因的重组腺病毒质粒,E.coli内成功同源重组腺病毒,在293细胞内包装产生重组腺病毒Ad-LEDGFp52,滴度可达5×1012PFU·L-1。在真核细胞中有效表达目的基因LEDGFp52,出现显著的CPE效应。结论成功构建表达LEDGFp52的重组腺病毒载体,为进一步进行LEDGF p52基因功能的研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 LEDGFp52基因 腺病毒载体 体外表达
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在轨发动机射流的电离层效应
16
作者 赵海生 许正文 +5 位作者 徐朝辉 袁仕耿 刘胜利 吴健 徐彬 薛昆 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期746-756,共11页
卫星等航天器在轨运行期间,通过喷气实现姿态控制、轨道调整等特定需求.喷气射流与电离层相互作用,能够引起电离层环境改变,对星载设备产生重要影响.通过研究航天器在轨发动机喷气射流在电离层中的动力学及化学反应过程,建立射流的电离... 卫星等航天器在轨运行期间,通过喷气实现姿态控制、轨道调整等特定需求.喷气射流与电离层相互作用,能够引起电离层环境改变,对星载设备产生重要影响.通过研究航天器在轨发动机喷气射流在电离层中的动力学及化学反应过程,建立射流的电离层效应物理模型,模拟了不同射流量及高度条件下喷气射流的运动过程、密度分布及电离层扰动效应.仿真结果表明,相同高度下,随着射流量增加,电离层扰动效应逐渐增强;相同射流量条件下,随着高度增加,电离层扰动效应逐渐减弱,扰动区域逐渐扩大. 展开更多
关键词 电离层 航天器 喷气 效应
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低仰角射线对电离层CT成像的影响分析
17
作者 赵海生 许正文 吴健 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期44-50,共7页
电离层层析成像(Computerized Tomography,CT)是一个有限视角问题,水平射线的缺失造成CT结果垂直分辨率的严重下降.很多人直观地认为低仰角射线可以弥补水平射线的缺失,然而本文的理论分析和数值模拟研究结果表明,低仰角射线对CT结果的... 电离层层析成像(Computerized Tomography,CT)是一个有限视角问题,水平射线的缺失造成CT结果垂直分辨率的严重下降.很多人直观地认为低仰角射线可以弥补水平射线的缺失,然而本文的理论分析和数值模拟研究结果表明,低仰角射线对CT结果的影响十分微小,其无法弥补水平射线缺失所带来的垂直分辨率的下降.模拟结果显示,增加低仰角射线前后CT反演结果几乎没有变化;而去掉680条低仰角射线和高仰角射线后,CT反演结果差别巨大;去掉680条低仰角射线的CT结果与模型吻合很好;去掉680条高仰角射线的CT反演结果失真严重,几乎无法恢复模型的扰动特征. 展开更多
关键词 电离层层析成像(CT) 低仰角射线 有限视角层析 水平射线 垂直分辨率
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LEDGFp52-siRNA真核表达载体的构建和鉴定(英文)
18
作者 赵海生 王一 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第5期975-978,共4页
目的: 构建 LEDGFp52 基因 RNA 干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法: 以 LEDGFp52 为靶基因, 以 pGenSil-l 质粒为载体, 设计构建重组体, 根据 GenBank 数据库提供的LEDGFp52 基因核苷酸序列, 按照 Tuschl 设计原则, 选择设计两条带发... 目的: 构建 LEDGFp52 基因 RNA 干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法: 以 LEDGFp52 为靶基因, 以 pGenSil-l 质粒为载体, 设计构建重组体, 根据 GenBank 数据库提供的LEDGFp52 基因核苷酸序列, 按照 Tuschl 设计原则, 选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列, 克隆到空载体pGenSil-l 中, 转化 DH5α菌株, 提取质粒, 进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。结果: 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致, 重组载体构建成功,重组质粒转染 HeLa 细胞48h, Western blotting 检测到 LEDGFp52 蛋白表达的改变。结论: 利用 RNAi 技术可成功构建抑制 LEDGFp52 表达的小干扰 RNA 重组体。 展开更多
关键词 LEDGFp52 RNA干扰 真核表达载体 构建 鉴定
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rhLEDGF p52基因原核表达载体的构建、诱导表达及蛋白纯化(英文)
19
作者 赵海生 王一 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第4期751-754,共4页
目的 :构建 rhLEDGF p52 基因原核表达载体 , 获得rhLEDGF p52 蛋白。方法:利用基因重组技术将 rhLEDGF p52 基因构建于原核表达载体 pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过 IPTG 诱导在大肠杆菌 BL21(DE3)中获得表达,... 目的 :构建 rhLEDGF p52 基因原核表达载体 , 获得rhLEDGF p52 蛋白。方法:利用基因重组技术将 rhLEDGF p52 基因构建于原核表达载体 pET30a(+)中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过 IPTG 诱导在大肠杆菌 BL21(DE3)中获得表达,经免疫蛋白印迹试验对 rhLEDGF p52 进行鉴定并用 Ni-NTA His.Bind.Resin 方法进行纯化。结果:成功构建 rhLEDGF p52 基因原核表达载体,在大肠杆菌 BL21(DE3)中获得可溶性形式表达,rhLEDGF p52蛋白表达量占菌体蛋白总量的 34.63%。Western Blot 结果显示 rhLEDGF2 蛋白能够特异性与 LEDGF-ab 结合。Ni-NTA His.Bind.Resin 方法进行纯化后的 rhLEDGF p52,终浓度达 520mg/L,分析其纯度达 87.93%。结论:获得 rhLEDGF p52 蛋白,这为深入研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 人类晶状体上皮来源的生长因子p52 基因表达 大肠杆菌 蛋白纯化
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siRNA-LEDGFp52真核表达载体的构建和鉴定
20
作者 赵海生 王一 《眼科新进展》 CAS 2007年第3期184-187,共4页
目的构建晶状体来源的上皮生长因子p52(lens epithelium derived growth factor p52,LEDGFp52)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)的真核细胞表达载体。方法以LEDGFp52为靶基因,以pGensil-1质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据... 目的构建晶状体来源的上皮生长因子p52(lens epithelium derived growth factor p52,LEDGFp52)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)的真核细胞表达载体。方法以LEDGFp52为靶基因,以pGensil-1质粒为载体,设计构建重组体,根据GenBank数据库提供的LEDGFp52基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计2条带发夹结构的核苷酸序列,克隆到空载体pGensil-1中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。结果经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,重组质粒转染HeLa细胞48h,Western blotting检测到LEDGFp52蛋白表达的改变。结论利用RNAi技术可成功构建抑制LEDGFp52表达的小干扰RNA重组体。 展开更多
关键词 晶状体来源的上皮生长因子p52 RNA干扰 真核表达载体 构建 鉴定
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