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石蒜属植物种间杂交种染色体制片体系优化和细胞遗传学分析
1
作者
赵梦婧
殷素雅
高燕会
《浙江农林大学学报》
北大核心
2025年第3期581-591,共11页
【目的】从细胞遗传学角度分析石蒜属Lycoris种间杂交种的染色体核型特征,探究杂交种亲本染色体分配,进一步创建和选育石蒜属优新品种。【方法】利用常规染色体制片和荧光原位杂交技术,对石蒜属种间杂交种和亲本染色体数目、核型公式及...
【目的】从细胞遗传学角度分析石蒜属Lycoris种间杂交种的染色体核型特征,探究杂交种亲本染色体分配,进一步创建和选育石蒜属优新品种。【方法】利用常规染色体制片和荧光原位杂交技术,对石蒜属种间杂交种和亲本染色体数目、核型公式及核型类型等进行分析。【结果】(1)最佳染色体制片体系:8:00—9:00取石蒜属植物根尖,0.002mol·L^(-1)的8-羟基喹啉预处理2.5 h,卡诺氏固定液固定,质量分数为5.0%的纤维素酶和0.3%的离析酶混合酶液于37℃酶解1.5 h,采用火焰干燥法制备染色体制片。(2)石蒜L.radiata和换锦花L.sprengeri杂交种染色体核型公式为2n=22=22A和2n=22=2sm+20A,以长筒石蒜L.Longituba为亲本的杂交种染色体核型公式为2n=2x=18=4m+14A,杂交种染色体核型以4A和3B为主,介于亲本石蒜、换锦花和长筒石蒜之间。(3)荧光原位杂交发现:石蒜和换锦花染色体上分别有2和3个45S rDNA杂交信号,其中3号染色体上均能发现45S rDNA杂交信号,供试杂交种45S rDNA信号数目各不相同,信号多位于染色体末端。【结论】本研究优化了石蒜属植物染色体制片和荧光原位杂交体系,并应用于石蒜属杂交种的鉴定和亲本染色体的分配,可为石蒜属植物新种质创制和新品种选育提供理论依据。
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关键词
石蒜属植物
种间杂交种
细胞学
核型分析
荧光原位杂交
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职称材料
换锦花类黄酮糖基转移酶基因LsUFGT1及其启动子克隆与表达
2
作者
殷素雅
周洋丽
+1 位作者
赵梦婧
高燕会
《浙江农林大学学报》
北大核心
2025年第4期714-724,共11页
【目的】花色苷是决定植物花色的重要成分,类黄酮糖基转移酶(UFGT)在花色苷生物合成途径下游发挥作用,将不稳定的花色素转变为稳定的花色苷。通过分析换锦花Lycoris sprengeri LsUFGT1基因功能,为进一步解析换锦花花瓣呈色的机制提供理...
【目的】花色苷是决定植物花色的重要成分,类黄酮糖基转移酶(UFGT)在花色苷生物合成途径下游发挥作用,将不稳定的花色素转变为稳定的花色苷。通过分析换锦花Lycoris sprengeri LsUFGT1基因功能,为进一步解析换锦花花瓣呈色的机制提供理论基础。【方法】采用基因克隆、逆转录PCR、染色体步移法、组织化学染色和双荧光素酶报告实验等多种分子生物学技术,研究LsUFGT1基因和其启动子序列的功能。【结果】①获得长1632 bp的LsUFGT1基因cDNA序列,开放阅读框长1398 bp,编码465个氨基酸;LsUFGT1与水仙Narcissus natatorium NtUFGT1同源性最高,达60.57%。②LsUFGT1表达量与总花色苷含量的变化趋势一致,在小花苞时期表达量最高,在粉瓣和蓝瓣中表达量差异不显著。③获得的LsUFGT1启动子序列长1184 bp,含MYB结合位点、光响应、激素响应及逆境胁迫响应等顺式作用元件,拟南芥Arabidopsis thalianaβ-葡萄糖苷酶(GUS)染色结果表明LsUFGT1启动子区域具有启动子活性。④双荧光素酶报告实验发现LsMYB4和LsMYB5能够显著抑制LsUFGT1启动子活性(P<0.05)。【结论】LsMYB4和LsMYB5直接结合LsUFGT1启动子反向调控换锦花花色苷的积累。
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关键词
换锦花
类黄酮糖基转移酶(UFGT)
花色苷
功能分析
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职称材料
换锦花LsMYB7基因克隆与功能研究
被引量：
2
3
作者
郑正权
赵梦婧
高燕会
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期586-596,共11页
【目的】研究转录因子LsMYB7基因对换锦花Lycoris sprengeri花色苷积累的调控作用。【方法】采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法从换锦花花瓣中克隆获得花色苷形成相关R2R3-MYB转录因子LsMYB7基因,并进行生物信息学分析,再通过病毒介导...
【目的】研究转录因子LsMYB7基因对换锦花Lycoris sprengeri花色苷积累的调控作用。【方法】采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法从换锦花花瓣中克隆获得花色苷形成相关R2R3-MYB转录因子LsMYB7基因,并进行生物信息学分析,再通过病毒介导的基因沉默(VIGS)技术研究LsMYB7基因对花色苷积累的调控作用。【结果】克隆到1条长951 bp的LsMYB7基因cDNA序列,开放阅读框(ORF)为825 bp,编码274个氨基酸,LsMYB7蛋白含有2个R2和R3结构域,属R2R3-MYB转录因子家族;系统进化分析表明LsMYB7与拟南芥Arabidopsis thaliana S22亚族基因聚为一类;LsMYB7亚细胞定位于细胞核,在不同花发育阶段和不同花色无性系中,LsMYB7基因表达与花色苷合成相关基因的表达趋势一致,主要在败花期和花色苷含量较高的H1无性系中表达;LsMYB7基因沉默后,换锦花花瓣明显变短,颜色变深,且LsCHS、LsF3'H、LsANS、LsUFGT1和LsUFGT2等花色苷形成相关基因的表达显著下调。【结论】LsMYB7属R2R3-MYB转录因子家族S22亚族,通过正向调控LsCHS、LsF3'H、LsANS、LsUFGT1和LsUFGT2花色苷生物合成相关基因的表达促进花色苷积累。
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关键词
换锦花
R2R3-MYB转录因子
花色苷积累
病毒介导的基因沉默
调控作用
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职称材料
题名
石蒜属植物种间杂交种染色体制片体系优化和细胞遗传学分析
1
作者
赵梦婧
殷素雅
高燕会
机构
浙江农林大学林业与生物技术学院
出处
《浙江农林大学学报》
北大核心
2025年第3期581-591,共11页
基金
浙江省“十四五”农业新品种选育重大科技专项(2021C02071-6)。
文摘
【目的】从细胞遗传学角度分析石蒜属Lycoris种间杂交种的染色体核型特征,探究杂交种亲本染色体分配,进一步创建和选育石蒜属优新品种。【方法】利用常规染色体制片和荧光原位杂交技术,对石蒜属种间杂交种和亲本染色体数目、核型公式及核型类型等进行分析。【结果】(1)最佳染色体制片体系:8:00—9:00取石蒜属植物根尖,0.002mol·L^(-1)的8-羟基喹啉预处理2.5 h,卡诺氏固定液固定,质量分数为5.0%的纤维素酶和0.3%的离析酶混合酶液于37℃酶解1.5 h,采用火焰干燥法制备染色体制片。(2)石蒜L.radiata和换锦花L.sprengeri杂交种染色体核型公式为2n=22=22A和2n=22=2sm+20A,以长筒石蒜L.Longituba为亲本的杂交种染色体核型公式为2n=2x=18=4m+14A,杂交种染色体核型以4A和3B为主,介于亲本石蒜、换锦花和长筒石蒜之间。(3)荧光原位杂交发现:石蒜和换锦花染色体上分别有2和3个45S rDNA杂交信号,其中3号染色体上均能发现45S rDNA杂交信号,供试杂交种45S rDNA信号数目各不相同,信号多位于染色体末端。【结论】本研究优化了石蒜属植物染色体制片和荧光原位杂交体系,并应用于石蒜属杂交种的鉴定和亲本染色体的分配,可为石蒜属植物新种质创制和新品种选育提供理论依据。
关键词
石蒜属植物
种间杂交种
细胞学
核型分析
荧光原位杂交
Keywords
Lycoris
interspecific hybrid
cytology
karyotype analysis
fluorescence in situ hybridization(FISH)
分类号
S682.2 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
换锦花类黄酮糖基转移酶基因LsUFGT1及其启动子克隆与表达
2
作者
殷素雅
周洋丽
赵梦婧
高燕会
机构
浙江农林大学林业与生物技术学院
出处
《浙江农林大学学报》
北大核心
2025年第4期714-724,共11页
基金
浙江省自然科学基金资助项目(LZ22C160003)。
文摘
【目的】花色苷是决定植物花色的重要成分,类黄酮糖基转移酶(UFGT)在花色苷生物合成途径下游发挥作用,将不稳定的花色素转变为稳定的花色苷。通过分析换锦花Lycoris sprengeri LsUFGT1基因功能,为进一步解析换锦花花瓣呈色的机制提供理论基础。【方法】采用基因克隆、逆转录PCR、染色体步移法、组织化学染色和双荧光素酶报告实验等多种分子生物学技术,研究LsUFGT1基因和其启动子序列的功能。【结果】①获得长1632 bp的LsUFGT1基因cDNA序列,开放阅读框长1398 bp,编码465个氨基酸;LsUFGT1与水仙Narcissus natatorium NtUFGT1同源性最高,达60.57%。②LsUFGT1表达量与总花色苷含量的变化趋势一致,在小花苞时期表达量最高,在粉瓣和蓝瓣中表达量差异不显著。③获得的LsUFGT1启动子序列长1184 bp,含MYB结合位点、光响应、激素响应及逆境胁迫响应等顺式作用元件,拟南芥Arabidopsis thalianaβ-葡萄糖苷酶(GUS)染色结果表明LsUFGT1启动子区域具有启动子活性。④双荧光素酶报告实验发现LsMYB4和LsMYB5能够显著抑制LsUFGT1启动子活性(P<0.05)。【结论】LsMYB4和LsMYB5直接结合LsUFGT1启动子反向调控换锦花花色苷的积累。
关键词
换锦花
类黄酮糖基转移酶(UFGT)
花色苷
功能分析
Keywords
Lycoris sprengeri
flavonoid-3-O-glucosyltransferase(UFGT)
anthocyanin
functional analysis
分类号
S603 [农业科学—园艺学]
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职称材料
题名
换锦花LsMYB7基因克隆与功能研究
被引量：
2
3
作者
郑正权
赵梦婧
高燕会
机构
浙江农林大学林业与生物技术学院/亚热带森林培育国家重点实验室
出处
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期586-596,共11页
基金
浙江省自然科学基金重点项目(LZ22C160003)
浙江省农业(花卉新品种选育)新品种选育重大科技专项(2021C02071-6)。
文摘
【目的】研究转录因子LsMYB7基因对换锦花Lycoris sprengeri花色苷积累的调控作用。【方法】采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法从换锦花花瓣中克隆获得花色苷形成相关R2R3-MYB转录因子LsMYB7基因,并进行生物信息学分析,再通过病毒介导的基因沉默(VIGS)技术研究LsMYB7基因对花色苷积累的调控作用。【结果】克隆到1条长951 bp的LsMYB7基因cDNA序列,开放阅读框(ORF)为825 bp,编码274个氨基酸,LsMYB7蛋白含有2个R2和R3结构域,属R2R3-MYB转录因子家族;系统进化分析表明LsMYB7与拟南芥Arabidopsis thaliana S22亚族基因聚为一类;LsMYB7亚细胞定位于细胞核,在不同花发育阶段和不同花色无性系中,LsMYB7基因表达与花色苷合成相关基因的表达趋势一致,主要在败花期和花色苷含量较高的H1无性系中表达;LsMYB7基因沉默后,换锦花花瓣明显变短,颜色变深,且LsCHS、LsF3'H、LsANS、LsUFGT1和LsUFGT2等花色苷形成相关基因的表达显著下调。【结论】LsMYB7属R2R3-MYB转录因子家族S22亚族,通过正向调控LsCHS、LsF3'H、LsANS、LsUFGT1和LsUFGT2花色苷生物合成相关基因的表达促进花色苷积累。
关键词
换锦花
R2R3-MYB转录因子
花色苷积累
病毒介导的基因沉默
调控作用
Keywords
Lycoris sprengeri
R2R3-MYB transcription factor
anthocyanin accumulation
virus-induced gene silencing(VIGS)
regulation function
分类号
S603 [农业科学—园艺学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
石蒜属植物种间杂交种染色体制片体系优化和细胞遗传学分析
赵梦婧
殷素雅
高燕会
《浙江农林大学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
换锦花类黄酮糖基转移酶基因LsUFGT1及其启动子克隆与表达
殷素雅
周洋丽
赵梦婧
高燕会
《浙江农林大学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
换锦花LsMYB7基因克隆与功能研究
郑正权
赵梦婧
高燕会
《浙江农林大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
2
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