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肿瘤相关巨噬细胞及其分泌的CXCL1对肝癌细胞系Huh7生物学行为的影响
被引量：
5
1
作者
赵慧咏
魏昇
+3 位作者
杨茗皓
郭子成
刘永凡
崔笑
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第3期398-404,共7页
目的探索巨噬细胞在肝癌炎症微环境中通过炎症趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL1)调控肝癌细胞系Huh7进展。方法筛选肿瘤临床数据库TISIDB,分析CXCL1与肝癌患者预后的关系。免疫组化、免疫荧光染色验证肿瘤巨噬细胞与CXCL1的关系。通过佛...
目的探索巨噬细胞在肝癌炎症微环境中通过炎症趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL1)调控肝癌细胞系Huh7进展。方法筛选肿瘤临床数据库TISIDB,分析CXCL1与肝癌患者预后的关系。免疫组化、免疫荧光染色验证肿瘤巨噬细胞与CXCL1的关系。通过佛波酯(PMA)诱导人单核细胞(THP-1)获得未分化的巨噬细胞(M0),建立与肝癌细胞共培养模型,实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞表型的改变;细胞克隆形成实验、台盼蓝细胞活率检测肝癌细胞的增殖能力;肝癌细胞的迁移及侵袭能力使用Transwell实验检测;肝癌细胞Huh7中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达水平使用蛋白印迹法检测;酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测细胞培养液中目标蛋白的表达。结果CXCL1高表达与肝癌患者不良预后有关,并且高表达CXCL1的肝癌组织具有更多的巨噬细胞富集。在巨噬细胞-肝癌细胞共培养模型中,两种细胞CXCL1的表达水平及共培养液中CXCL1浓度均增加。巨噬细胞M2型标志物CD163、CD206 mRNA表达水平升高。肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及侵袭能力增强。结论巨噬细胞-肝癌细胞共培养增加肿瘤相关巨噬细胞CXCL1表达,促进肝癌细胞系Huh7进展。
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关键词
肝癌
肿瘤相关巨噬细胞
肿瘤微环境
CXCL1
上皮细胞-间充质转化
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职称材料
microRNA-200a抑制肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果的研究
2
作者
魏昇
周大臣
+4 位作者
方超
杨茗皓
赵慧咏
庞小溪
崔笑
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2021年第12期1860-1865,共6页
目的研究microRNA-200a(miR200a)影响肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果。方法构建人肝癌细胞miR200a稳转细胞株:miR200a过表达、对照组(Control)、miR200a敲低。采用qRT-PCR法检测各转染细胞株miRNA表达量,MTT的方法检测细胞活力,W...
目的研究microRNA-200a(miR200a)影响肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果。方法构建人肝癌细胞miR200a稳转细胞株:miR200a过表达、对照组(Control)、miR200a敲低。采用qRT-PCR法检测各转染细胞株miRNA表达量,MTT的方法检测细胞活力,Western blot分析各目标蛋白表达量;Transwell法检测肝癌细胞迁移、侵袭能力。转染细胞株添加索拉非尼,复测MTT及Western blot,验证miR200a调控索拉非尼对细胞的作用和相应蛋白表达量变化,SPF级BALB/c-nu雄鼠18只,随机分为3组,每组6只。每组皮下种植miR200a过表达、Control、miR200a敲低细胞,待成瘤后每组裸鼠每天注射索拉非尼,连续14 d,处死裸鼠,取出瘤体,计算肿瘤体积,免疫组化验证瘤体目标蛋白表达及定位。结果上调miR200a不仅可以抑制人肝癌细胞的细胞活力及迁移侵袭能力,还可以降低SIRT1的表达。并且上调miR200a明显减小裸鼠的肿瘤体积。结论上调miR200a可以负性调控人肝癌细胞的增殖和迁移能力,并增加索拉非尼的药物疗效,这种作用可能是通过调控SIRT1表达来完成。
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关键词
miR200a
肝细胞癌
索拉非尼
SIRT1
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职称材料
题名
肿瘤相关巨噬细胞及其分泌的CXCL1对肝癌细胞系Huh7生物学行为的影响
被引量：
5
1
作者
赵慧咏
魏昇
杨茗皓
郭子成
刘永凡
崔笑
机构
安徽医科大学第二附属医院普外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第3期398-404,共7页
基金
安徽高等学校自然科学研究项目(编号:KJ2017A825)
安徽省自然科学基金项目(编号:1808085MH270、2008085QH406)。
文摘
目的探索巨噬细胞在肝癌炎症微环境中通过炎症趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL1)调控肝癌细胞系Huh7进展。方法筛选肿瘤临床数据库TISIDB,分析CXCL1与肝癌患者预后的关系。免疫组化、免疫荧光染色验证肿瘤巨噬细胞与CXCL1的关系。通过佛波酯(PMA)诱导人单核细胞(THP-1)获得未分化的巨噬细胞(M0),建立与肝癌细胞共培养模型,实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞表型的改变;细胞克隆形成实验、台盼蓝细胞活率检测肝癌细胞的增殖能力;肝癌细胞的迁移及侵袭能力使用Transwell实验检测;肝癌细胞Huh7中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达水平使用蛋白印迹法检测;酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测细胞培养液中目标蛋白的表达。结果CXCL1高表达与肝癌患者不良预后有关,并且高表达CXCL1的肝癌组织具有更多的巨噬细胞富集。在巨噬细胞-肝癌细胞共培养模型中,两种细胞CXCL1的表达水平及共培养液中CXCL1浓度均增加。巨噬细胞M2型标志物CD163、CD206 mRNA表达水平升高。肝癌细胞Huh7的增殖、迁移及侵袭能力增强。结论巨噬细胞-肝癌细胞共培养增加肿瘤相关巨噬细胞CXCL1表达,促进肝癌细胞系Huh7进展。
关键词
肝癌
肿瘤相关巨噬细胞
肿瘤微环境
CXCL1
上皮细胞-间充质转化
Keywords
hepatocellular carcinoma
tumor-associated macrophages
tumor microenvironment
CXCL1
epithelial-mesenchymal transition
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
microRNA-200a抑制肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果的研究
2
作者
魏昇
周大臣
方超
杨茗皓
赵慧咏
庞小溪
崔笑
机构
安徽医科大学第二附属医院普外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2021年第12期1860-1865,共6页
基金
安徽高校自然科学研究项目(编号:KJ2017A825)
安徽省自然科学基金(编号:1808085MH270、2008085QH406)。
文摘
目的研究microRNA-200a(miR200a)影响肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果。方法构建人肝癌细胞miR200a稳转细胞株:miR200a过表达、对照组(Control)、miR200a敲低。采用qRT-PCR法检测各转染细胞株miRNA表达量,MTT的方法检测细胞活力,Western blot分析各目标蛋白表达量;Transwell法检测肝癌细胞迁移、侵袭能力。转染细胞株添加索拉非尼,复测MTT及Western blot,验证miR200a调控索拉非尼对细胞的作用和相应蛋白表达量变化,SPF级BALB/c-nu雄鼠18只,随机分为3组,每组6只。每组皮下种植miR200a过表达、Control、miR200a敲低细胞,待成瘤后每组裸鼠每天注射索拉非尼,连续14 d,处死裸鼠,取出瘤体,计算肿瘤体积,免疫组化验证瘤体目标蛋白表达及定位。结果上调miR200a不仅可以抑制人肝癌细胞的细胞活力及迁移侵袭能力,还可以降低SIRT1的表达。并且上调miR200a明显减小裸鼠的肿瘤体积。结论上调miR200a可以负性调控人肝癌细胞的增殖和迁移能力,并增加索拉非尼的药物疗效,这种作用可能是通过调控SIRT1表达来完成。
关键词
miR200a
肝细胞癌
索拉非尼
SIRT1
Keywords
miR200a
hepatocellular carcinoma
sorafenib
SIRT1
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肿瘤相关巨噬细胞及其分泌的CXCL1对肝癌细胞系Huh7生物学行为的影响
赵慧咏
魏昇
杨茗皓
郭子成
刘永凡
崔笑
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023
5
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职称材料
2
microRNA-200a抑制肝细胞癌的进展及调控索拉非尼治疗效果的研究
魏昇
周大臣
方超
杨茗皓
赵慧咏
庞小溪
崔笑
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2021
0
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