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布鲁氏菌疫苗的研究现状 被引量:5
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作者 付莹莹 秦贵信 +6 位作者 钱军 赵思言 郑关雨 孙玉成 万家余 刘文森 刘林娜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期258-261,共4页
布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病,该病不仅严重影响畜牧业的健康发展,对人类健康和社会公共卫生安全也存在着很大的威胁。现阶段对动物的主要防制措施为接种疫苗,国内外现已存在多个弱毒活疫苗,每种疫苗均各有利弊,目... 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病,该病不仅严重影响畜牧业的健康发展,对人类健康和社会公共卫生安全也存在着很大的威胁。现阶段对动物的主要防制措施为接种疫苗,国内外现已存在多个弱毒活疫苗,每种疫苗均各有利弊,目前尚无适合人类使用的疫苗,各个实验室也通过基因工程等技术手段来积极研制重组弱毒疫苗、分子标记疫苗、DNA疫苗等新型疫苗,作者现就新型疫苗的研究现状作一综述。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 布鲁氏菌 新型疫苗
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不同处理方法对细菌气溶胶样本基因组DNA回收率的影响 被引量:1
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作者 张毅 王中一 +7 位作者 赵思言 付莹莹 刘丽娜 郭振东 赵宗正 周博 刘林娜 钱军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期827-830,共4页
为分析不同处理方法对空气中细菌气溶胶样本基因组回收率的影响,本研究利用玻璃纤维滤膜采集空气样品中的微生物气溶胶后,针对采样膜的不同处理(钢珠敲打、研磨、MOBIO PowerWater试剂盒)进行DNA提取方法比较,结果表明利用MOBIO PowerWa... 为分析不同处理方法对空气中细菌气溶胶样本基因组回收率的影响,本研究利用玻璃纤维滤膜采集空气样品中的微生物气溶胶后,针对采样膜的不同处理(钢珠敲打、研磨、MOBIO PowerWater试剂盒)进行DNA提取方法比较,结果表明利用MOBIO PowerWater DNA Isolation Kit对采样膜进行基因组DNA的提取能获得高纯度的DNA(OD_(260nm)/OD_(280nm)=1.82);利用荧光定量PCR技术对所回收基因组进行定量分析,验证该处理方法的样品DNA得率最高,达到15.81%。起始模板浓度的对数与对应的CT值成反比且具有极强的线性关系,其线性相关系数R^2为0.9985。本研究将对养殖场等环境空气中病原体气溶胶样本处理具有重要指导意义。 展开更多
关键词 空气微生物 样本处理 qPCR
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重组蓖麻毒素A链表达及其与天然蓖麻毒素毒性比较研究 被引量:1
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作者 曲英龙 钱爱东 +9 位作者 钱军 计越 郑关雨 郭振东 赵思言 付莹莹 张毅 赵红艳 陈龙 刘林娜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期950-957,共8页
本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链(r-RTA)并与天然蓖麻毒素(n-RT)进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段,并将其克隆于pET-28a载体后,利用大肠杆菌进行原核表达,镍柱亲和层析纯化上清,500mmol/L咪唑溶液洗脱获... 本试验旨在制备有高生物活性的重组蓖麻毒素A链(r-RTA)并与天然蓖麻毒素(n-RT)进行毒性比较。根据NCBI公布的RTA序列合成基因片段,并将其克隆于pET-28a载体后,利用大肠杆菌进行原核表达,镍柱亲和层析纯化上清,500mmol/L咪唑溶液洗脱获得可溶性r-RTA蛋白,通过SDS-PAGE及Western blotting对其进行鉴定并用ELISA测定其免疫原性后,对r-RTA与n-RT进行动物和细胞试验毒性比较研究。结果显示,该r-RTA在上清中表达率为31.2%;每升细菌培养物纯化后可得20mg目的蛋白,纯度≥90%,大小为32ku。其免疫原性约为n-RT的1.27倍;通过获取的n-RT细胞半抑制浓度(IC50为0.01μg/mL)及动物半数致死量(LD50为(3.27±0.44)μg/kg),以相同浓度进行细胞感染和动物攻毒试验,结果显示,同等剂量下,在细胞试验中,n-RT毒力是r-RTA的2 700倍;在动物试验中,n-RT组对动物致死率为40%,r-RTA组动物无死亡。结果表明,单独RTA,在没有RTB协助下,具有一定的毒性作用,但毒力将显著降低。该结果将为开发基于RTA的蓖麻毒素疫苗提供重要数据和理论支撑。 展开更多
关键词 蓖麻毒素A链(RTA) 原核表达 天然蓖麻毒素(n-RT) 毒性比较
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基于BP神经网络的血液荧光光谱识别分类研究 被引量:15
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作者 高斌 赵鹏飞 +6 位作者 卢昱欣 范雅 周林华 钱军 刘林娜 赵思言 孔之丰 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第10期3136-3143,共8页
光谱技术在生物和医学检测方面具有积极的应用前景。由于血液成分的复杂性和类同性,有关不同动物血液光谱识别分类的技术研究尚未出现较为完善的结论。基于机器学习理论,以BP神经网络为工具,建立了对不同动物血液荧光光谱进行特征提取... 光谱技术在生物和医学检测方面具有积极的应用前景。由于血液成分的复杂性和类同性,有关不同动物血液光谱识别分类的技术研究尚未出现较为完善的结论。基于机器学习理论,以BP神经网络为工具,建立了对不同动物血液荧光光谱进行特征提取和识别分类的方法。实验采用Cary Eclipse光谱仪分别采集了鸽、鸡、鼠、羊四种动物不同浓度(1%和3%)的全血与红细胞荧光光谱数据(每个类型样本各50组数据);基于移动平滑算法对原始数据进行了平滑处理,以减少实验仪器噪声对特征提取和识别分类的影响;进一步根据血液光谱数据的特性,该文出了"组合放大"的特征提取方法,并建立了BP神经网络分类器进行训练和识别。相比于常用的光谱数据(单一)特征,提出的"组合放大"特征和所设计的BP神经网络能对不同动物、不同类型(全血与红细胞)、不同浓度(1%和3%)的血液荧光光谱实现100%的准确分类,同时神经网络测试误差均远小于设定的允许误差值。研究的动物血液光谱特征提取及识别技术具有较好的普适性和可靠性,在农业、食品检查、以及生物医学检测等方面均可发挥重要作用。 展开更多
关键词 荧光光谱 血液光谱识别 BP神经网络 组合放大法
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支持向量机的动物血液光谱特征提取和识别分类 被引量:6
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作者 卢鹏飞 范雅 +5 位作者 周林华 钱军 刘林娜 赵思言 孔之丰 高斌 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期3828-3832,共5页
利用光谱检测和数据挖掘实现不同种类动物血液光谱数据的精确识别与分类具有重要意义,目前尚未见到较为完善及普适的相关研究报道。实验采集了鸽、鸡、鼠、羊四种动物全血和红细胞溶液(浓度为1%)的荧光光谱数据;基于小波变换的软阈值去... 利用光谱检测和数据挖掘实现不同种类动物血液光谱数据的精确识别与分类具有重要意义,目前尚未见到较为完善及普适的相关研究报道。实验采集了鸽、鸡、鼠、羊四种动物全血和红细胞溶液(浓度为1%)的荧光光谱数据;基于小波变换的软阈值去噪方法,首先对原始光谱数据进行去噪处理,并确定了717个原始特征(包括荧光峰强度值、荧光峰连线斜率等4类特征);提出以"区分度统计量"为核心的特征提取方法,结合主成分分析法和平均影响值算法,实现了对717个原始特征到2个识别特征的高效筛选;进一步建立了径向基核函数的支持向量机分类器,对四类不同动物的全血荧光光谱数据实现了准确率为100%的识别分类,对红细胞荧光光谱数据实现了94.69%~99.12%的识别率;最后蒙特卡洛交叉验证的结果表明所提出的思路和方法对于动物全血溶液的识别分类具有较好的泛化能力,能对荧光光谱数据进行准确的识别分类,因此能够在进出口检查、食品安全、医药等领域发挥重要作用。针对动物血液荧光光谱,提出的基于"区分度统计量"的特征提取方法,相比于传统的人为特征选取方法,能够从大量原始特征中自动提取少量且有效的识别特征,具有较强的普适性和高效性,为其他领域的光谱特征提取和识别分类提供了一种新的思路。 展开更多
关键词 动物血液 荧光光谱 识别分类 特征提取 支持向量机
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