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DEAD盒解旋酶10(DDX10)通过增强黑素瘤缺失基因2(AIM2)蛋白稳定性促进AIM2炎性体激活
被引量：
1
1
作者
赵山美子
林萌
张玉霞
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期289-296,共8页
目的研究DEAD盒解旋酶10(DDX10)对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎性体通路的调控机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2...
目的研究DEAD盒解旋酶10(DDX10)对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎性体通路的调控机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2炎性体通路有调控作用的分子。在DDX10缺失的THP-1细胞系,利用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,用脂多糖(LPS)预处理,再用poly(dA:dT)刺激巨噬细胞激活AIM2炎性体。采用ELISA检测IL-1β的释放,Western blot法检测胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白的切割和DDX10蛋白水平。采用免疫共沉淀法检测DDX10和AIM2的相互作用,利用免疫荧光细胞化学染色法结合共聚焦显微镜技术确定DDX10和AIM2在HEK293T细胞的共定位情况。结果过表达DDX10显著促进AIM2炎性体通路的激活,缺失DDX10显著降低AIM2炎性体通路的激活,DDX10与AIM2的带有200个氨基酸重复序列的造血性干扰素诱导核蛋白(HIN-200)结构域存在相互作用,并增强AIM2的蛋白稳定性。结论DDX10通过提高AIM2的蛋白稳定性促进AIM2炎性体通路的激活。
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关键词
DEAD盒解旋酶10(DDX10)
黑素瘤缺失基因2(AIM2)
炎性体
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职称材料
短链脂肪酸对体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍的保护作用
被引量：
2
2
作者
唐婷
卡迪丽娅·居尔艾特提拜克
+3 位作者
赵山美子
马汝钧
陈莉
姚兵
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2022年第5期465-470,共6页
目的短链脂肪酸(SCFAs)对卵母细胞体外成熟的作用及其可能的机制尚不明确。文中探讨短链脂肪酸对小鼠卵母细胞体外诱导氧化应激后发育成熟的影响及其作用机制。方法收集6~8周龄ICR雌鼠生发泡(GV)期的卵母细胞,分为对照组(不干预)、H_(2)...
目的短链脂肪酸(SCFAs)对卵母细胞体外成熟的作用及其可能的机制尚不明确。文中探讨短链脂肪酸对小鼠卵母细胞体外诱导氧化应激后发育成熟的影响及其作用机制。方法收集6~8周龄ICR雌鼠生发泡(GV)期的卵母细胞,分为对照组(不干预)、H_(2)O_(2)处理组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h)、H_(2)O_(2)+乙酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,1 mmol/L乙酸干预)、H_(2)O_(2)+丙酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,10μmol/L丙酸干预)和H_(2)O_(2)+丁酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,2μmol/L丁酸干预)。并于培养3 h后观察生发泡破裂(GVBD)率,于培养16 h后观察第一极体排出(PBE)率;免疫荧光化学染色法检测体外培养9 h进入第一次减数分裂中期(MI期)和16 h排出第一极体进入第二次减数分裂中期(MII期)的卵母细胞内染色体的排列和纺锤体的形态;Western blot检测不同处理组Pi3k/Akt通路相关蛋白表达量。结果成熟率结果显示,与对照组GVBD率[(86.87±1.76)%]和PBE率[(85.37±1.98)%]相比,H_(2)O_(2)处理组[(66.73±1.25)%、(50.57±4.22)%]明显下降(P<0.05),而与H_(2)O_(2)处理组相比,H_(2)O_(2)+乙酸组[(80.67±2.62)%、(78.07±1.78)%],H_(2)O_(2)+丙酸组[(74.50±2.91)%、68.03±1.84)%]和H_(2)O_(2)+丁酸组[(75.93±2.12)%、(66.40±3.46)%]卵母细胞的成熟率显著改善(P<0.01)。免疫荧光结果显示,在添加了SCFAs的M2培养液中成熟的卵母细胞减数分裂的超微结构较H_(2)O_(2)处理组明显改善,主要体现在染色体排列和纺锤体形态的改变。Western blot结果显示,H_(2)O_(2)处理组卵母细胞中的p-Akt和Akt蛋白表达量的比值较对照组明显增多(P<0.01),而H_(2)O_(2)+乙酸组和H_(2)O_(2)+丙酸组较H_(2)O_(2)处理组明显降低(P<0.01)。结论在体外培养液中添加短链脂肪酸可以改善氧化应激后小鼠卵母细胞的发育潜能,为改善体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍提供新思路。
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关键词
短链脂肪酸
卵母细胞发育
体外成熟
氧化应激
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职称材料
题名
DEAD盒解旋酶10(DDX10)通过增强黑素瘤缺失基因2(AIM2)蛋白稳定性促进AIM2炎性体激活
被引量：
1
1
作者
赵山美子
林萌
张玉霞
机构
广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心儿科研究所
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期289-296,共8页
基金
国家自然科学基金重大研究计划(91742109)
国家自然科学基金(31770978)。
文摘
目的研究DEAD盒解旋酶10(DDX10)对黑素瘤缺失基因2(AIM2)炎性体通路的调控机制。方法通过在HEK293T-caspase-1-ASC-IL-1β(HEK293T-CIA)细胞系中过表达DDX家族成员和AIM2表达质粒,检测上清中的白细胞介素1β(IL-1β)的释放,筛选对AIM2炎性体通路有调控作用的分子。在DDX10缺失的THP-1细胞系,利用佛波酯(PMA)诱导分化为巨噬细胞,用脂多糖(LPS)预处理,再用poly(dA:dT)刺激巨噬细胞激活AIM2炎性体。采用ELISA检测IL-1β的释放,Western blot法检测胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白的切割和DDX10蛋白水平。采用免疫共沉淀法检测DDX10和AIM2的相互作用,利用免疫荧光细胞化学染色法结合共聚焦显微镜技术确定DDX10和AIM2在HEK293T细胞的共定位情况。结果过表达DDX10显著促进AIM2炎性体通路的激活,缺失DDX10显著降低AIM2炎性体通路的激活,DDX10与AIM2的带有200个氨基酸重复序列的造血性干扰素诱导核蛋白(HIN-200)结构域存在相互作用,并增强AIM2的蛋白稳定性。结论DDX10通过提高AIM2的蛋白稳定性促进AIM2炎性体通路的激活。
关键词
DEAD盒解旋酶10(DDX10)
黑素瘤缺失基因2(AIM2)
炎性体
Keywords
DEAD box helicase 10(DDX10)
absent in melanoma 2(AIM2)
inflammasome
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
短链脂肪酸对体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍的保护作用
被引量：
2
2
作者
唐婷
卡迪丽娅·居尔艾特提拜克
赵山美子
马汝钧
陈莉
姚兵
机构
南京医科大学金陵临床医学院(东部战区总医院)生殖医学科
南京师范大学生命科学学院
出处
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
2022年第5期465-470,共6页
基金
国家自然科学基金(32000583)。
文摘
目的短链脂肪酸(SCFAs)对卵母细胞体外成熟的作用及其可能的机制尚不明确。文中探讨短链脂肪酸对小鼠卵母细胞体外诱导氧化应激后发育成熟的影响及其作用机制。方法收集6~8周龄ICR雌鼠生发泡(GV)期的卵母细胞,分为对照组(不干预)、H_(2)O_(2)处理组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h)、H_(2)O_(2)+乙酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,1 mmol/L乙酸干预)、H_(2)O_(2)+丙酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,10μmol/L丙酸干预)和H_(2)O_(2)+丁酸组(50μmol/L H_(2)O_(2)处理1.5 h后,2μmol/L丁酸干预)。并于培养3 h后观察生发泡破裂(GVBD)率,于培养16 h后观察第一极体排出(PBE)率;免疫荧光化学染色法检测体外培养9 h进入第一次减数分裂中期(MI期)和16 h排出第一极体进入第二次减数分裂中期(MII期)的卵母细胞内染色体的排列和纺锤体的形态;Western blot检测不同处理组Pi3k/Akt通路相关蛋白表达量。结果成熟率结果显示,与对照组GVBD率[(86.87±1.76)%]和PBE率[(85.37±1.98)%]相比,H_(2)O_(2)处理组[(66.73±1.25)%、(50.57±4.22)%]明显下降(P<0.05),而与H_(2)O_(2)处理组相比,H_(2)O_(2)+乙酸组[(80.67±2.62)%、(78.07±1.78)%],H_(2)O_(2)+丙酸组[(74.50±2.91)%、68.03±1.84)%]和H_(2)O_(2)+丁酸组[(75.93±2.12)%、(66.40±3.46)%]卵母细胞的成熟率显著改善(P<0.01)。免疫荧光结果显示,在添加了SCFAs的M2培养液中成熟的卵母细胞减数分裂的超微结构较H_(2)O_(2)处理组明显改善,主要体现在染色体排列和纺锤体形态的改变。Western blot结果显示,H_(2)O_(2)处理组卵母细胞中的p-Akt和Akt蛋白表达量的比值较对照组明显增多(P<0.01),而H_(2)O_(2)+乙酸组和H_(2)O_(2)+丙酸组较H_(2)O_(2)处理组明显降低(P<0.01)。结论在体外培养液中添加短链脂肪酸可以改善氧化应激后小鼠卵母细胞的发育潜能,为改善体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍提供新思路。
关键词
短链脂肪酸
卵母细胞发育
体外成熟
氧化应激
Keywords
short-chain fatty acids
oocyte development
in vitro maturation
oxidative stress
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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1
DEAD盒解旋酶10(DDX10)通过增强黑素瘤缺失基因2(AIM2)蛋白稳定性促进AIM2炎性体激活
赵山美子
林萌
张玉霞
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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下载PDF
职称材料
2
短链脂肪酸对体外氧化应激诱导的卵母细胞成熟障碍的保护作用
唐婷
卡迪丽娅·居尔艾特提拜克
赵山美子
马汝钧
陈莉
姚兵
《医学研究生学报》
CAS
北大核心
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