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苦虎益母颗粒的质量标准研究
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作者 房思远 赵兵令 +3 位作者 朱永明 李育明 包永占 史万玉 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第2期103-109,共7页
为了更好地控制苦虎益母颗粒产品的质量和稳定性,探究并制定苦虎益母颗粒的质量标准。本试验通过高效液相色谱法对虎杖的有效成分大黄素含量进行测定,并对黄芪、益母草、苦参和虎杖进行薄层色谱鉴别研究。结果显示,大黄素在进样量介于0.... 为了更好地控制苦虎益母颗粒产品的质量和稳定性,探究并制定苦虎益母颗粒的质量标准。本试验通过高效液相色谱法对虎杖的有效成分大黄素含量进行测定,并对黄芪、益母草、苦参和虎杖进行薄层色谱鉴别研究。结果显示,大黄素在进样量介于0.0797~0.7176μg时具有良好的线性关系,回归方程为Y=3919.6X-17.864,R=0.9997,该方法的精密度、重复性和稳定性良好,加样回收率的平均值为98.26%,相对标准偏差(RSD)为1.22%;薄层色谱鉴别黄芪、益母草、苦参和虎杖,检测指标斑点位置和颜色均与对照品一致,分离效果较好,阴性无干扰。本试验建立的HPLC含量测定和薄层色谱鉴别方法从重复性、稳定性和操作难易程度等不同方面均能满足苦虎益母颗粒质量控制要求,可作为苦虎益母颗粒的质量控制标准。 展开更多
关键词 苦虎益母颗粒 质量标准 含量检测 薄层色谱鉴别
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基于Box-Behnken设计-响应面法优化败毒止泻提取物制备工艺研究 被引量:1
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作者 房思远 赵兵令 +2 位作者 郗艳菊 朱永明 李辰荃 《中兽医医药杂志》 2025年第1期73-79,共7页
为探索败毒止泻提取物的合理提取工艺,提高秦皮甲素和秦皮乙素总含量以及复方浸出物出膏率,选择影响试验指标的提取次数、提取时间、加水量等3个核心因素进行单因素试验,以最优单因素为影响因子,采用Box-Behnken中心组合设计建立数学模... 为探索败毒止泻提取物的合理提取工艺,提高秦皮甲素和秦皮乙素总含量以及复方浸出物出膏率,选择影响试验指标的提取次数、提取时间、加水量等3个核心因素进行单因素试验,以最优单因素为影响因子,采用Box-Behnken中心组合设计建立数学模型,考察相关参数对综合评分的影响程度。结果表明,败毒止泻提取物的最佳提取条件为提取3次,提取时间为1.5 h,加水量为12倍水;模型预测综合评分为96.932,验证值为96.757,理论值与验证值相对误差为0.18%。优化后的败毒止泻提取物标准工艺为中试生产转化以及临床使用的顺应性奠定了基础。 展开更多
关键词 败毒止泻提取物 Box-Behnken响应面法 综合评分
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小鼠毛囊不同生长周期中MITF下游色素相关基因的定位表达及相关性分析 被引量:7
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作者 赵兵令 王海东 +6 位作者 陈天直 于秀菊 杨玉静 许灿 胡帅鹏 聂瑞强 董常生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期198-206,共9页
小眼畸形转录因子(MITF)不仅是黑色素细胞发育、增殖和存活的必要调节因子,而且对调节相关酶和黑素体蛋白表达来确保黑色素产生具有至关重要的作用。MITF下游色素相关基因在小鼠毛囊生长周期中的表达及相关性仍有待研究。HE染色结果表... 小眼畸形转录因子(MITF)不仅是黑色素细胞发育、增殖和存活的必要调节因子,而且对调节相关酶和黑素体蛋白表达来确保黑色素产生具有至关重要的作用。MITF下游色素相关基因在小鼠毛囊生长周期中的表达及相关性仍有待研究。HE染色结果表明不同毛囊时期的小鼠毛囊呈现典型的组织形态学结构;免疫组织化学显示,MITF、GPNMB、OA1、TYR、TYRP2在不同毛囊生长周期中的毛基质及内外毛根鞘均有不同程度的阳性表达。黑色素测定结果表明,在毛囊生长初期和中期,碱性可溶性总黑色素(ASM)、真黑素(EM)以及褐黑素(PM)相对含量高于毛囊生长末期。蛋白免疫印迹结果表明,MITF、GPNMB、OA1、TYR、TYRP2在毛囊生长初期和中期蛋白质相对水平明显高于毛囊生长末期。实时荧光定量PCR结果表明,MITF、GPNMB、OA1、TYR、TYRP2、PMEL在毛囊生长初期和中期,mRNA相对表达量显著高于毛囊生长末期。在不同毛囊生长周期小鼠皮肤的MITF下游色素相关基因表达存在显著差异,表明上述因子在维持黑色素细胞色素生成是不可或缺的因素。 展开更多
关键词 小鼠 小眼畸形转录因子 毛囊 免疫组化学
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紫外线b促进绵羊黑色素细胞中GPNMB和PMEL的表达 被引量:3
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作者 赵兵令 杨玉静 +4 位作者 陈天直 于秀菊 杨林佩 董常生 杨姗姗 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期845-852,共8页
非转移性黑色素瘤糖蛋白b(glycoprotein non-metastatic melanoma protein b,GPNMB)及其同系物色素细胞特异性黑色素细胞蛋白(pigment cell-specific melanocyte protein,PMEL)对黑素体的形成和黑色素的生成具有重要的作用,而GPNMB和PME... 非转移性黑色素瘤糖蛋白b(glycoprotein non-metastatic melanoma protein b,GPNMB)及其同系物色素细胞特异性黑色素细胞蛋白(pigment cell-specific melanocyte protein,PMEL)对黑素体的形成和黑色素的生成具有重要的作用,而GPNMB和PMEL的功能还有待深入研究。本文旨在探索GPNMB和PMEL在不同毛色绵羊皮肤表达是否存在差异,确定紫外线b(UVB)对GPNMB和PMEL是否有影响。免疫组织化学结果表明,GPNMB在不同毛色绵羊皮肤的毛基质、内外毛根鞘、毛乳头等区域均有表达。Western印迹和qRT-PCR结果显示,黑色绵羊皮肤中GPNMB和PMEL表达量,高于白色绵羊皮肤。黑色素细胞经UVB照射后,GPNMB和PMEL的表达增高。UVB照射剂量为100 m J/cm2时,黑色素细胞活性最高;单次UVB辐射后,GPNMB和PMEL mRNA表达量在72h达到顶峰,两者的曲线变化趋势大致相同。UVB连续辐射后,GPNMB mRNA表达量在4 d达到顶峰,而PMEL mRNA表达量虽然在3 d升高,但且对GPNMB作用更明显。上述结果提示,GPNMB和PMEL在不同毛色绵羊皮肤存在差异性表达。UVB单次或者连续照射,均促进GPNMB和PMEL表达,且对GPNMB影响更显著。GPNMB和PMEL可能通过影响黑素体的成熟进而调节黑色素的生成。 展开更多
关键词 绵羊 非转移性黑色素瘤糖蛋白b 色素细胞特异性黑色素细胞蛋白
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非转移性黑色素瘤糖蛋白B对小鼠黑色素细胞色素生成的影响
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作者 赵兵令 陈天直 +3 位作者 杨玉静 于秀菊 杨林佩 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1654-1664,共11页
旨在探索非转移性黑色素瘤糖蛋白B(GPNMB)在不同毛色小鼠皮肤是否存在差异性表达,确定其对黑色素生成的影响。随机选取C57BL/6J品系出生12d的黑、棕、灰小鼠各3只,背部剪毛后,每只小鼠各取3块皮肤组织,采用免疫组织化学检测,结果表明,GP... 旨在探索非转移性黑色素瘤糖蛋白B(GPNMB)在不同毛色小鼠皮肤是否存在差异性表达,确定其对黑色素生成的影响。随机选取C57BL/6J品系出生12d的黑、棕、灰小鼠各3只,背部剪毛后,每只小鼠各取3块皮肤组织,采用免疫组织化学检测,结果表明,GPNMB在不同毛色小鼠皮肤的毛基质、内外毛根鞘、毛乳头等区域均有表达。利用Western blot和qRT-PCR方法分析,结果显示,灰色小鼠皮肤中GPNMB表达量最低。过表达GPNMB后,与空载体组相比,MC1R、β-catenin和SLC45A2相对表达量显著升高;用紫外线B(UVB)处理黑色素细胞,同时检测GPNMB和MC1R的表达量变化。结果表明,UVB对GPNMB和MC1R有影响,并且不同剂量UVB辐射对GPNMB影响不同。综上表明,GPNMB在不同毛色小鼠皮肤存在差异性表达,并且通过影响黑色素细胞色素的生成进而参与毛色的生成。 展开更多
关键词 GPNMB UVB 黑色素细胞 黑色素
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Slc45a2调控小鼠黑色素细胞色素生成 被引量:5
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作者 王海东 赵兵令 +6 位作者 陈天直 于秀菊 杨玉静 刘颖 常露程 赫晓燕 薛霖莉 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期406-413,共8页
膜相关转运蛋白Slc45a2(solute carrier family 45 member 2)调节黑素体中的p H值,进而调节酪氨酸酶活性,在黑色素生成中发挥重要作用。小眼畸形转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)已被证实是Slc45a2的调... 膜相关转运蛋白Slc45a2(solute carrier family 45 member 2)调节黑素体中的p H值,进而调节酪氨酸酶活性,在黑色素生成中发挥重要作用。小眼畸形转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)已被证实是Slc45a2的调节因子,然而其调控机制仍待研究。该研究旨在探讨Slc45a2在不同毛色小鼠皮肤是否存在差异表达,以及与毛色形成是否存在相关性。QRTPCR检测显示,Slc45a2在不同毛色小鼠皮肤样品中均有表达,在棕色和灰色小鼠皮肤中Slc45a2的表达量是黑色小鼠皮肤的6.29倍(P<0.01)和1.18倍(P<0.05);Western印迹结果显示,在棕色和灰色小鼠皮肤中Slc45a2蛋白表达量是黑色小鼠皮肤的1.44(P<0.01)和1.03倍;免疫组织化学结果表明,Slc45a2在不同毛色皮肤毛囊的毛基质、内外毛根鞘、毛乳头等区域均有表达。为了进一步了解Slc45a2在黑色素细胞色素沉着的重要作用,将Slc45a2转染到小鼠黑色素细胞并测定黑色素含量,同时检测色素沉着相关基因的表达水平。结果表明,转染Slc45a2与空载组相比黑色素含量明显增加。此外,MITF、TYR、TYRP1和TYRP2蛋白水平分别升高1.31倍、1.37倍、1.63倍和2.21倍,差异显著(P<0.05);TYRP2蛋白显著升高2.47倍(P<0.01)。MITF mRNA显著升高1.64(P<0.05);TYR和TYRP1 mRNA显著升高2.96倍(P<0.01)和8.85倍(P<0.01);TYRP2 mRNA表达量变化不明显。Slc45a2在不同毛色小鼠皮肤中均可有效表达,且差异显著。Slc45a2过量表达,使色素沉着相关基因的表达量及黑色素含量增加。由此表明,Slc45a2通过调控色素的生成,进而影响毛色的形成。 展开更多
关键词 Slc45a2 毛色 黑色素细胞 黑色素合成
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HGF/c-met在小鼠毛囊生长周期中的表达 被引量:5
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作者 于秀菊 高淑媛 +3 位作者 程笳琪 赵兵令 赫晓燕 董常生 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期406-409,共4页
目的 HGF及其受体c-met是很多系统中间充质-上皮互相作用的主要的介导者,毛囊周期性生长是典型的间充质-上皮互作模型,为证实HGF/c-met信号在小鼠毛囊周期生长过程中是否发挥作用。方法本实验运用免疫组织化学的方法对HGF/c-met在ICR小... 目的 HGF及其受体c-met是很多系统中间充质-上皮互相作用的主要的介导者,毛囊周期性生长是典型的间充质-上皮互作模型,为证实HGF/c-met信号在小鼠毛囊周期生长过程中是否发挥作用。方法本实验运用免疫组织化学的方法对HGF/c-met在ICR小鼠毛囊生长期、退化期和休止期进行组织定位。结果 HGF主要位于真毛乳头和皮脂腺,c-met主要位于毛基质、根鞘部和表皮。HGF及其受体在小鼠毛囊生长期表达量达到最高值,在退化期基本不表达,在休止期-生长期过渡时HGF及其受体表达量均上升。结论 HGF/c-met信号在ICR小鼠毛囊生长过程中起调控作用。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 肝细胞生长因子受体 ICR小鼠 免疫组织化学
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RSPO2和β-catenin在羊驼不同部位皮肤中表达差异的研究 被引量:3
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作者 高淑媛 于秀菊 +5 位作者 程笳琪 宋亚军 赵兵令 牛姝 曹校瑞 赫晓燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期931-937,共7页
本研究旨在探讨RSPO_2和β-catenin对羊驼毛性状的作用。采用免疫组织化学、荧光定量PCR和Western blotting方法对RSPO_2和β-catenin在羊驼背部、腿部和耳部皮肤中基因和蛋白表达及蛋白定位进行研究。免疫组化结果显示:真皮乳头、毛囊... 本研究旨在探讨RSPO_2和β-catenin对羊驼毛性状的作用。采用免疫组织化学、荧光定量PCR和Western blotting方法对RSPO_2和β-catenin在羊驼背部、腿部和耳部皮肤中基因和蛋白表达及蛋白定位进行研究。免疫组化结果显示:真皮乳头、毛囊基质、内根鞘、外根鞘、汗腺、表皮均可见RSPO_2的免疫阳性反应,并且主要出现在细胞质中,其中在内根鞘呈现强阳性;β-catenin在毛囊基质、内根鞘、外根鞘、汗腺、表皮内均出现免疫阳性反应。RT-PCR结果表明:RSPO_2在羊驼背部和腿部的表达量分别是耳部的7.633倍(P<0.05)和5.602倍(P<0.05),β-catenin在羊驼背部和腿部的表达量分别是耳部的3.689倍(P<0.05)和2.067倍(P>0.05)。Western blotting结果显示:羊驼皮肤提取物中存在与兔抗RSPO_2多克隆抗体和兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带,大小分别是26和86ku,羊驼皮肤平均蛋白表达量均为背部与耳部间差异显著(P<0.05),其中,RSPO_2在腿部与耳部表达量差异显著(P<0.05)。综上表明,RSPO_2和β-catenin与毛纤维的长度、弯曲度和细度呈正相关。 展开更多
关键词 羊驼 RSPO2 Β-CATENIN 定位 表达差异
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内皮素3在不同毛色小鼠皮肤中的表达与定位 被引量:3
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作者 王海东 李亚楠 +4 位作者 薛霖莉 赵兵令 赫晓燕 董常生 王娟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期339-345,共7页
内皮素3(endothelin 3,EDN3)对早期黑色素细胞的迁移及增殖分化有促进作用,并可通过与其受体结合促进黑色素的合成。EDN3在不同毛色小鼠皮肤中的差异及其在毛色形成过程中的作用仍有待研究。实时荧光定量PCR结果显示,灰色小鼠皮肤中EDN... 内皮素3(endothelin 3,EDN3)对早期黑色素细胞的迁移及增殖分化有促进作用,并可通过与其受体结合促进黑色素的合成。EDN3在不同毛色小鼠皮肤中的差异及其在毛色形成过程中的作用仍有待研究。实时荧光定量PCR结果显示,灰色小鼠皮肤中EDN3的表达量显著高于黑色及棕色小鼠,约为其2倍(P<0.01)。蛋白免疫印迹结果显示,灰色小鼠皮肤内EDN3的含量为黑色小鼠的5倍,棕色小鼠为黑色小鼠的2倍。ELISA结果表明,灰色小鼠皮肤中EDN3的蛋白质表达量分别是黑色和棕色小鼠的1.8倍和1.4倍(P<0.01)。免疫组织化学显示,EDN3在毛囊的毛基质及内外毛根鞘有明显表达,毛乳头等部位有少量表达。EDN3在不同毛色小鼠皮肤中的表达存在显著差异,是维持黑色素细胞存在不可缺少的因子,可能对两种色素颗粒的相互转化有一定的作用。 展开更多
关键词 内皮素3 小鼠 免疫组织化学 黑色素
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内皮素3在不同毛色绵羊皮肤的表达与定位 被引量:1
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作者 李亚楠 赵兵令 +5 位作者 马淑慧 赫晓燕 范瑞文 王海东 耿建军 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2322-2328,共7页
旨在探索内皮素3(Endothelin 3,EDN3)在不同毛色绵羊皮肤的表达差异以及对毛色的影响。以不同毛色绵羊为研究对象,通过荧光定量PCR技术分析EDN3基因在不同毛色绵羊皮肤的表达量,通过免疫组织化学和ELISA方法对EDN3蛋白在不同毛色绵羊皮... 旨在探索内皮素3(Endothelin 3,EDN3)在不同毛色绵羊皮肤的表达差异以及对毛色的影响。以不同毛色绵羊为研究对象,通过荧光定量PCR技术分析EDN3基因在不同毛色绵羊皮肤的表达量,通过免疫组织化学和ELISA方法对EDN3蛋白在不同毛色绵羊皮肤中的定位和表达进行研究。1)qRT-PCR结果显示,EDN3在白色绵羊皮肤的相对表达量为5.540 6±0.030 7,在黑色绵羊皮肤的相对表达量为1.005 8±0.062 0。黑白花色绵羊的白色区和黑色区的相对表达量分别为4.341 9±0.087 7和1.150 1±0.005 3。2)ELISA结果显示,EDN3在白色绵羊皮肤中的表达量为128.424 7±2.223 4,在黑色绵羊皮肤的相对表达量为25.114 4±3.248 3。在黑白花色绵羊白色皮肤中的表达量为93.945 3±7.562 2,黑色皮肤的表达量为28.606 0±9.295 9。3)免疫组织化学显示,EDN3在绵羊皮肤毛囊的毛基质、内外毛根鞘、毛乳头等区域均有表达。综上表明,EDN3在不同毛色绵羊皮肤中均可正常表达,且表达量存在显著差异。EDN3是维持黑色素细胞存在不可缺少的基因,但不影响绵羊黑白花的形成。 展开更多
关键词 内皮素3 绵羊 免疫组织化学
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鱼腥草桔蓝固体分散剂质量标准研究
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作者 赵兵令 房思远 +2 位作者 朱永明 王红志 冯金民 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第21期126-129,共4页
试验旨在建立鱼腥草桔蓝固体分散剂的质量标准。试验采用薄层色谱法建立了甘草中甘草酸铵、矮地茶中岩白菜素、益母草中盐酸水苏碱和鱼腥草中鱼腥草对照药材的薄层鉴别方法,采用高效液相色谱法建立了板蓝根中(R,S)-告依春对照品的含量... 试验旨在建立鱼腥草桔蓝固体分散剂的质量标准。试验采用薄层色谱法建立了甘草中甘草酸铵、矮地茶中岩白菜素、益母草中盐酸水苏碱和鱼腥草中鱼腥草对照药材的薄层鉴别方法,采用高效液相色谱法建立了板蓝根中(R,S)-告依春对照品的含量测定方法。结果显示,甘草、矮地茶、益母草和鱼腥草的薄层鉴别斑点显色清晰,分离效果较好,(R,S)-告依春进样量在0.0382~0.2674μg之间与峰面积线性关系良好。其线性方程为y=213.25x-0.0996,R^(2)=0.9994。研究表明,建立的薄层鉴别方法稳定可行,可用于鱼腥草桔蓝固体分散剂含量的测定。 展开更多
关键词 鱼腥草桔蓝固体分散剂 薄层鉴别 质量标准
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基于网络药理学和分子对接探究芪芝口服液提高家禽免疫功能的作用机制 被引量:3
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作者 荣轩 房思远 +2 位作者 朱永明 李育明 赵兵令 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第2期70-76,共7页
试验旨在探究芪芝口服液提高家禽免疫功能的作用机制。采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集该复方中黄芪和灵芝2味药材的活性成分及其作用靶点,并与OMIM、TTD和GeneCards数据库收集免疫的靶点进行交集,获得芪芝口服液作用于... 试验旨在探究芪芝口服液提高家禽免疫功能的作用机制。采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集该复方中黄芪和灵芝2味药材的活性成分及其作用靶点,并与OMIM、TTD和GeneCards数据库收集免疫的靶点进行交集,获得芪芝口服液作用于家禽免疫的潜在靶点。运用Cytoscape 3.9.1软件构建中药-成分-靶点-通路-疾病网络图和蛋白质相互作用(PPI)网络,并对靶点进行GO富集和KEGG通路分析。使用分子对接技术进行活性成分和核心靶点的分子对接验证。结果显示,芪芝口服液30个成分对应66个靶点,家禽免疫329个靶点,其中交集靶点17个,PPI核心靶点包括核因子κB抑制因子α(NFKBIA)、白细胞介素-6(IL-6)和干扰素-γ(IFNG)等。GO功能富集共有38条结果,包括33个生物过程条目、4个分子功能条目和1个细胞成分条目;KEGG通路分析显示交集基因主要富集于C型凝集素受体信号通路、FoxO信号通路和Toll样受体等信号通路。分子对接结果显示,关键成分与核心蛋白靶点有较好的结合活性,证明了网络药理学预测结果的可靠性。研究表明,芪芝口服液可通过多成分、多靶点、多通路提升家禽的免疫功能。 展开更多
关键词 芪芝口服液 免疫功能 网络药理学 分子对接 家禽
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KRT71决定羊驼毛弯曲度的形成 被引量:4
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作者 程笳琪 于秀菊 +6 位作者 高淑媛 赵兵令 崔玉琮 秦以龙 牛姝 曹校瑞 赫晓燕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期459-465,共7页
角蛋白71(Keratins 71,KRT71)属于人类Ⅱ型上皮角蛋白,是毛囊特异性的上皮角蛋白基因。相关研究表明,在其他物种中,KRT71与被毛卷曲相关,KRT71在卷曲的被毛形成过程中起着重要的作用。现眼观羊驼背部、耳部和腿部毛发的弯曲程度不同,但K... 角蛋白71(Keratins 71,KRT71)属于人类Ⅱ型上皮角蛋白,是毛囊特异性的上皮角蛋白基因。相关研究表明,在其他物种中,KRT71与被毛卷曲相关,KRT71在卷曲的被毛形成过程中起着重要的作用。现眼观羊驼背部、耳部和腿部毛发的弯曲程度不同,但KRT71与其被毛的弯曲度是否相关尚不清楚。本研究利用PCR技术克隆KRT71基因全CDS区。通过实时荧光定量PCR技术检测基因的表达。免疫组化、Western印迹对KRT71蛋白在羊驼背部、耳部和腿部皮肤组织中的表达量进行分析,以探讨KRT71与羊驼毛发弯曲度的关系。结果显示,羊驼的KRT71基因的CDS区共有1 578 bp,编码525个氨基酸;免疫组化结果显示,KRT71在羊驼的背部、耳部和腿部均有表达,并且主要特异性表达于毛囊的内根鞘;实时荧光定量PCR和Western印迹结果显示,KRT71的mRNA和蛋白量均呈现背部﹥腿部﹥耳部的趋势;相较于耳部,背部和腿部的表达量较高。实验结果提示,KRT71的表达量与毛纤维的弯曲度呈正相关,KRT71可能在羊驼毛纤维的弯曲度形成过程中发挥着一定的作用。 展开更多
关键词 羊驼毛 不同部位 角蛋白71 弯曲度
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GPR143在绵羊皮肤组织中的表达及定位分析 被引量:2
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作者 陈天直 赵兵令 +5 位作者 刘宇 赵园园 王海东 范瑞文 王鹏超 董常生 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期658-665,共8页
G蛋白偶联受体143(G-protein coupled receptor143,GPR143)在黑素体的生物合成中起重要作用,本文旨在研究GPR143基因在不同毛色绵羊皮肤组织中的差异表达及定位,探索GPR143基因与毛色形成的相关性。通过q RT-PCR方法和免疫印迹方法分别... G蛋白偶联受体143(G-protein coupled receptor143,GPR143)在黑素体的生物合成中起重要作用,本文旨在研究GPR143基因在不同毛色绵羊皮肤组织中的差异表达及定位,探索GPR143基因与毛色形成的相关性。通过q RT-PCR方法和免疫印迹方法分别检测不同毛色绵羊皮肤组织中GPR143基因m RNA水平和蛋白水平的表达差异;运用免疫荧光法对不同毛色绵羊皮肤组织中的GPR143基因进行定位并对结果进行光密度值分析。q RT-PCR结果显示,GPR143基因在黑色绵羊皮肤组织中m RNA相对表达量为白色绵羊的7.84倍,二者差异极显著(P<0.01);免疫印迹结果显示,黑色绵羊皮肤组织中GPR143蛋白表达量是白色绵羊的1.3倍,二者差异显著(P<0.05)。免疫荧光结果显示,GPR143蛋白的主要表达部位为绵羊皮肤组织毛囊外根鞘和表皮层,经光密度值分析后发现,GPR143在黑色绵羊皮肤毛囊外根鞘和表皮层的表达量显著高于白色绵羊。本研究结果表明不同毛色绵羊皮肤组织均能表达GPR143基因,但黑色绵羊皮肤组织中该基因的m RNA和蛋白水平都显著高于白色绵羊,说明GPR143的m RNA和蛋白在黑色绵羊皮肤组织中表达上调,在白色绵羊皮肤组织中表达下调。GPR143基因可能通过调控MITF水平和黑素体的数量、大小、运动和成熟进而参与绵羊毛色的形成过程。 展开更多
关键词 绵羊 毛色 GPR143 QRT-PCR 免疫印迹 免疫荧光
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SOX5影响小鼠皮肤黑色素细胞MITF-M表达和黑色素生成 被引量:2
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作者 常露程 赵兵令 +4 位作者 刘颖 白云 李经纬 李莉鑫 王海东 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期83-91,共9页
旨在探讨SOX5在小鼠皮肤毛色中的作用。本研究随机选取出生后12d的C57BL/6品系黑色、棕色、灰色小鼠各3只,采用实时荧光定量PCR、Western blotting和免疫组织化学方法对SOX5在黑色、棕色和灰色小鼠皮肤中的表达差异进行分析;并构建SOX5... 旨在探讨SOX5在小鼠皮肤毛色中的作用。本研究随机选取出生后12d的C57BL/6品系黑色、棕色、灰色小鼠各3只,采用实时荧光定量PCR、Western blotting和免疫组织化学方法对SOX5在黑色、棕色和灰色小鼠皮肤中的表达差异进行分析;并构建SOX5真核表达载体;运用体外转染的方法,转染小鼠黑色素细胞并检测与色素形成相关基因的表达水平,同时测定黑色素含量。结果表明:1)SOX5在不同毛色小鼠皮肤中均有表达,SOX5在黑色和灰色小鼠皮肤中mRNA和蛋白相对表达量高于棕色小鼠皮肤,均差异极显著(P<0.01);且其主要表达部位为毛囊外根鞘。2)转染组与空载组相比,MITF-M、TYR、TYRP1、TYRP2、PMEL、OA1表达量均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高,黑色素含量也极显著增加(P<0.01)。3)过表达MITF-M对SOX5存在负反馈作用。综上表明,SOX5通过调控MITF-M影响色素的生成进而参与毛色的形成。 展开更多
关键词 SOX5 MITF-M 黑色素细胞 黑色素
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满山红配方颗粒提取工艺优化及质量标准研究 被引量:2
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作者 赵奇 房思远 +3 位作者 李辰荃 朱永明 徐盼盼 赵兵令 《中兽医医药杂志》 CAS 2024年第5期67-73,共7页
对满山红配方颗粒的提取工艺进行优化,并建立了相应的质量标准,为其临床应用奠定基础。采用单因素试验结合Box-Behnken响应面法进行研究,以出膏率和杜鹃素含量为评价指标,对提取次数、提取时间和加水倍数进行考察,利用高效液相色谱法(HP... 对满山红配方颗粒的提取工艺进行优化,并建立了相应的质量标准,为其临床应用奠定基础。采用单因素试验结合Box-Behnken响应面法进行研究,以出膏率和杜鹃素含量为评价指标,对提取次数、提取时间和加水倍数进行考察,利用高效液相色谱法(HPLC)对杜鹃素含量进行定量测定,得出各因素对出膏率和杜鹃素含量的影响程度,并依据《中华人民共和国药典》2020年版,采用薄层鉴别法对满山红进行定性分析。通过Box-Behnken中心组和设计模型分析回归模型方差以及响应面图,确认满山红的最佳提取条件为:提取4次,提取时间2 h,加水18倍。薄层鉴别法显示,满山红斑点清晰,重现性佳,高效液相色谱法也显示出高度的准确性和重复性。优化后的满山红配方颗粒提取工艺操作简便、稳定可行,为满山红的深度开发和利用提供了科学依据。 展开更多
关键词 满山红 杜鹃素 配方颗粒 提取工艺 质量标准
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基于Box-Behnken设计-响应面法优化改良葛根芩连汤提取工艺研究 被引量:6
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作者 房思远 刘贺 +4 位作者 赵子玉 朱永明 封晓慧 李育明 赵兵令 《中兽医医药杂志》 2024年第1期64-69,共6页
优化和评价改良葛根芩连汤的提取工艺,为提高其临床适用性以及开发新兽药奠定基础。采用Box-Behnken设计-响应面法,以葛根素含量为评价指标,对提取次数、煎煮时间、加水量3个影响因素进行考察,并对响应面条件下17批样品进行定量分析,得... 优化和评价改良葛根芩连汤的提取工艺,为提高其临床适用性以及开发新兽药奠定基础。采用Box-Behnken设计-响应面法,以葛根素含量为评价指标,对提取次数、煎煮时间、加水量3个影响因素进行考察,并对响应面条件下17批样品进行定量分析,得出各因素对葛根素提取率的影响程度。通过Box-Behnken中心组和设计建立数学模型分析回归模型方差以及响应面曲面图,获得改良葛根芩连汤最佳提取工艺为:提取3次,提取时间2 h,加水量9倍。通过工艺验证测得葛根素含量平均值为0.8108 mg/mL,与预测值0.8110 mg/mL接近。优化的改良葛根芩连汤最佳提取工艺特征有效成分溶出率高,稳定可行,可为该复方制剂的进一步研究提供理论依据。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 葛根素 提取工艺 响应面法
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黄连须配方颗粒提取工艺优化及其质量标准研究 被引量:1
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作者 徐盼盼 赵兵令 +3 位作者 李辰荃 朱永明 赵奇 房思远 《中兽医医药杂志》 CAS 2024年第6期21-28,共8页
优化黄连须配方颗粒的提取工艺,为建立质量标准及促进临床应用奠定基础。采用BoxBehnken响应面法,以出膏率和盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的总含量为评价指标,对提取次数、加水量和提取时间进行单因素筛选考察,并... 优化黄连须配方颗粒的提取工艺,为建立质量标准及促进临床应用奠定基础。采用BoxBehnken响应面法,以出膏率和盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的总含量为评价指标,对提取次数、加水量和提取时间进行单因素筛选考察,并对响应面条件下17批样品进行检测,得出各因素对综合评分的影响程度。通过优化的提取工艺制备样品,以TLC法进行定性鉴别,采用HPLC法测定盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的含量。结果表明,黄连须配方颗粒提取最佳工艺为提取3次,加水量12倍,提取时间2 h,验证试验结果与模型预测值相符;TLC斑点清晰,重现性好,盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱含量稳定。黄连须配方颗粒提取工艺合理,稳定可行;质量评价方法简便易行,重复性良好。 展开更多
关键词 黄连须 Box-Behnken响应面法 提取工艺
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中兽药改良葛根芩连汤薄层色谱质量标准研究 被引量:2
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作者 赵兵令 房思远 +4 位作者 荣轩 赵子玉 封晓慧 李育明 朱永明 《中兽医医药杂志》 CAS 2023年第6期68-73,共6页
为更好地控制改良葛根芩连汤的产品质量和生产工艺的稳定性,研究并制定其质量标准。采用薄层色谱方法分别对组方中葛根、黄连、黄芩、秦皮、大黄、甘草的特征性成分进行鉴别,分别在紫外光灯365 nm处视检葛根素、盐酸小檗碱、黄连对照药... 为更好地控制改良葛根芩连汤的产品质量和生产工艺的稳定性,研究并制定其质量标准。采用薄层色谱方法分别对组方中葛根、黄连、黄芩、秦皮、大黄、甘草的特征性成分进行鉴别,分别在紫外光灯365 nm处视检葛根素、盐酸小檗碱、黄连对照药材、秦皮对照药材、大黄素、大黄对照药材及样品,分别在2%三氯化铁乙醇溶液、10%磷钼酸乙醇溶液显色后于自然光下视检黄芩苷、甘草次酸及样品。结果表明,与对照品比较,在考察条件下,6味药材特征性成分薄层色谱鉴别特征斑点清晰,分离度较好,阴性对照无干扰。改良葛根芩连汤质量控制检测方法专属性强、重现性好、准确可靠,可有效控制该制剂的质量。 展开更多
关键词 改良葛根芩连汤 薄层色谱鉴别 质量标准
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中兽药苦虎益母口服液TLC与HPLC检测方法的建立 被引量:1
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作者 房思远 赵兵令 +4 位作者 朱永明 荣轩 李育明 包永占 史万玉 《中兽医医药杂志》 CAS 2023年第4期52-57,共6页
为更好地控制苦虎益母口服液的品质和安全性,研究并制定苦虎益母口服液质量标准,采用薄层色谱法(TLC)对方中苦参、虎杖、益母草、黄芪进行定性鉴别,采用高效液相色谱法(HPLC)对虎杖苷进行定量检测。结果显示,苦参、虎杖、益母草、黄芪... 为更好地控制苦虎益母口服液的品质和安全性,研究并制定苦虎益母口服液质量标准,采用薄层色谱法(TLC)对方中苦参、虎杖、益母草、黄芪进行定性鉴别,采用高效液相色谱法(HPLC)对虎杖苷进行定量检测。结果显示,苦参、虎杖、益母草、黄芪薄层鉴别斑点显色清晰,分离效果较好,阴性无干扰,能很好地鉴别目标成分。虎杖苷质量浓度在0.035~0.282 mg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系,回归方程为y=29086x-173.16,相关系数r=0.9993,平均回收率为98.82%,RSD值为0.73%。苦虎益母口服液的质量控制中定性鉴别分离度好,含量测定结果重现性好。 展开更多
关键词 苦虎益母口服液 薄层色谱鉴别 含量测定
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