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TTV与其它肝炎病混合感染及其基因型的研究 被引量:4
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作者 赵守松 赵久法 +1 位作者 高春明 王淑民 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2001年第3期156-158,共3页
研究TTV与其它肝炎病混合感染对肝脏病变的影响及本地区TTVDNA的基因型。选TTVORF1的保守序列作内外引物 ,采用微板核酸杂交 -ELISA方法检测患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。选取异源性大于 5 0 %的序列作显色探... 研究TTV与其它肝炎病混合感染对肝脏病变的影响及本地区TTVDNA的基因型。选TTVORF1的保守序列作内外引物 ,采用微板核酸杂交 -ELISA方法检测患者血清TTVDNA并对检测结果和临床资料进行统计学分析。选取异源性大于 5 0 %的序列作显色探针Ⅰ和显色探针Ⅱ ,进行分型研究。学生、非甲 -非戊型肝炎、慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TTV阳性率分别为 3 3 %、14 3%、12 %、16 %。TTV阳性和TTV阴性的慢性乙型肝炎及肝硬化患者 ,在年龄、性别、ALT和TBil之间无显著差异 (P >0 0 5 )。本地区流行的TTV可分为两个主要的基因型 ,即Ⅰ型 (6 6 7% )、Ⅱ型 (2 5 % ) ,部分存在混合感染 (8 3% )。TTV可能与HBV、HCV有类似的传播途径 ,故常重叠感染。TTV与乙型肝炎及肝硬化混合感染后不影响两者的肝脏病变。TTV不是本地区非甲 展开更多
关键词 输血传播病毒 TTV 混合感染 基因分型 微板核酸杂交 ELISA
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抑制Yes相关蛋白通过抑制上皮间质转化减轻CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化
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作者 赵文 阮何静 +4 位作者 汪思远 程羽哲 雷淼 赵久法 刘传苗 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1839-1849,共11页
目的探索Yes相关蛋白(YAP)可否通过调控上皮间质转化影响肝纤维化的发生发展。方法将8周龄C57BL/6小鼠18只随机分为对照组、肝纤维化模型组和YAP抑制剂维替泊芬干预组,6只/组。肝纤维化模型采用四氯化碳(CCl_(4))溶液腹腔注射8周造模;... 目的探索Yes相关蛋白(YAP)可否通过调控上皮间质转化影响肝纤维化的发生发展。方法将8周龄C57BL/6小鼠18只随机分为对照组、肝纤维化模型组和YAP抑制剂维替泊芬干预组,6只/组。肝纤维化模型采用四氯化碳(CCl_(4))溶液腹腔注射8周造模;维替泊芬干预组在CCl_(4)基础上第7~9周采用维替泊芬腹腔注射干预。HE染色、Masson染色、肝脏生化学检测观察小鼠肝脏纤维化程度;转录组、蛋白组学测序及联合生信分析探明肝纤维化过程中上皮间质转化通路是否受YAP调控;免疫组化染色和Western blotting检测YAP及上皮间质转化关键基因E-cadherin、N-cadherin、Twist等表达变化。采集健康体检、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化患者血清各60例,酶联免疫吸附法检测其中YAP、N-cadherin、Vimentin、Twist血清表达水平。C57BL/6小鼠24只随机分为对照组、肝纤维化模型组、Twist抑制剂干预组和Twist抑制剂与YAP激动剂共同干预组,6只/组。HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察小鼠肝脏纤维化程度,Western blotting检测各组α-SMA、YAP和Twist表达变化。结果小鼠肝组织病理学结果提示肝纤维化小鼠与对照组相比肝小叶结构破坏、假小叶形成,维替泊芬干预组纤维间隔变性,部分小叶结构恢复。随肝纤维化发生,血浆ALT、AST水平显著升高(P<0.01),维替泊芬干预组肝功能改善(P<0.01)。采用肝组织转录组、蛋白组测序及联合分析找到在肝纤维化形成和维替泊芬干预过程中同时在mRNA和蛋白水平差异表达的基因,发现了N-cadherin和Twist在3组间差异具有统计学意义(P<0.05),并进行PPI分析显示YAP与E-cadherin、N-cadherin存在关联。免疫组化和Western blotting结果提示N-cadherin、Twist、Vimentin随肝纤维化形成升高,E-cadherin在肝纤维化组织中表达下降(P<0.01)。抑制YAP可下调肝组织N-cadherin、Twist蛋白表达(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者血清YAP、N-cadherin、Vimentin和Twist水平均随肝炎及肝硬化发生升高,在APRI>0.5或FIB-4>1.45患者中显著升高(P<0.01)。血清YAP在健康对照、肝炎、肝硬化患者中平均水平分别为4.09、5.69和5.36 ng/mL(P<0.01),其与N-cadherin、Vimentin、Twist水平均呈显著正相关,相关系数分别为0.626、0.435、0.526。采用Harmine抑制小鼠肝组织Twist表达,并在Harmine基础上予以YAP激动剂XMU-MP-1干预,肝组织病理学结果提示抑制Twist使肝纤维化小鼠肝组织炎症及纤维化程度减轻,同时激活YAP表达可再次加重胶原纤维沉积。Western blotting检测结果提示Harmine下调肝纤维化小鼠肝组织中α-SMA、YAP及Twist蛋白表达,同时激活YAP使肝组织α-SMA和YAP表达升高(P=0.079,P<0.05)。结论上皮间质转化是肝纤维化发生的重要机制之一,抑制YAP可通过减少上皮间质转化发生减轻肝纤维化。 展开更多
关键词 肝纤维化 Yes相关蛋白 上皮间质转化 血清标志物
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