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抗玉米赤霉烯酮单抗独特型抗体制备与鉴定 被引量:2
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作者 余涛 李大刚 +4 位作者 邓宁 向军俭 宋其芳 贾彦琼 王宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期184-187,共4页
目的:研制抗玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)单抗独特型抗体并鉴定其特性,为建立ZEN无毒检测方法提供理论依据。方法:在研制抗ZEN单抗的基础上,将IgG与KLH偶联作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,制备抗ZEN单抗独特型抗体;同时将经Protein G纯化... 目的:研制抗玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)单抗独特型抗体并鉴定其特性,为建立ZEN无毒检测方法提供理论依据。方法:在研制抗ZEN单抗的基础上,将IgG与KLH偶联作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,制备抗ZEN单抗独特型抗体;同时将经Protein G纯化的单抗用胃蛋白酶酶切获取Fab片段,作为检测原,并采用间接ELISA和间接竞争ELISA对抗独特型抗体特性进行鉴定。结果:所研制的抗独特型抗体能够与ZEN竞争结合ZEN单抗,与ZEN之间存在"内影像"关系。结论:成功研制抗ZEN单抗独特型抗体,可以替代ZEN标准品应用于ELISA检测。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 抗独特型抗体 FAB片段 内影像
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脱氧雪腐镰刀菌烯醇的环七肽模拟表位筛选
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作者 余鹃 贾彦琼 +1 位作者 骆敏儿 王宏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第24期133-136,147,共5页
利用噬菌体随机环七肽库筛选脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)模拟表位。以DON单抗为靶分子,四轮固相淘选噬菌体随机环七肽库,筛选出阳性噬菌体,并通过ELISA实验检测其特异性。对阳性克隆的DNA进行测序,取序列不同的阳性克隆,分... 利用噬菌体随机环七肽库筛选脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)模拟表位。以DON单抗为靶分子,四轮固相淘选噬菌体随机环七肽库,筛选出阳性噬菌体,并通过ELISA实验检测其特异性。对阳性克隆的DNA进行测序,取序列不同的阳性克隆,分别建立阳性噬菌体与DON标准品的竞争抑制曲线。对30个噬菌体单克隆进行活性测定,结果显示能与DON单抗结合的噬菌体克隆有28株,其中的22株能被DON标准品阻断与DON单抗结合。DNA测序结果显示,21株阳性噬菌体的序列是PFPNHPY,另一株的序列是TPWTQHL。其相应噬菌体与DON毒素标准品的竞争曲线结果显示,8号噬菌体建立的竞争抑制曲线线性范围是0.0292~0.636μg/mL,IC_(50)为0.169μg/mL;4号噬菌体建立的竞争抑制曲线线性范围是0.0124~0.271μg/mL,IC_(50)为0.058μg/mL。在随机环七肽库中筛选到TPWTQHL和PFPNHPY两个DON模拟表位,可替代DON毒素标准品,建立DON的免疫学无毒检测技术。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 噬菌体展示技术 模拟表位
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