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花生Δ12脂肪酸脱氢酶基因FAD2的克隆及反义表达载体的构建
被引量：
4
1
作者
谢金喜
蔡宁波
+1 位作者
石新国
庄伟建
《花生学报》
2007年第1期1-6,12,共7页
从花生的幼嫩叶片中提取总DNA,应用PCR方法分离到了两个FAD2基因片段,分别命名为FAD2-1和FAD2-2,将反向的FAD2-1和FAD2-2片段分别与所克隆的大豆油体蛋白基因启动子片段oleosin-a与oleosin-b相连,在中间表达载体pSPROK中构建了三个带T-...
从花生的幼嫩叶片中提取总DNA,应用PCR方法分离到了两个FAD2基因片段,分别命名为FAD2-1和FAD2-2,将反向的FAD2-1和FAD2-2片段分别与所克隆的大豆油体蛋白基因启动子片段oleosin-a与oleosin-b相连,在中间表达载体pSPROK中构建了三个带T-nos的融合基因,进而把融合基因构建到植物表达载体pCAMBIA1300中,酶切鉴定后进行测序,结果表明,所构建的三个植物表达载体均分别带有Oleosin启动子和反义FAD2基因序列,FAD2-2的长度为593bps,与引用序列的同源性达到97%,包含一个起始密码子;FAD2-1的长度为1175bp,与引用序列的同源性达到99%,包含一个起始密码子与一个终止密码子。将构建好的植物表达载体已经转化农杆菌LBA4404并用于侵染花生外植体。
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关键词
△12脂肪酸脱氢酶基因
克隆
反义RNA
载体构建
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职称材料
题名
花生Δ12脂肪酸脱氢酶基因FAD2的克隆及反义表达载体的构建
被引量：
4
1
作者
谢金喜
蔡宁波
石新国
庄伟建
机构
福建农林大学油料研究所
出处
《花生学报》
2007年第1期1-6,12,共7页
基金
国家自然科学基金(30070481)
文摘
从花生的幼嫩叶片中提取总DNA,应用PCR方法分离到了两个FAD2基因片段,分别命名为FAD2-1和FAD2-2,将反向的FAD2-1和FAD2-2片段分别与所克隆的大豆油体蛋白基因启动子片段oleosin-a与oleosin-b相连,在中间表达载体pSPROK中构建了三个带T-nos的融合基因,进而把融合基因构建到植物表达载体pCAMBIA1300中,酶切鉴定后进行测序,结果表明,所构建的三个植物表达载体均分别带有Oleosin启动子和反义FAD2基因序列,FAD2-2的长度为593bps,与引用序列的同源性达到97%,包含一个起始密码子;FAD2-1的长度为1175bp,与引用序列的同源性达到99%,包含一个起始密码子与一个终止密码子。将构建好的植物表达载体已经转化农杆菌LBA4404并用于侵染花生外植体。
关键词
△12脂肪酸脱氢酶基因
克隆
反义RNA
载体构建
Keywords
△12 FAD2
cloning
anti-RNA
vector construction
分类号
S565.2 [农业科学—作物学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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1
花生Δ12脂肪酸脱氢酶基因FAD2的克隆及反义表达载体的构建
谢金喜
蔡宁波
石新国
庄伟建
《花生学报》
2007
4
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