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广东金钱草糖基转移酶基因DsUGT11的克隆和功能分析
被引量：
1
1
作者
黎馥瑜
谢纯珠
+3 位作者
詹亭
何嘉琪
马宏亮
郑夏生
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2024年第6期1553-1562,共10页
目的对广东金钱草中参与黄酮类化合物生物合成途径的糖基转移酶基因DsUGT11展开研究,通过生物信息分析、基因克隆、原核表达等技术解析其编码蛋白的功能。方法利用生物信息分析法分析和预测DsUGT11的序列特征和可能的生物功能,从新鲜叶...
目的对广东金钱草中参与黄酮类化合物生物合成途径的糖基转移酶基因DsUGT11展开研究,通过生物信息分析、基因克隆、原核表达等技术解析其编码蛋白的功能。方法利用生物信息分析法分析和预测DsUGT11的序列特征和可能的生物功能,从新鲜叶片中提取RNA并反转录成cDNA,从中扩增和克隆得到DsUGT11基因,并通过异源表达和体外酶促反应对其编码蛋白的功能进行验证。结果从广东金钱草的转录组中筛选鉴定了1个糖基转移酶基因DsUGT11,该基因的开放阅读框长度为1426 bp,编码蛋白分子量52.14 KDa。生物信息结果表明DsUGT11具有UGT家族特有的“PSPG”的保守基序。本研究成功扩增得到DsUGT11并将其克隆至原核表达载体pMALc5X中,接着成功诱导得到重组蛋白。体外酶促反应结果表明,DsUGT11可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成3种化合物,包括芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(又称大波斯菊苷,Apigetrin)和两个未知化合物。结论本研究成功从广东金钱草中鉴定并克隆了DsUGT11基因,其编码蛋白是一个黄酮-氧糖苷转移酶,可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成大波斯菊苷等3种产物。
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关键词
广东金钱草
糖基转移酶
生物信息分析
原核表达
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职称材料
题名
广东金钱草糖基转移酶基因DsUGT11的克隆和功能分析
被引量：
1
1
作者
黎馥瑜
谢纯珠
詹亭
何嘉琪
马宏亮
郑夏生
机构
广州中医药大学中药学院
广州中医药大学第一附属医院
中山市中智药业集团有限公司
出处
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2024年第6期1553-1562,共10页
基金
国家自然科学基金委员会青年基金项目(81903741):龙脑樟中右旋龙脑生物合成关键酶基因BPPS的鉴定和功能研究,负责人:郑夏生。
文摘
目的对广东金钱草中参与黄酮类化合物生物合成途径的糖基转移酶基因DsUGT11展开研究,通过生物信息分析、基因克隆、原核表达等技术解析其编码蛋白的功能。方法利用生物信息分析法分析和预测DsUGT11的序列特征和可能的生物功能,从新鲜叶片中提取RNA并反转录成cDNA,从中扩增和克隆得到DsUGT11基因,并通过异源表达和体外酶促反应对其编码蛋白的功能进行验证。结果从广东金钱草的转录组中筛选鉴定了1个糖基转移酶基因DsUGT11,该基因的开放阅读框长度为1426 bp,编码蛋白分子量52.14 KDa。生物信息结果表明DsUGT11具有UGT家族特有的“PSPG”的保守基序。本研究成功扩增得到DsUGT11并将其克隆至原核表达载体pMALc5X中,接着成功诱导得到重组蛋白。体外酶促反应结果表明,DsUGT11可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成3种化合物,包括芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(又称大波斯菊苷,Apigetrin)和两个未知化合物。结论本研究成功从广东金钱草中鉴定并克隆了DsUGT11基因,其编码蛋白是一个黄酮-氧糖苷转移酶,可以催化底物2-OH-柚皮素和UDP-葡萄糖生成大波斯菊苷等3种产物。
关键词
广东金钱草
糖基转移酶
生物信息分析
原核表达
Keywords
Desmodium styracifolia
Glycosyltransferase
Bioinformation analysis
Prokaryotic expression
分类号
R-058 [医药卫生]
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出处
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1
广东金钱草糖基转移酶基因DsUGT11的克隆和功能分析
黎馥瑜
谢纯珠
詹亭
何嘉琪
马宏亮
郑夏生
《世界科学技术-中医药现代化》
CSCD
北大核心
2024
1
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