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大型箱梁梁上运架受压箱梁受力性能现场监测
1
作者 王建强 朱广杰 谢明权 《铁道工程学报》 北大核心 2025年第1期56-63,共8页
研究目的:杭甬高速复线宁波段一期工程S1标段采用大型预应力混凝土箱梁(50 m/1650 t),箱梁使用YL1800型运梁车和JQ1800型架桥机进行梁上运架施工。由于受到待架设箱梁和运架设备的共同作用,下部受压箱梁的受力性能和安全性受到重视。为... 研究目的:杭甬高速复线宁波段一期工程S1标段采用大型预应力混凝土箱梁(50 m/1650 t),箱梁使用YL1800型运梁车和JQ1800型架桥机进行梁上运架施工。由于受到待架设箱梁和运架设备的共同作用,下部受压箱梁的受力性能和安全性受到重视。为研究大型箱梁在梁上运架施工过程中下部受压箱梁的受力性能,评价梁上运梁施工方案的安全性,对梁上运架施工过程中下部受压箱梁进行现场监测和有限元分析。研究结论:(1)大型箱梁在运架施工过程中,下部受压箱梁跨中截面沿纵向顶板和底板均处于受压状态,沿横向顶板处于受压状态,底板中部受拉,两侧受压,且受压箱梁的挠度较小;(2)架桥机中支腿支撑处下部受压箱梁顶板和底板沿纵向、横向均处于受压状态;(3)大型箱梁在运架施工过程中下部受压箱梁的受力和变形满足规范要求,该梁上运架施工方案安全可行;(4)本研究成果可为大型箱梁的运架施工提供参考与借鉴。 展开更多
关键词 大型箱梁 梁上运架 受力性能 现场监测 有限元分析
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免疫增强剂对鸡球虫免疫保护力的作用 被引量：23
2
作者 谢明权 李繁 +5 位作者 林辉环 张健騑 吴惠贤 蔡建平 彭新宇 魏文康 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期93-99,共7页
选取免疫增强剂卡介苗 (BCG)与黄芪多糖 (APS)以比较不同用法、不同攻虫强度下其增强鸡球虫免疫保护力的效果。结果表明 :BCG和APS均具有明显的免疫促进作用 ,能更有效地抵抗 5万和 2 5万E .Tenella卵囊的攻击 ,但BCG效果优于APS ;BCG和... 选取免疫增强剂卡介苗 (BCG)与黄芪多糖 (APS)以比较不同用法、不同攻虫强度下其增强鸡球虫免疫保护力的效果。结果表明 :BCG和APS均具有明显的免疫促进作用 ,能更有效地抵抗 5万和 2 5万E .Tenella卵囊的攻击 ,但BCG效果优于APS ;BCG和APS大剂量或重复使用效果均不理想 ;BCG的最佳使用方法为 :以 0 0 2 5ml/只的剂量于球虫免疫前 7d使用 1次。 展开更多
关键词 免疫增强剂 免疫保护力 鸡 球虫 作用 卡介苗 黄芪多糖
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EnMIC2重组减毒沙门氏菌的构建及免疫保护效果研究 被引量：14
3
作者 谢明权 覃宗华 +4 位作者 蔡建平 艾哈迈德 彭新宇 魏文康 吴惠贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期705-710,共6页
成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDSPAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6%,分子量大小约为35ku,与抗E.necatrix... 成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDSPAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6%,分子量大小约为35ku,与抗E.necatrix的高免血清进行WesternBlotting,结果为阳性。将重组减毒沙门氏菌以108和109CFU/鸡免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后2周血清中可检测到特异性IgG,3周时抗体水平达到峰值,同时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫接种后3周,试验鸡分别经口攻击感染500个E.necatrix(GD)孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;但108和109CFU免疫组的卵囊总产量分别能降低26.62%和48.92%。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 微线蛋白-2 减毒沙门氏菌 免疫保护
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聚醚类抗生素抗球虫药交叉抗药性研究 被引量：15
4
作者 谢明权 彭新宇 +2 位作者 魏文康 吴惠贤 温列娜 《广东农业科学》 CAS CSCD 1999年第1期38-41,共4页
从广东分离的４个Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ野外株ＧＤ、ＪＭ、ＹＦ、ＭＺ株，分别对４种聚醚类抗生素———马杜拉霉素、盐霉素、拉萨洛素、森杜拉霉素进行了药物敏感性试验。结果表明，敏感对照虫株ＧＤ株除对盐霉素轻微抗药外，对... 从广东分离的４个Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ野外株ＧＤ、ＪＭ、ＹＦ、ＭＺ株，分别对４种聚醚类抗生素———马杜拉霉素、盐霉素、拉萨洛素、森杜拉霉素进行了药物敏感性试验。结果表明，敏感对照虫株ＧＤ株除对盐霉素轻微抗药外，对其他３种聚醚类抗生素均表现敏感；而ＪＭ、ＹＦ、ＭＺ株则对４种聚醚类抗生素表现强抗药性。并对４种聚醚类抗生素之间的交叉抗药性进行了分析，提出一价离子载体药物的轻微抗药性不引起同价或异价药物产生抗药性，但聚醚类抗球虫药强抗药虫株将会引起一价之间或一价与二价之间出现交叉抗药性。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 聚醚类抗生素 交叉抗药性
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细胞培养筛选抗球虫剂程序的研究 被引量：8
5
作者 谢明权 谢宏料 +3 位作者 吴惠贤 彭新宇 魏文康 温列娜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期278-283,共6页
本文作者在Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ细胞培养模型上研究了评价抗球虫剂的程序，包括投药时间、效果评定指标、药物有效浓度及毒性浓度、细胞培养有效浓度及鸡体中使用浓度之相关性等内容。试验结果表明药物溶剂影响药物效能的发挥。... 本文作者在Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ细胞培养模型上研究了评价抗球虫剂的程序，包括投药时间、效果评定指标、药物有效浓度及毒性浓度、细胞培养有效浓度及鸡体中使用浓度之相关性等内容。试验结果表明药物溶剂影响药物效能的发挥。投药于球虫培养全期比其他几种投药时间更能准确地评价各种药物的效果。药物评价的指标，除子孢子的活力及裂殖体形成数量之外，卵囊形成数量更能显示出药物的作用效果。本试验确定的药物筛选程序为，用鸡肾原代细胞培养Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ，使药物充分溶解后与子孢子一起接入细胞，培养至试验结束。 展开更多
关键词 抗球虫药 药物筛选 球虫 体外培养
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柔嫩艾美尔球虫裂殖子免疫原性的研究 被引量：12
6
作者 谢明权 吴惠贤 +1 位作者 张健 彭新宇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期340-345,共6页
本文评价了柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子的免疫原性。试验采用弗氏完全佐剂乳化的裂殖子抗原及从组织中分离得的活游离裂殖子，以不同剂量在不同时间接种健康小鸡，随后用同源球虫进行攻击。效果评价指标为：（１）比较各抗原组的鸡只死... 本文评价了柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子的免疫原性。试验采用弗氏完全佐剂乳化的裂殖子抗原及从组织中分离得的活游离裂殖子，以不同剂量在不同时间接种健康小鸡，随后用同源球虫进行攻击。效果评价指标为：（１）比较各抗原组的鸡只死亡率及盲肠病变记分；（２）各抗原组鸡只的增重差异。结果表明，柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子抗原不能刺激鸡体产生保护性免疫力；具有活力的裂殖子接种于健康鸡盲肠能诱发部分免疫力，但较自然感染者为弱。本研究揭示了柔嫩艾美尔球虫裂殖子的免疫原性，为进一步研制疫苗提供了依据。 展开更多
关键词 裂殖子 免疫原性 艾美尔球虫 鸡病
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Enramycin在鸡体内残留分析研究 被引量：6
7
作者 谢明权 吴惠贤 +2 位作者 张健 张福权 温列娜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期181-185,共5页
本文报道了Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ在鸡体内的残留分析结果。供分析的组织经胃蛋白酶消化，甲醇及盐酸混合液抽提，ＸＡＤ－２柱分离杂质、薄层层析及枯草杆菌ＡＴＣＣ６６３３生物显像，进行定性及定量分析。此法在肝、肾、肌肉、脂肪组织... 本文报道了Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ在鸡体内的残留分析结果。供分析的组织经胃蛋白酶消化，甲醇及盐酸混合液抽提，ＸＡＤ－２柱分离杂质、薄层层析及枯草杆菌ＡＴＣＣ６６３３生物显像，进行定性及定量分析。此法在肝、肾、肌肉、脂肪组织和血中Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ的回收率分别为５７．７０％、４６．６５％、１４．８０％、３９．３５％及４６．６０％，其敏感度为２５ｐｐｂ。测试样来自喂饲１０ｐｐｍＥｎｒａｌｎｙｃｉｎ８周的试验鸡，分别于停药后０、２４、４８ｈ取样。采用上述方法进行分析，结果显示即使停药后立即采样，组织抽提物均不出现Ｅｎｒａｍｙｃｉｎ抑菌圈，说明其残留量低于２５ｐｐｂ。 展开更多
关键词 鸡组织 Enramycin残留分析 薄层层析 生物显像
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Eimeria tenella第二代裂殖子在细胞中继续发育的研究 被引量：3
8
作者 谢明权 吴惠贤 +3 位作者 谢宏料 魏文康 彭新宇 张健騑 《广东农业科学》 CAS CSCD 2000年第6期47-48,共2页
从E .tenella球虫细胞培养中分离出第二代裂殖子 ,接入新培养的鸡肾原代胞 ,结果显示 ,培养至第五天 ,可见大量裂殖体和裂殖子 ,且延续至第九天。由于该球虫每代裂殖阶段仅需 2天 。
关键词 球虫 细胞培养 裂殖子 寄生虫 孢子虫
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消毒剂在不同季节的消毒效果研究 被引量：1
9
作者 谢明权 吴惠贤 +3 位作者 彭新宇 谢宏料 魏文康 温列娜 《广东农业科学》 CAS CSCD 1998年第2期43-44,共2页
用消毒灵（复合酚）、长效清（复方甲醛）、消毒劲（碘制剂）、菌毒净（氯制剂）等４种不同类型的消毒剂进行不同季节的消毒效果试验。结果表明，菌毒净在一年四季的有效期均不超过２４小时，消毒灵四季的有效期分别为９６、７２、９６... 用消毒灵（复合酚）、长效清（复方甲醛）、消毒劲（碘制剂）、菌毒净（氯制剂）等４种不同类型的消毒剂进行不同季节的消毒效果试验。结果表明，菌毒净在一年四季的有效期均不超过２４小时，消毒灵四季的有效期分别为９６、７２、９６、４８小时，长效清四季的有效期分别为１６８、１６８、１６８、９６小时，消毒劲四季的有效期分别为７２、７２、７２、１２０小时。并提出了不同季节使用消毒剂的方法和措施。 展开更多
关键词 消毒剂 季节 消毒效果 兽用药
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鳖病防治药物的筛选及应用研究
10
作者 谢明权 吴惠贤 +5 位作者 魏文康 彭新宇 温列娜 曾文坛 邱玉明 徐逸文 《广东农业科学》 CAS CSCD 1998年第5期40-42,共3页
选择１２种药物对１１株气单胞菌进行敏感性试验，筛选出敏感药物进行毒性和蓄积毒性试验、培苗和成鳖养殖试验。结果表明，鳖适平、健鳖灵可有效防治鳖气单胞菌病，提高养鳖的成活率，效果比常用药物呋喃唑酮等好，而且对幼鳖安全。
关键词 鳖病 气单胞菌 药物筛选
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养鳖场防疫与操作规程
11
作者 谢明权 魏文康 +2 位作者 吴惠贤 彭新宇 温列娜 《科学养鱼》 1999年第8期29-30,共2页
关键词 鳖 养鳖场 防疫 操作规程
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猪附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和系统进化分析 被引量：23
12
作者 张浩吉 谢明权 +3 位作者 张健騑 覃宗华 顾万军 蔡建平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期596-601,共6页
从确诊为猪附红细胞体感染的猪场,无菌采集血样,抽提猪附红细胞体基因组DNA,采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增,对扩增产物进行克隆和测序。从3 个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1 469 bp的核苷酸序列。系统进化分析表... 从确诊为猪附红细胞体感染的猪场,无菌采集血样,抽提猪附红细胞体基因组DNA,采用真细菌的通用引物进行16S rRNA基因扩增,对扩增产物进行克隆和测序。从3 个地理位置不同的猪场均成功地扩增出长度为1 469 bp的核苷酸序列。系统进化分析表明,3个猪场样品所测序列一致性达99 52%以上,具有相同的基因型,但与国外报道的猪附红细胞体Illinois株同源性为95%,属于同一基因群,但基因型不同;所有种类的附红细胞体和血巴尔通氏体组成同一进化分支,这类血营养菌与支原体科,支原体属的病原最靠近(75%),而与立克次氏体目的病原较远(70%)。上述研究证实,广东所流行的猪附红细胞体是一种新基因型的猪附红细胞体,建议命名为猪附红细胞体广东株型;为反映进化关系,猪附红细胞体和其它血营养菌应划归于支原体科的支原体属。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 系统进化分析 rRNA基因 16S 序列测定 附红细胞体感染 基因组DNA 核苷酸序列 立克次氏体 支原体 基因型 通用引物 基因扩增 扩增产物 地理位置 进化关系 猪场 真细菌 分析表 一致性 同源性 基因群 体组成
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鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病鉴别诊断双重PCR方法的建立和应用 被引量：37
13
作者 覃宗华 蔡建平 +4 位作者 吕敏娜 余劲术 吴彩艳 温列娜 谢明权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期517-521,共5页
本研究从鸭疫里默氏菌提取基因组DNA,采用细菌16S rRNA基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏菌的部分16S rRNA基因,克隆及测序结果表明其全长1 512 bp,G+C含量为51%,该序列已登入GenBank,登录号为DQ078779。同时利用生物软件对... 本研究从鸭疫里默氏菌提取基因组DNA,采用细菌16S rRNA基因的通用引物,用PCR方法成功扩增出鸭疫里默氏菌的部分16S rRNA基因,克隆及测序结果表明其全长1 512 bp,G+C含量为51%,该序列已登入GenBank,登录号为DQ078779。同时利用生物软件对GenBank收录的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的16S rRNA基因序列进行分析后,设计了鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的种特异性引物,分别能从各自的16S rRNA基因中扩增出长度为342和718 bp的DNA片段。并据此建立了一种能快速准确鉴别诊断鸭疫里默氏菌和大肠杆菌病的双重PCR方法,该方法能从肝脏组织悬液煮沸后的上清、细菌培养物或提取的细菌基因组DNA中快速扩增出相应的片段,进行鉴别诊断。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏菌 大肠杆菌 16S RRNA 鉴别诊断
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柔嫩艾美耳球虫野外抗药性虫株的RAPD分析 被引量：12
14
作者 李安兴 蔡建平 +2 位作者 谢明权 吴惠贤 廖翔化 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期299-303,共5页
用RAPD方法对柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)的 8个分别来源于黑龙江、北京、四川、甘肃和广东的中山、新会、东莞以及广州近郊的江村镇的野外分离虫株和 2个药物敏感性虫株进行了遗传多态性分析。同时用 9种抗球虫药物即马杜霉素 (5m... 用RAPD方法对柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)的 8个分别来源于黑龙江、北京、四川、甘肃和广东的中山、新会、东莞以及广州近郊的江村镇的野外分离虫株和 2个药物敏感性虫株进行了遗传多态性分析。同时用 9种抗球虫药物即马杜霉素 (5mg/kg)、盐霉素 (6 0mg/kg)、莫能霉素 (12 0mg/kg)、拉沙菌素 (90mg/kg)、克球多(15 0mg/kg)、常山酮 (3mg/kg)、氯氢苯乙氰 (1mg/kg)、尼卡巴嗪 (12 5mg/kg)和球痢灵 (12 5mg/kg)分别对 8个野外虫株进行抗药性试验 ,8个虫株对上述药物均有不同程度的抗药性。RAPD分析表明 :10个样品都有相似而清晰的主带 ,每个泳道有 5～ 13条带不等 ,大小为 0 18～ 2 10kb。它们之间的相似率 (SI)大于 4 0 5 8% ,最大的为90 72 % ,这种相似率属种内变异水平。根据SI值可把 10个样品划分为 3个类群 :广东虫株类群 ,群内比较 ,平均SI值为 76 6 0 % ;广东省外虫株类群 ,群内比较的平均SI值为 72 14 % ;敏感株类群 ,其间的SI值为 89 2 7%。在另一方面 ,广东株与广东省外株、敏感株之间比较 ,其SI的平均值分别仅为 6 3 0 3%和 4 7 2 5 % 。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 野外抗药性虫株 RAPD分析 鸡球虫
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米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性 被引量：8
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作者 柯野 陈丹 +2 位作者 李家洲 谢明权 罗晓春 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期88-94,共7页
米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及... 米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及大豆和花生蛋白的水解试验.结果显示:在10 L发酵罐中诱导表达时,发酵液中重组碱性蛋白酶的酶活达4100U/mL;该蛋白酶最适反应pH值和温度分别为8.5～9.5和50℃,在pH值为6.0～10.0和温度低于40℃时具有较好的稳定性;该酶具有广泛的肽键选择性;该酶对大豆和花生蛋白显示出了强于部分商品化蛋白酶的水解能力.以上结果表明:该重组蛋白酶具有较大的开发利用潜力. 展开更多
关键词 米曲霉 重组碱性蛋白酶 毕赤酵母 克隆 表达 水解特性
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球虫细胞培养影响因素探讨 被引量：14
16
作者 张健騑 谢明权 +2 位作者 彭新宇 吴惠贤 魏文康 《广东农业科学》 CAS CSCD 1999年第5期46-47,共2页
采用球虫体外培养模型，以新产生的卵囊数量来评价培养基的ｐＨ 值和单项维生素对球虫在体外发育的影响。结果显示，球虫在体外培养条件下，培养基的ｐＨ 值在６ ．０ —８ ．０ 的范围内能完成整个生活史，但ｐＨ 为７ ．４ 时最有利... 采用球虫体外培养模型，以新产生的卵囊数量来评价培养基的ｐＨ 值和单项维生素对球虫在体外发育的影响。结果显示，球虫在体外培养条件下，培养基的ｐＨ 值在６ ．０ —８ ．０ 的范围内能完成整个生活史，但ｐＨ 为７ ．４ 时最有利于卵囊的产生。在培养基中加入叶酸，能明显提高球虫的卵囊数（ Ｐ＜ ０ ．０５） ，ＶＢ６ 、ＶＢ１ 也能在不同程度上提高卵囊数，其他供试的单项维生素（Ｂ２ 、烟酸、胆碱） 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 细胞培养 维生素 PH值
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RT-PCR快速检测口蹄疫病毒 被引量：12
17
作者 娄高明 杜伟贤 +3 位作者 杨傲冰 周秀蓉 张春红 谢明权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期308-311,共4页
根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ... 根据口蹄疫病毒VP1基因的序列 ,设计了 1对引物 ,建立了检测口蹄疫病毒的RT -PCR方法。对FMDV各毒株检测 ,结果均为阳性 ,而对猪病毒性疾病相关病毒进行检测 ,结果均为阴性 ;检测 19份已知阳性样品 ,检出率 10 0 % ;与动物接种试验比较 ,符合率 10 0 % ,证明该方法特异。与经典方法动物接种试验比较 ,其灵敏度提高10 0倍左右 ;对O3I3株的细胞毒进行检测 ,其敏感度达 10个TCID50 。初步结果表明所建立的RT 展开更多
关键词 RT-PCR 快速检测 口蹄疫病毒
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不同表达条件对Eimeria tenella丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶活性的影响 被引量：7
18
作者 孙铭飞 覃宗华 +5 位作者 谢明权 袁建丰 吕敏娜 余劲术 吴彩艳 蔡建平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1158-1165,共8页
为探讨不同原核表达载体、不同表达温度对重组表达Eimeria tenella丙二酸单酰辅酶A:ACP转移酶活性的影响,以生物信息学技术预测的E.tenellaⅡ型脂肪酸合成代谢途径中的丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶(Et-MCAT)编码序列为基础,分别设计引物... 为探讨不同原核表达载体、不同表达温度对重组表达Eimeria tenella丙二酸单酰辅酶A:ACP转移酶活性的影响,以生物信息学技术预测的E.tenellaⅡ型脂肪酸合成代谢途径中的丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶(Et-MCAT)编码序列为基础,分别设计引物扩增完整ORF,采取截除信号肽而保留转导肽以及切除信号肽和转导肽的不同策略,选择pMAL-c2x、pET-32a(+)和pProExHTa3种不同表达载体分别构建重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosseta(DE3)后,在不同条件下诱导表达,利用酮戊二酸脱氢酶(KDH)偶联系统测定表达产物的酶活性,以评价不同表达策略对表达效果和表达产物活性的影响。表达水平和酶活性分析结果显示,惟切除信号肽和转导肽后的功能蛋白编码区能表达,Rosseta(DE3)/pMAL-c2x-mcat体系的可溶性表达量高于Rosseta(DE3)/pET-32a(+)-mcat,但二者表达产物的酶活性相似,且均随着诱导温度的降低其可溶性蛋白表达量增加。但Rosseta(DE3)/pProExHTa-mcat体系仅能表达不溶性蛋白,且复性后无酶活性,改变诱导温度对表达效果无明显影响。结果表明不同表达载体和诱导温度对大肠杆菌所表达EtMCAT的活性及其表达形式有显著影响,其中融合标签和表达温度可能是主要的影响因素,包涵体表达的重组酶即使复性处理仍难达到酶活性分析的要求。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 丙二酰单酰辅酶A:ACP转移酶 表达载体 酶活性
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基于序贯设计的毛霉AS3.2778发酵产蛋白酶工艺优化 被引量：10
19
作者 潘进权 罗晓春 +1 位作者 王菊芳 谢明权 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期481-485,共5页
本研究主要就毛霉AS3.2778固体发酵的工艺条件进行了探讨,利用序贯设计这一数学工具对影响产酶的若干因素进行了优化,并最终确立了相对稳定的发酵工艺条件。结果表明,每250ml三角瓶装8g麸皮,其中添加1.23%麦芽糖,1.56%蛋白胨,0.74%KH2PO... 本研究主要就毛霉AS3.2778固体发酵的工艺条件进行了探讨,利用序贯设计这一数学工具对影响产酶的若干因素进行了优化,并最终确立了相对稳定的发酵工艺条件。结果表明,每250ml三角瓶装8g麸皮,其中添加1.23%麦芽糖,1.56%蛋白胨,0.74%KH2PO4,0.06% FeSO4·7H2O作为辅助营养物,培养基的起始含水量为每克麸皮添加0.79ml水,发酵温度24.1℃,时间48h。在优化的工艺条件下,每克干基可发酵产酶1541U,是起始发酵单位的202%。 展开更多
关键词 雅致放射毛霉 蛋白酶 固体发酵 序贯设计
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雅致放射毛霉AS3.2778碱性蛋白酶的纯化及水解特性 被引量：12
20
作者 潘进权 罗晓春 谢明权 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期106-111,共6页
毛霉蛋白酶可以高效地水解大豆蛋白,而且对蛋白水解物具有良好的脱苦效果.为了开发这一蛋白酶系,采用离子交换、疏水层析及凝胶层析等方法,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一蛋白酶组分,并对其水解特性进行了探讨.结果显... 毛霉蛋白酶可以高效地水解大豆蛋白,而且对蛋白水解物具有良好的脱苦效果.为了开发这一蛋白酶系,采用离子交换、疏水层析及凝胶层析等方法,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中分离纯化出一蛋白酶组分,并对其水解特性进行了探讨.结果显示：纯化后的蛋白酶是一单体蛋白,其相对分子质量大约为32000;该蛋白酶在55℃、pH8.0-10.0的条件下对大豆蛋白显示出较强的水解能力,其水解效果明显优于商品化的蛋白酶（如木瓜蛋白酶、Alcalase及Protamex）,表明该蛋白酶比以上几种商品化蛋白酶具有更广泛的肽键选择性,对大豆蛋白亲和力更强,在大豆蛋白肽链上有相对较多的酶切位点. 展开更多
关键词 雅致放射毛霉 蛋白酶 纯化 水解
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