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SELEX技术中ssDNA文库PCR扩增条件的优化
被引量：
5
1
作者
曹立亭
许李丽
+2 位作者
万向
王秋菊
马跃
《安徽农业科学》
CAS
2012年第6期3241-3242,3297,共3页
[目的]对SELEX技术中ssDNA文库的PCR扩增条件进行优化。[方法]采用L16(45)正交试验设计在4个水平上对影响单链随机DNA文库PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶含量、引物浓度和随机单链DNA文库量5个重要因素进行了优化,同时...
[目的]对SELEX技术中ssDNA文库的PCR扩增条件进行优化。[方法]采用L16(45)正交试验设计在4个水平上对影响单链随机DNA文库PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶含量、引物浓度和随机单链DNA文库量5个重要因素进行了优化,同时对PCR反应的退火温度和循环次数进行了优化,确立最优反应体系和扩增程序。[结果]20μlPCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为:10×Buffer2.0μl,随机ssDNA文库0.5ng,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.25mmol/L,上下游引物各0.6μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U;退火温度为68℃,最佳循环数为12。此反应系统下,随机ssDNA文库PCR扩增谱带清晰、稳定、特异性高。[结论]为SELEX技术中筛选到特异性更强的适配子奠定了基础。
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关键词
随机单链DNA文库
正交试验设计
PCR
体系优化
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职称材料
仔兔的科学饲养管理方法
2
作者
罗红秀
税青全
+3 位作者
周莉
许李丽
邓玲玲
李想
《中国畜禽种业》
2021年第11期104-105,共2页
仔兔根据自身生理发育特点可划分为睡眠期和开眼期,睡眠期仔兔唯一的营养来源为母兔乳汁,仔兔新陈代谢旺盛,所摄入的乳汁大多可消化吸收,排便量少,饲养原则为“吃足乳、睡好觉”;开眼期仔兔要从吮乳向采食植物性饲料过渡,需要搭配均衡...
仔兔根据自身生理发育特点可划分为睡眠期和开眼期,睡眠期仔兔唯一的营养来源为母兔乳汁,仔兔新陈代谢旺盛,所摄入的乳汁大多可消化吸收,排便量少,饲养原则为“吃足乳、睡好觉”;开眼期仔兔要从吮乳向采食植物性饲料过渡,需要搭配均衡的营养,饲养原则为“补好料、断好奶”。本文对仔兔生理特点、死亡原因和饲养管理方法进行概述,供同行交流借鉴。
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关键词
仔兔
生理特点
死亡原因
科学饲养
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职称材料
题名
SELEX技术中ssDNA文库PCR扩增条件的优化
被引量：
5
1
作者
曹立亭
许李丽
万向
王秋菊
马跃
机构
西南大学荣昌校区动物医学系
出处
《安徽农业科学》
CAS
2012年第6期3241-3242,3297,共3页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(XDJK2011C026)
西南大学博士基金(09BSR04)
文摘
[目的]对SELEX技术中ssDNA文库的PCR扩增条件进行优化。[方法]采用L16(45)正交试验设计在4个水平上对影响单链随机DNA文库PCR反应体系的Mg2+浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶含量、引物浓度和随机单链DNA文库量5个重要因素进行了优化,同时对PCR反应的退火温度和循环次数进行了优化,确立最优反应体系和扩增程序。[结果]20μlPCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为:10×Buffer2.0μl,随机ssDNA文库0.5ng,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.25mmol/L,上下游引物各0.6μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U;退火温度为68℃,最佳循环数为12。此反应系统下,随机ssDNA文库PCR扩增谱带清晰、稳定、特异性高。[结论]为SELEX技术中筛选到特异性更强的适配子奠定了基础。
关键词
随机单链DNA文库
正交试验设计
PCR
体系优化
Keywords
Random single-stranded DNA pool
Orthogonal experimental design
Polymerase chain reaction
System optimization
分类号
Q93-33 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
仔兔的科学饲养管理方法
2
作者
罗红秀
税青全
周莉
许李丽
邓玲玲
李想
机构
重庆市棊江区动物疫病预防控制中心
重庆市棊江区畜牧站
出处
《中国畜禽种业》
2021年第11期104-105,共2页
文摘
仔兔根据自身生理发育特点可划分为睡眠期和开眼期,睡眠期仔兔唯一的营养来源为母兔乳汁,仔兔新陈代谢旺盛,所摄入的乳汁大多可消化吸收,排便量少,饲养原则为“吃足乳、睡好觉”;开眼期仔兔要从吮乳向采食植物性饲料过渡,需要搭配均衡的营养,饲养原则为“补好料、断好奶”。本文对仔兔生理特点、死亡原因和饲养管理方法进行概述,供同行交流借鉴。
关键词
仔兔
生理特点
死亡原因
科学饲养
分类号
S829.1 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SELEX技术中ssDNA文库PCR扩增条件的优化
曹立亭
许李丽
万向
王秋菊
马跃
《安徽农业科学》
CAS
2012
5
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职称材料
2
仔兔的科学饲养管理方法
罗红秀
税青全
周莉
许李丽
邓玲玲
李想
《中国畜禽种业》
2021
0
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职称材料
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