虚拟标准病人实验系统的“三智”优化与教学实践

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作者 冯雪梅 王远婷 +2 位作者 倪雯雯 林茂辉 许伟榕 《实验室研究与探索》 北大核心 2025年第7期210-216,共7页

针对传统虚拟标准病人(VSP)系统交互实时性不足、引导精准性欠缺及评价维度单一等问题,应用人工智能技术,提出融合“三智”(智能交互、智能引导、智能评价)优化策略,构建了AI增强型虚拟病人(AI-VSP)实验系统。以上海交通大学医学院77名... 针对传统虚拟标准病人(VSP)系统交互实时性不足、引导精准性欠缺及评价维度单一等问题,应用人工智能技术,提出融合“三智”(智能交互、智能引导、智能评价)优化策略,构建了AI增强型虚拟病人(AI-VSP)实验系统。以上海交通大学医学院77名学生为对象,在胰腺癌鉴别诊断教学场景中进行教学实践,结果表明:AI-VSP系统在数智化病程模拟(满意度均值4.39,P<0.01)、交互式决策引导(满意度均值3.89,P<0.05)及多维度能力评估(满意度均值4.07,P<0.01)方面均具优势,并能显著提升学生临床思维能力与诊疗决策水平(满意度均值4.15,P<0.01)。AI-VSP系统为临床技能与思维训练领域提供了智慧化教学范式,后续可在此基础上可进一步改进并加以推广。 展开更多

关键词 人工智能 虚拟病人 胰腺癌 临床实训

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生物化学与分子生物学实验教学方法改革初探 被引量：17

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作者 许伟榕 程枫 +3 位作者 沈文红 张怡平 王保国 卢健 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2010年第11期125-127,共3页

生化与分子生物学实验是一门实践性很强的学科,对学生综合素质及创新能力的培养有着很重要的作用。以实验教学中心成立,学科整合为契机,通过优化实验内容,丰富教学手段,改进实验考评等方式对生化与分子生物学实验教学进行了系统的改进... 生化与分子生物学实验是一门实践性很强的学科,对学生综合素质及创新能力的培养有着很重要的作用。以实验教学中心成立,学科整合为契机,通过优化实验内容,丰富教学手段,改进实验考评等方式对生化与分子生物学实验教学进行了系统的改进与探索。经过初步的实践,调动了学生学习兴趣,提高学生分析、思考、解决问题能力,在学生的信息反馈调查中得到了良好的评价。 展开更多

关键词 生化与分子生物学 实验教学 教学改革

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PA317产生高滴度带有人TNF-α基因逆转录病毒的研究 被引量：17

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作者 胡亮 钱关祥 +3 位作者 沈文红 许伟榕 张腾飞 陈诗书 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第3期235-238,217,共5页

逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用,主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性。本文旨在探索建立一种合适的方法,能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细... 逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用,主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性。本文旨在探索建立一种合适的方法,能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细胞,建立产病毒的包装细胞株,结果表明:病毒载体滴度受包装培养液体积和胎牛血清浓度影响;包装细胞在32℃产生的病毒滴度比37℃高,而且比较稳定。产病毒包装细胞和被感染的靶细胞经PCR分析显示,被转染和被转导的细胞都有病毒基因的整合,而且包装细胞不会产生具有复制活性的逆转录病毒,因此能进一步用于临床研究。 展开更多

关键词 包装细胞 逆转录病毒 TNF-Α基因 高滴度 病毒载体 临床应用 转染 PA 基因转移技术 复制

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hVEGF基因工程生物膜对全层皮肤缺损创面愈合的影响 被引量：6

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作者 赵雷 王莉 +4 位作者 姜叙诚 郑林 张帆 赵涵芳 许伟榕 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1015-1018,共4页

目的探讨含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基... 目的探讨含人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜对大鼠全层皮肤缺损创面愈合的作用。方法在SD大鼠背部皮肤制作深达皮肤全层的正方形创面,实验组大鼠创面上覆含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜;对照组分别在大鼠创面上覆整合空质粒的成纤维细胞的生物膜、空白生物膜和仅覆切口膜。采用形态学和免疫组化方法,观察术后3、7、14、29 d实验组和对照组大鼠创面肉芽组织生长及创面愈合情况。结果在各时相实验组中新生的毛细血管数以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达均显著高于对照组(P<0.01),且VEGF表达与新生毛细血管数正相关。结论将含hVEGF重组质粒的成纤维细胞种植的基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,能使创面成纤维细胞持续、有效地表达VEGF,强有力地促进肉芽组织增生,有利于创面愈合。 展开更多

关键词 人血管内皮细胞生长因子 基因工程生物膜 肉芽组织 创伤愈合

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hVEGF基因工程生物膜对全层皮肤缺损创面中flt-1和TSP-1表达的影响

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作者 赵雷 王莉 +4 位作者 姜叙诚 郑林 张帆 赵涵芳 许伟榕 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期47-50,共4页

目的探讨人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因工程生物膜对创面组织fms样酪氨酸酶(flt-1)和血小板反应蛋白-1(TSP-1)表达的影响。方法建立hVEGF基因工程生物膜覆盖大鼠全层皮肤缺损创面的动物模型,将80只SD大鼠随机分为A、B、C、D四组,每... 目的探讨人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)基因工程生物膜对创面组织fms样酪氨酸酶(flt-1)和血小板反应蛋白-1(TSP-1)表达的影响。方法建立hVEGF基因工程生物膜覆盖大鼠全层皮肤缺损创面的动物模型,将80只SD大鼠随机分为A、B、C、D四组,每组20只,所有动物于背部制备皮肤全层缺损创面。A组:创面覆盖hVEGF基因工程生物膜和Tegaderm切口膜;B组:创面覆盖空白生物膜和Tegaderm切口膜,C组:创面覆盖含空质粒的成纤维细胞种植的生物膜和Tegaderm切口膜;D组:创面覆盖Tegaderm切口膜。采用免疫组化和图像分析的方法,观察各组在术后3、7、14、29d时创面中flt-1和TSP-1表达的情况。结果术后3、7、14d时,A组flt-1阳性细胞数显著高于B、C、D组(P<0.05或P<0.01);术后7、14、29d时A组创面中TSP-1表达显著低于B、C、D组(P<0.01)。结论将hVEGF基因工程生物膜覆盖于大鼠全层皮肤缺损创面,能使创面持续表达flt-1并抑制TSP-1表达,从而促进新生血管形成,有利于创面愈合。 展开更多

关键词 人血管内皮细胞生长因子 FLT-1 血小板反应蛋白 创面愈合

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肿瘤坏死因子基因转导肿瘤浸润淋巴细胞的初步研究及应用 被引量：2

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作者 丁健青 钱关祥 +11 位作者 李彪如 徐铿 朱佑明 胡亮 胡宝瑜 张腾飞 张希衡 徐荣婷 童善庆 许伟榕 陆德源 陈诗书 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期11-15,共5页

我们选用美国国立卫生院重组DNA咨询委员会批准的LN系列小鼠缺陷型逆转录病毒LXSN作为载体,对肿瘤坏死因子基因转导TIL进行了研究和初步的临床应用,实验结果显示,最佳转导时间为TIL分离培养后9-25d,即对数生长期间,同时,MOI值影响着转... 我们选用美国国立卫生院重组DNA咨询委员会批准的LN系列小鼠缺陷型逆转录病毒LXSN作为载体,对肿瘤坏死因子基因转导TIL进行了研究和初步的临床应用,实验结果显示,最佳转导时间为TIL分离培养后9-25d,即对数生长期间,同时,MOI值影响着转导效率,MOI值越大,转导效率越高.PCR及L929细胞的检测均表明了TNF基因的成功插入.一例胃癌肝转移患者初步临床应用的结果表明,TIL的高度特异性及治疗途径的选择和治疗方案的适宜对于提高疗效,减少TNF毒副反应起了一定作用. 展开更多

关键词 临床应用 TIL 肿瘤坏死因子 基因转导 肿瘤浸润淋巴细胞 初步研究 TNF基因 L929细胞 重组DNA PCR

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特异AT序列结合蛋白-1促进胰岛素样生长因子结合蛋白-2在K562细胞中的表达 被引量：1

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作者 乔福锋 蔡蓉 +2 位作者 蔡霞 许伟榕 卢健 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期169-176,共8页

探讨过表达特异AT序列结合蛋白-1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)核基质结合区(MAR)结合蛋白对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP2)基因表达的影响,并对其影响机制进行初步探索.首先用脂质体将SATB1的真核表达载体pcD... 探讨过表达特异AT序列结合蛋白-1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)核基质结合区(MAR)结合蛋白对胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP2)基因表达的影响,并对其影响机制进行初步探索.首先用脂质体将SATB1的真核表达载体pcDNA3.1-SATB1转染至K562细胞,通过6周G418的筛选获得阳性克隆,RT-PCR、实时PCR及Western印迹验证过表达情况,对阳性克隆细胞中IGFBP2的表达用RT-PCR、实时PCR及Western印迹方法进行检测;然后用RNAi的方法干扰阳性细胞中SATB1的表达后,同样用上述3种方法再次检测IGFBP2的表达状况;用生物信息学方法对IGFBP2基因进行MAR序列与SATB1结合位点搜索分析,寻找SATB1影响IGFBP2基因表达的机制.结果显示,在稳定转染的情况下,实验组K562-SATB1细胞与转染空载体pcDNA3.1的K562-3.1细胞和未转染细胞K562相比,IGFBP2 mRNA水平上调了近7倍,而蛋白水平变化不明显.RNA干扰后,IGFBP2的表达在mRNA水平也相应下调,蛋白水平的变化同样不明显.通过生物信息学分析发现,IGFBP2第1个内含子中可能存在2.5 kb MAR样序列,且MAR样序列上存在多个SATB1的潜在结合位点.综上所述,过表达SATB1可以使K562细胞中IGFBP2 mRNA表达水平提高,而且其调控机制可能与SATB1直接和IGFBP2基因中的MAR样序列结合有关. 展开更多

关键词 特异AT序列结合蛋白-1 核基质结合区 胰岛素样生长因子结合蛋白-2 K562细胞

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丝氨酸缺乏及p53调控肿瘤氧化应激的研究进展 被引量：1

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作者 张硕 徐冰聪 +2 位作者 陈立畅 王飞扬 许伟榕 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1839-1844,共6页

肿瘤细胞的快速增殖表现为以糖酵解为主要供能方式的能量代谢异常,肿瘤细胞的生物合成依赖丝氨酸。丝氨酸缺乏可导致肿瘤细胞氧化应激,激活p53基因促进肿瘤细胞的生存。丝氨酸缺乏与p53基因的关系为代谢靶向治疗肿瘤提供了新思路。本文... 肿瘤细胞的快速增殖表现为以糖酵解为主要供能方式的能量代谢异常,肿瘤细胞的生物合成依赖丝氨酸。丝氨酸缺乏可导致肿瘤细胞氧化应激,激活p53基因促进肿瘤细胞的生存。丝氨酸缺乏与p53基因的关系为代谢靶向治疗肿瘤提供了新思路。本文就丝氨酸缺乏与p53调节肿瘤细胞氧化应激的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 丝氨酸缺乏 P53 氧化应激

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微RNA调控肿瘤多药耐药机制的研究进展 被引量：1

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作者 张平辰 盛小楠 +2 位作者 林正钰 程雨龙 许伟榕 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期776-781,共6页

微RNA(mi RNA)作为真核生物重要的基因表达调控分子,是肿瘤耐药调控机制中的重要构成部分。mi RNA对靶基因的异常调控可以通过膜受体介导药物外排、药物靶点改变、细胞凋亡途径受阻、DNA修复能力改变等多种方式参与多药耐药调控机制。此... 微RNA(mi RNA)作为真核生物重要的基因表达调控分子,是肿瘤耐药调控机制中的重要构成部分。mi RNA对靶基因的异常调控可以通过膜受体介导药物外排、药物靶点改变、细胞凋亡途径受阻、DNA修复能力改变等多种方式参与多药耐药调控机制。此外,mi RNA调控肿瘤干细胞生长分化与通过激发保护性自噬来诱导多药耐药的研究领域也有重要进展。该文就mi RNA调控肿瘤细胞多药耐药机制的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 微RNA 肿瘤 多药耐药

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两种双标记细胞系的构建及其检测具复制能力逆转录病毒能力的比较

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作者 许旻 陆劲松 +2 位作者 许伟榕 钱关祥 陈诗书 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第3期199-203,共5页

本实验分别以逆转录病毒载体LXSN(含内启动子)和GCEN(含IRES元件)构建了含β-半乳糖苷酶基因(LacZ)和新霉素磷酸转移酶基因(Neo^R)的两种双标记细胞系LG-3T3和GG-3T3,并观察比较了两种细胞在标记拯救实验中检测有复制能力的逆转录病毒(R... 本实验分别以逆转录病毒载体LXSN(含内启动子)和GCEN(含IRES元件)构建了含β-半乳糖苷酶基因(LacZ)和新霉素磷酸转移酶基因(Neo^R)的两种双标记细胞系LG-3T3和GG-3T3,并观察比较了两种细胞在标记拯救实验中检测有复制能力的逆转录病毒(RCR)的灵敏度的差异,结果表明两种细胞系均可用于标记拯救,其中GG-3T3检测RCR的灵敏度比LG-3T3高100倍,为提高标记拯救实验的准确性打下了一定的基础. 展开更多

关键词 标记拯救 复制 逆转录病毒 基因疗法

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过表达PTPα促进K562细胞体外增殖能力和体内致瘤性

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作者 王红洁 蔡蓉 +4 位作者 李珂 许伟榕 乔福峰 郑新民 卢健 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期757-763,共7页

探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)... 探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)中PTPα的表达水平.根据检测结果,选择K562细胞作为研究对象,利用脂质体将PTPα真核表达载体转染K562细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western印迹验证过表达情况;经MTT法检测细胞增值能力的改变;用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞分化状态;并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠,观察PTPα基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力及瘤体的组织化学变化.上述实验结果表明,通过G418压力筛选获得了PTPα高表达多克隆细胞系K562-PTPα;经体外增殖实验分析,实验组K562-PTPα细胞与未转染组细胞K562和转染空载体组细胞K562-splice相比,细胞生长速度增快,G2/M期细胞比例增加(P<0.05),而细胞分化状态无明显变化;裸鼠体内致瘤实验显示,K562组、K562-splice组和K562-PTPα组平均瘤重分别为(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g和(2.5±0.5)g;病理切片显示,K562-PTPα组瘤体组织分化程度较对照组低、恶性程度高,细胞的致瘤能力增强(P<0.01).综上所述,过表达PTPα使K562细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤性,表明PTPα可能在造血系统恶性肿瘤的发生发展中发挥促进作用. 展开更多

关键词 蛋白质酪氨酸磷酸化 蛋白质酪氨酸磷酸酶α 人红白血病 K562细胞

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