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大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制
被引量：
14
1
作者
解泉源
赖卫华
+6 位作者
刘春梅
孙吉昌
邓省亮
刘成伟
魏华
游兴勇
熊勇华
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第16期353-357,共5页
目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双...
目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。
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关键词
大肠杆菌O157
H7
荧光微球
免疫层析法
试纸条
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职称材料
磁珠离子交换吸附法纯化兔血清中多克隆抗体的研究
被引量：
4
2
作者
熊齐荣
牛瑞江
+2 位作者
解泉源
熊勇华
赖卫华
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第13期259-263,共5页
以羧基化的超顺磁纳米磁珠作为离子交换吸附介质,建立一种新型的非层析离子交换吸附方法,用于对兔血清中抗副溶血弧菌多克隆抗体进行纯化。通过优化吸附、洗脱缓冲液pH值、盐离子浓度以及洗涤液Tween-20体积分数,确立磁珠离子交换吸附...
以羧基化的超顺磁纳米磁珠作为离子交换吸附介质,建立一种新型的非层析离子交换吸附方法,用于对兔血清中抗副溶血弧菌多克隆抗体进行纯化。通过优化吸附、洗脱缓冲液pH值、盐离子浓度以及洗涤液Tween-20体积分数,确立磁珠离子交换吸附纯化条件,并将该纯化方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法进行比较。结果表明:血清中的多克隆抗体能够在pH6.0的磷酸盐缓冲液(0.01mol/L)中被磁珠完全吸附,经过含0.1%Tween-20的洗涤液两次洗涤,能够达到较好的洗涤效果,用含0.3mol/L NaCl的磷酸盐缓冲液(pH8.0)可以将吸附的抗体洗脱;经该法纯化后,多抗纯度为82.6%,回收率为58.0%,效价为1/64000;每克磁珠可纯化10mL的血清,整个过程只需要1h。该方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法相比有明显的优势,因此具有较好的应用前景。
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关键词
磁珠
离子交换吸附
抗体纯化
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职称材料
题名
大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制
被引量：
14
1
作者
解泉源
赖卫华
刘春梅
孙吉昌
邓省亮
刘成伟
魏华
游兴勇
熊勇华
机构
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
无锡中德伯尔生物技术有限公司
江西省疾病预防控制中心
江西省科学院微生物研究所
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013年第16期353-357,共5页
基金
科技部科技支撑计划项目(2011BAK10B06-01)
文摘
目的:建立快速、灵敏检测大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条法。方法:以羧基化荧光微球作为标记物,共价偶联抗大肠杆菌O157:H7鼠源单克隆抗体,将大肠杆菌O157:H7兔多抗和驴抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜分别作为检测线和质控线,以双抗体夹心反应模式制备大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条。结果:通过优化实验确定偶联缓冲液为0.02mol/L pH5.0磷酸盐缓冲液,抗体偶联微球量为100μg/mg,试纸条可在加样5min后判读结果。制备的荧光微球试纸条对纯培养大肠杆菌O157:H7进行检测,肉眼观察检测限在1.2×104CFU/mL,借助荧光读取仪检测限能提高到6.1×103CFU/mL。试纸条除与金黄色葡萄球菌有微弱交叉反应外,与实验室保存的30株细菌无交叉反应。结论:大肠杆菌O157:H7荧光微球试纸条具有操作简便、快速灵敏、易于量化的特点,为该菌的检测提供了一种新型的手段。
关键词
大肠杆菌O157
H7
荧光微球
免疫层析法
试纸条
Keywords
Escherichia coli O157：H7
fluorescent microsphere
immunochromatography
strip
分类号
TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]
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职称材料
题名
磁珠离子交换吸附法纯化兔血清中多克隆抗体的研究
被引量：
4
2
作者
熊齐荣
牛瑞江
解泉源
熊勇华
赖卫华
机构
南昌大学食品科学与技术国家重点实验室
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011年第13期259-263,共5页
基金
科技部中小企业创新基金项目(10C26223601934)
文摘
以羧基化的超顺磁纳米磁珠作为离子交换吸附介质,建立一种新型的非层析离子交换吸附方法,用于对兔血清中抗副溶血弧菌多克隆抗体进行纯化。通过优化吸附、洗脱缓冲液pH值、盐离子浓度以及洗涤液Tween-20体积分数,确立磁珠离子交换吸附纯化条件,并将该纯化方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法进行比较。结果表明:血清中的多克隆抗体能够在pH6.0的磷酸盐缓冲液(0.01mol/L)中被磁珠完全吸附,经过含0.1%Tween-20的洗涤液两次洗涤,能够达到较好的洗涤效果,用含0.3mol/L NaCl的磷酸盐缓冲液(pH8.0)可以将吸附的抗体洗脱;经该法纯化后,多抗纯度为82.6%,回收率为58.0%,效价为1/64000;每克磁珠可纯化10mL的血清,整个过程只需要1h。该方法和辛酸-硫酸铵法、亲和层析法相比有明显的优势,因此具有较好的应用前景。
关键词
磁珠
离子交换吸附
抗体纯化
Keywords
magnetic beads
ion-exchange adsorption
antibody purification
分类号
R392.33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大肠杆菌O157:H7荧光微球免疫层析试纸条的研制
解泉源
赖卫华
刘春梅
孙吉昌
邓省亮
刘成伟
魏华
游兴勇
熊勇华
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2013
14
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
磁珠离子交换吸附法纯化兔血清中多克隆抗体的研究
熊齐荣
牛瑞江
解泉源
熊勇华
赖卫华
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
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职称材料
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