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一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究
被引量：
4
1
作者
陈坤
袁飞燕
+4 位作者
柴昊男
刘焕
王兴吉
张会图
路福平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期208-214,共7页
碱性蛋白酶广泛的应用价值及市场供不应求的现状,旨在构建碱性蛋白酶高效表达系统。通过蛋白电泳和质谱检测的方法,由地衣芽孢杆菌中筛选获得一种新型启动子p Chi,以两种已知强组成型启动子p Shuttle-09和pyxi E为对照,研究其对克劳氏...
碱性蛋白酶广泛的应用价值及市场供不应求的现状,旨在构建碱性蛋白酶高效表达系统。通过蛋白电泳和质谱检测的方法,由地衣芽孢杆菌中筛选获得一种新型启动子p Chi,以两种已知强组成型启动子p Shuttle-09和pyxi E为对照,研究其对克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶与地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的表达活性。成功构建了6种重组表达载体及重组菌,结果表明,p Chi的启动强度是p Shuttle-09的1.25倍,pyxi E的2倍,从而为介导枯草芽孢杆菌表达系统中异源基因的表达奠定基础。
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关键词
碱性蛋白酶
高效表达系统
启动子
异源表达
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职称材料
基于非天然结构组件的人工酶设计与应用
被引量：
1
2
作者
袁飞燕
于洋
李春
《合成生物学》
2020年第6期685-696,共12页
人工酶是由人类设计得到的具有类似天然酶活性的催化剂。人工酶设计可能成为天然酶研究的补充,揭示天然酶的催化机理,实现天然酶尚未实现的作用。酶由20种天然氨基酸残基以及有限种类的辅因子组成,限制了蛋白质可实现的结构、反应性和...
人工酶是由人类设计得到的具有类似天然酶活性的催化剂。人工酶设计可能成为天然酶研究的补充,揭示天然酶的催化机理,实现天然酶尚未实现的作用。酶由20种天然氨基酸残基以及有限种类的辅因子组成,限制了蛋白质可实现的结构、反应性和功能空间。通过在蛋白质中引入非天然结构组件,包括非天然氨基酸和非天然辅因子,可以得到具有较高催化活性或全新反应性的人工酶。本文总结了引入非天然氨基酸和非天然辅因子构建人工酶和高效制备此类人工酶的策略,并以参与氧化还原反应的人工金属酶为例,探讨构建人工酶的方法,包括通过基因密码子扩展技术引入含生物正交反应基团或金属螯合基团的非天然氨基酸,或通过非共价、共价相互作用在骨架蛋白中引入非天然金属卟啉和其他金属有机催化剂,展望了引入非天然结构组件结合计算设计或代谢工程构建人工酶的新方法,这有助于实现媲美天然酶效率的人工酶的设计与应用。
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关键词
人工酶设计
非天然氨基酸
非天然辅因子
引入策略
氧化还原反应
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职称材料
题名
一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究
被引量：
4
1
作者
陈坤
袁飞燕
柴昊男
刘焕
王兴吉
张会图
路福平
机构
工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院
山东隆科特酶制剂有限公司
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第1期208-214,共7页
基金
国家重点研发计划(2017YFB0308401)
文摘
碱性蛋白酶广泛的应用价值及市场供不应求的现状,旨在构建碱性蛋白酶高效表达系统。通过蛋白电泳和质谱检测的方法,由地衣芽孢杆菌中筛选获得一种新型启动子p Chi,以两种已知强组成型启动子p Shuttle-09和pyxi E为对照,研究其对克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶与地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的表达活性。成功构建了6种重组表达载体及重组菌,结果表明,p Chi的启动强度是p Shuttle-09的1.25倍,pyxi E的2倍,从而为介导枯草芽孢杆菌表达系统中异源基因的表达奠定基础。
关键词
碱性蛋白酶
高效表达系统
启动子
异源表达
Keywords
alkaline protease
efficient expression system
promoter
heterologous expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
基于非天然结构组件的人工酶设计与应用
被引量：
1
2
作者
袁飞燕
于洋
李春
机构
北京理工大学化学与化工学院生化工程系
出处
《合成生物学》
2020年第6期685-696,共12页
基金
国家重点研发计划(2018YFA0903300,2016YFA0502400)。
文摘
人工酶是由人类设计得到的具有类似天然酶活性的催化剂。人工酶设计可能成为天然酶研究的补充,揭示天然酶的催化机理,实现天然酶尚未实现的作用。酶由20种天然氨基酸残基以及有限种类的辅因子组成,限制了蛋白质可实现的结构、反应性和功能空间。通过在蛋白质中引入非天然结构组件,包括非天然氨基酸和非天然辅因子,可以得到具有较高催化活性或全新反应性的人工酶。本文总结了引入非天然氨基酸和非天然辅因子构建人工酶和高效制备此类人工酶的策略,并以参与氧化还原反应的人工金属酶为例,探讨构建人工酶的方法,包括通过基因密码子扩展技术引入含生物正交反应基团或金属螯合基团的非天然氨基酸,或通过非共价、共价相互作用在骨架蛋白中引入非天然金属卟啉和其他金属有机催化剂,展望了引入非天然结构组件结合计算设计或代谢工程构建人工酶的新方法,这有助于实现媲美天然酶效率的人工酶的设计与应用。
关键词
人工酶设计
非天然氨基酸
非天然辅因子
引入策略
氧化还原反应
Keywords
artificial enzymes design
unnatural amino acid
non-natural cofactor
introduction strategy
redox reaction
分类号
Q814.9 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种高效表达碱性蛋白酶的新型启动子的筛选及研究
陈坤
袁飞燕
柴昊男
刘焕
王兴吉
张会图
路福平
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
4
在线阅读
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职称材料
2
基于非天然结构组件的人工酶设计与应用
袁飞燕
于洋
李春
《合成生物学》
2020
1
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职称材料
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