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克诺罗杆菌检测用单克隆抗体的制备及功效评价被引量：2: 1; 作者袁辰刚杨海荣 +4 位作者杨捷琳吴杨陈颖潘良文何宇平《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期209-214,共6页; 目的:选择克诺罗杆菌标准菌株中的多株代表菌株作为抗原,采用多抗原组合免疫的方法,筛选制备抗克诺罗杆菌属(Cronobacter spp.)检测用单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并对获得的抗体进行各项指标评价,为进一步建立克诺罗杆菌免疫... 展开更多; 关键词克诺罗杆菌单克隆抗体快速检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

沙门氏菌快速测试片在食品检测中的初步应用研究被引量：2: 2; 作者袁辰刚韩伟 +1 位作者谢小珏顾鸣《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第1期293-298,共6页; 目的应用3M沙门氏菌SALX测试片法检测食品中的沙门氏菌。方法对67批自然样品,以及使用3个沙门氏菌标准菌株进行人工污染的20批样品,同时采用3M沙门氏菌SALX测试片法与国家标准方法GB 4789.4-2010进行检测并比较,评价3M SALX沙门氏菌测... 展开更多; 关键词沙门氏菌快速检测 3M沙门氏菌SALX测试片; 在线阅读下载PDF 职称材料

深度测序技术检测益生菌产品菌株组成及16SrDNA序列被引量：3: 3; 作者杨捷琳袁辰刚 +2 位作者窦同海丁小磊潘良文《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第20期241-245,共5页; 目的:探查益生菌制品的标签标示与产品中实际检测到的菌株比较及不同产品中菌株的异同性。方法:以市场上购买的进口、出口酸乳制品作为研究对象,设计可区别24种产品的样品标签序列(Barcode),通过PCR及Illumina平台深度测序分析,获得了... 展开更多; 关键词乳酸菌酸乳制品 16S RDNA 深度测序; 在线阅读下载PDF 职称材料

阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及活性研究被引量：10: 4; 作者杨捷琳孟逊 +2 位作者黄应峰袁辰刚朱崇日《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期213-217,共5页; 目的:利用pET质粒原核表达体系克隆、表达阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因,表达产物进行Ni-NTA柱纯化,利用α-葡萄糖苷酶分解4-硝基苯基-α-D-呋喃型葡萄糖的特性进行表达纯化合的蛋白活性鉴定,为进一步制备阪崎肠杆菌检测用单克隆抗体奠... 展开更多; 关键词阪崎肠杆菌 Α-葡萄糖苷酶克隆原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌被引量：1: 5; 作者申进玲赵丽娜 +2 位作者蒋原韩伟袁辰刚《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第7期1844-1852,共9页; 目的建立含内标的多重实时荧光PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法针对空肠弯曲菌特有hipO基因和结肠弯曲菌特有ceuE基因设计引物探针,设计并优化内标DNA添加量。测试了方法的特异性、灵敏度以及在鸡肉中的检出限。结果内标的... 展开更多; 关键词弯曲菌同步快速检测内部扩增对照; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名克诺罗杆菌检测用单克隆抗体的制备及功效评价被引量：2: 1; 作者袁辰刚杨海荣杨捷琳吴杨陈颖潘良文何宇平; 机构上海出入境检验检疫局中国检验检疫科学研究院上海友科生物科技有限公司; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期209-214,共6页; 基金国家自然科学基金青年基金项目(31101246) 上海市科委项目(11495810600 11dz0502700); 文摘目的:选择克诺罗杆菌标准菌株中的多株代表菌株作为抗原,采用多抗原组合免疫的方法,筛选制备抗克诺罗杆菌属(Cronobacter spp.)检测用单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并对获得的抗体进行各项指标评价,为进一步建立克诺罗杆菌免疫学快速检测方法创造条件。方法:采用冻融裂解、超声破碎、全颗粒三种方法制备抗原,以克诺罗杆菌标准菌株及分离菌株20株,9株非克诺罗杆菌进行筛选。筛选获得的抗体鉴定特异性,进行Ig亚类分型,测定效价及相对亲和力常数。结果:获得6株针对克诺罗杆菌的杂交瘤细胞株,腹水效价均在1∶107以上;相对亲和常数均大于1.0×1010L/mol。采用"鸡尾酒法"将多种抗体应用到胶体金试纸条制备上,可获得检测灵敏度为105CFU/mL,特异性较好的试纸条。结论:成功制备了针对克诺罗杆菌的多株单克隆抗体,抗体特异性检测表明,所制备的6株单克隆抗体针对克诺罗杆菌不同的亚种或亚型。利用单克隆抗体建立了抗原包被间接ELISA(ACP-ELISA)和胶体金试纸条检测阪崎肠杆菌的方法。为进一步开发阪崎肠杆菌的免疫检测试纸条,建立快速的检测方法创造条件。; 关键词克诺罗杆菌单克隆抗体快速检测; Keywords Cronobacter spp. monoclonal antibody detection; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名沙门氏菌快速测试片在食品检测中的初步应用研究被引量：2: 2; 作者袁辰刚韩伟谢小珏顾鸣; 机构上海出入境检验检疫局; 出处《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第1期293-298,共6页; 文摘目的应用3M沙门氏菌SALX测试片法检测食品中的沙门氏菌。方法对67批自然样品,以及使用3个沙门氏菌标准菌株进行人工污染的20批样品,同时采用3M沙门氏菌SALX测试片法与国家标准方法GB 4789.4-2010进行检测并比较,评价3M SALX沙门氏菌测试片法检测沙门氏菌的检测性能。结果 3M沙门氏菌SALX测试片法与国标法符合率达95.5%,各有1例假阳性和假阴性。结论 3M沙门氏菌SALX测试片法操作相对简便,稳定性好,与国标法有较高的符合率,作为一种新的沙门氏菌检测方法,仍需进一步积累检测数据。; 关键词沙门氏菌快速检测 3M沙门氏菌SALX测试片; Keywords Salmonella rapid detection 3M SALX PetrifilmTM detection method; 分类号 TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名深度测序技术检测益生菌产品菌株组成及16SrDNA序列被引量：3: 3; 作者杨捷琳袁辰刚窦同海丁小磊潘良文; 机构上海出入境检验检疫局复旦大学生命科学学院; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第20期241-245,共5页; 文摘目的:探查益生菌制品的标签标示与产品中实际检测到的菌株比较及不同产品中菌株的异同性。方法:以市场上购买的进口、出口酸乳制品作为研究对象,设计可区别24种产品的样品标签序列(Barcode),通过PCR及Illumina平台深度测序分析,获得了酸乳制品中所含益生菌种类及序列等详细信息,根据Barcode序列信息对其中所含的24个混合样本进行区分,然后利用16S RDP的16S数据库,对测序的Reads进行比对。结果:24种产品中标签标示与样品中实际检测到的菌株完全一致的仅有两种,在24种酸乳制品中,以嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌/德式乳杆菌为主要发酵菌株,双歧杆菌作为添加的益生菌基本在所有样品中存在,但含量较低,另一方面,不同产品中同一菌株的16S rDNA序列相似度较高,仅有两种菌株的1～2个碱基存在差异。结论:深度测序是一种可快速有效对食品中微生物群体精确筛查的技术,能够精确深入了解食品中微生物群落。使用溶方法检测目前市场上的酸乳制品,可发现使用的发酵菌种多来自商业化购买的菌剂,同质化程度较高,而作为后添加的双歧杆菌由于其生长条件的苛刻,实际活菌数量较低。; 关键词乳酸菌酸乳制品 16S RDNA 深度测序; Keywords lactic acid bacterial yoghurt 16S rDNA next-generation sequencing; 分类号 Q939.99 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及活性研究被引量：10: 4; 作者杨捷琳孟逊黄应峰袁辰刚朱崇日; 机构上海出入境检验检疫局宝船生物医药科技(上海)有限公司; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期213-217,共5页; 文摘目的:利用pET质粒原核表达体系克隆、表达阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因,表达产物进行Ni-NTA柱纯化,利用α-葡萄糖苷酶分解4-硝基苯基-α-D-呋喃型葡萄糖的特性进行表达纯化合的蛋白活性鉴定,为进一步制备阪崎肠杆菌检测用单克隆抗体奠定了基础。方法:从阪崎肠杆菌ATCC29544标准菌株中克隆获得阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因,连接pET22b(+)表达载体后转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,利用不同浓度的异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达外源基因,分别检测不同诱导时间、不同浓度IPTG作用下表达产物,筛选高表达菌株。表达菌株大量培养后,超声波及蛋白酶K作用破菌,Ni-NTA亲和柱纯化目的蛋白,纯化产物进行酶活性的测定。结果:克隆获得的α-葡萄糖苷酶基因与NCBI收录的基因序列属等位基因,核苷酸位点有多处差异,氨基酸序列也有不同。构建表达载体并诱导表达后,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测,目标蛋白相对分子质量约为65kD,与理论值相符。目标蛋白量约占菌体总蛋白量的18%。同时,由纯化结果可以看出,以500mmol/L咪唑洗脱时的纯化效果最理想,蛋白纯度可达90%以上。对表达产物进行过酶活性初步检测证明,重组的阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶能够分解4-硝基苯基-α-D-呋喃型葡萄糖,产生蓝绿色。结论:本研究中克隆获得了阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因,通过构建pET22b(+)-Glu表达质粒转化大肠杆菌可获得基因重组的高表达菌株,表达产物具有较好的酶活性,纯化后纯度可达90%以上。; 关键词阪崎肠杆菌 Α-葡萄糖苷酶克隆原核表达; Keywords Enterobacter.sakazakii α-glucosidase clone expression; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌被引量：1: 5; 作者申进玲赵丽娜蒋原韩伟袁辰刚; 机构上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心上海海关江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心; 出处《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第7期1844-1852,共9页; 基金上海市技术标准专项(16DZ0500101) 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心资助~~; 文摘目的建立含内标的多重实时荧光PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌。方法针对空肠弯曲菌特有hipO基因和结肠弯曲菌特有ceuE基因设计引物探针,设计并优化内标DNA添加量。测试了方法的特异性、灵敏度以及在鸡肉中的检出限。结果内标的最适添加量为10~4copies/PCR。所建立方法对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的灵敏度分别达到4.7copies/PCR和5.23copies/PCR;对115株空肠弯曲菌、49株结肠弯曲菌和42株非目标菌株在3种不同类型的实时荧光PCR仪上的特异性均达到100%;对鸡肉中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的检出限达到10CFU/25g,与传统检测方法一致。采用所建立的方法对50份市售生鲜鸡肉进行检测发现,空肠弯曲菌阳性率为12%(6/50),结肠弯曲菌阳性率为4%(2/50);传统国标检测方法除了1份空肠弯曲菌阳性样品未得到分离确认,其余PCR阳性样品均在平板上分离确认。结论该方法特异性强、灵敏度高、开放性好、含有内标可防止"假阴性",可应用于食品中2种重要致病性弯曲菌的快速同步检测。; 关键词弯曲菌同步快速检测内部扩增对照; Keywords Campylobacter simultaneous and rapid detection internal amplification control; 分类号 TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	克诺罗杆菌检测用单克隆抗体的制备及功效评价	袁辰刚杨海荣杨捷琳吴杨陈颖潘良文何宇平	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	沙门氏菌快速测试片在食品检测中的初步应用研究	袁辰刚韩伟谢小珏顾鸣	《食品安全质量检测学报》 CAS	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	深度测序技术检测益生菌产品菌株组成及16SrDNA序列	杨捷琳袁辰刚窦同海丁小磊潘良文	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	阪崎肠杆菌α-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及活性研究	杨捷琳孟逊黄应峰袁辰刚朱崇日	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2008	10	在线阅读下载PDF 职称材料
5	含内标的多重实时PCR法同时检测空肠弯曲菌和结肠弯曲菌	申进玲赵丽娜蒋原韩伟袁辰刚	《食品安全质量检测学报》 CAS	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料