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HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达及抗原性研究被引量：3: 1; 作者袁作为帅光泽 +2 位作者张君胡接力郑建《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期2281-2285,共5页; 目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体,诱导表达HIV抗原,为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增,分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQ... 展开更多; 关键词 HIV-1包膜蛋白gp41 HIV-2包膜蛋白gp36 重组抗原性; 在线阅读下载PDF 职称材料

部分生化项目不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估被引量：10: 2; 作者贺勇何禾 +5 位作者唐治贵刘容海唐佳高中燕米永华袁作为《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期630-633,共4页; 目的:通过对同一实验室不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估,探讨各检测系统之间检测结果是否具有可比性。方法:按照NCCLS EP9-A2文件的要求,以检测系统1(X):日立7600全自动生化分析仪P1模块,迈克试剂,c.f.a.s.校准品和BIO RAD质... 展开更多; 关键词比对研究质量管理生化分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

1.1倍全长HBV基因组克隆转染细胞系的建立被引量：5: 3; 作者罗强苏怀彬 +4 位作者梁盼盼袁作为张文露黄爱龙胡接力《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期1672-1675,共4页; 目的构建pneo-CH9/3091真核表达质粒,并建立其稳定表达的HepG2细胞系。方法质粒pCH9/3091包含HBV1.1倍体和CMV启动子,将PCR扩增出的带有新霉素(neo)抗性的基因片段插入pCH9/3091构建成重组质粒pneo-CH9/3091。重组质粒经酶切,测序验证... 展开更多; 关键词乙肝病毒 HEPG2细胞稳定细胞株; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1疫苗诱导与自然感染产生抗体鉴别诊断试纸研制及评价: 4; 作者袁作为王永红 +1 位作者黄俊叶杨敏《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期678-683,共6页; 目的研制区分HIV-1自然感染与HIV-1疫苗诱导产生抗体的鉴别诊断试纸条,并对其诊断性能进行评价。方法将前期利用原核表达获取的HIV-1包膜蛋白gp41和鉴别融合肽段SK1-SK2-SK3分别包被NC膜,结合胶体金标记抗人蛋白A,研制新型HIV-1抗体鉴... 展开更多; 关键词 HIV-1 自然感染疫苗抗体鉴别诊断诊断试剂盒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达及抗原性研究被引量：3: 1; 作者袁作为帅光泽张君胡接力郑建; 机构蓖庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室成都大学校医院内科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期2281-2285,共5页; 基金国家自然科学基金(30872419)~~; 文摘目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体,诱导表达HIV抗原,为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增,分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQE30、pET32a（＋）及pGST-MOLUC,重组质粒经异丙基硫代半乳糖苷（isopro-pyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达,并经Ni-NAT或谷胱甘肽-Sepharose-4B层析柱亲和纯化HIV跨膜糖蛋白抗原,对获得的纯化抗原进行Western blot检测,利用HIV抗原制备ELISA检测试剂盒,并分析HIV临床样本。结果成功构建了HIV包膜蛋白的原核表达载体,利用亲和层析纯化得到了纯度较高的HIV包膜蛋白;Western blot分析结果证实表达纯化的HIV跨膜蛋白gp41（aa.538~718）、gp36（aa.533~764）以及gp41-gp36均能和HIV阳性血清反应;ELISA试剂盒检测临床样本显示,特异性达95%以上,灵敏度达100%。结论获得了有生物学活性的HIV截短包膜蛋白,并可用于HIV快速检测试剂盒的研发。; 关键词 HIV-1包膜蛋白gp41 HIV-2包膜蛋白gp36 重组抗原性; Keywords HIV-1 envelope protein gp41 HIV-2 envelope protein gp36 recombinant antigenicity; 分类号 R373.9 [医药卫生—病原生物学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名部分生化项目不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估被引量：10: 2; 作者贺勇何禾唐治贵刘容海唐佳高中燕米永华袁作为; 机构重庆医科大学附属永川医院检验科重庆医科大学检验医学院; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期630-633,共4页; 文摘目的:通过对同一实验室不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估,探讨各检测系统之间检测结果是否具有可比性。方法:按照NCCLS EP9-A2文件的要求,以检测系统1(X):日立7600全自动生化分析仪P1模块,迈克试剂,c.f.a.s.校准品和BIO RAD质控品作为目标检测系统,检测系统2(Y1)和检测系统3(Y2)作为比较检测系统,在各自系统中通过检测病人新鲜血清天门冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alamine aminotransferase,ALT)、γ-谷氨酰转移酶(Gamma-glutamyl transferase,GGT)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、尿素(Urea)、肌酐(Creatinine,Cr)、尿酸(Uricacid,UA)水平来计算比较检测系统和目标检测系统之间的相对偏差(%SE),以美国临床实验室修正法规(CLIA’88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断各检测系统间测定结果的临床可接受性。结果:各检测系统间检测结果显著相关(r2>0.95),临床可接受性能评价中检测系统2(Y1)Urea低浓度水平时SE%>1/2CLIA’88TEa,与检测系统1(X)不具有可比性,其余各项测定结果偏倚评估临床可接受。结论:除低水平Urea外,AST、ALT、GGT、ALP、Cr、UA检测结果在我院3套检测系统间具有可比性。; 关键词比对研究质量管理生化分析; Keywords comparative study quality management biochemical analysis; 分类号 R446.112 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名1.1倍全长HBV基因组克隆转染细胞系的建立被引量：5: 3; 作者罗强苏怀彬梁盼盼袁作为张文露黄爱龙胡接力; 机构重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部(重点实验室); 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期1672-1675,共4页; 基金国家自然科学基金(81000732)~~; 文摘目的构建pneo-CH9/3091真核表达质粒,并建立其稳定表达的HepG2细胞系。方法质粒pCH9/3091包含HBV1.1倍体和CMV启动子,将PCR扩增出的带有新霉素(neo)抗性的基因片段插入pCH9/3091构建成重组质粒pneo-CH9/3091。重组质粒经酶切,测序验证正确后,通过脂质体介导转入人肝癌细胞HepG2。G418筛选后,利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测所得单克隆细胞培养上清液的HBV表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg),PCR检测细胞上清液的病毒颗粒,Western blot检测细胞内HBV核心蛋白(HBcAg)的表达,以及Southern blot检测细胞内核心颗粒HBV DNA的复制情况。结果有3株细胞系培养上清HBsAg和HBeAg检测呈现阳性,且HBV C区片段可通过PCR扩增出来,West-ern bot结果提示只有细胞株HepG2-H7可以表达HBV核心蛋白。Southern blot结果说明此细胞株基因组中有HBV基因组的稳定整合,并且能在细胞内检测出HBV DNA复制中间体。结论成功构建1株HBV稳定整合细胞株HepG2-H7,能持续产生HBV病毒颗粒。; 关键词乙肝病毒 HEPG2细胞稳定细胞株; Keywords Hepatitis B virus HepG2 cells stable cell line; 分类号 R373.21 [医药卫生—病原生物学] R394-33 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1疫苗诱导与自然感染产生抗体鉴别诊断试纸研制及评价: 4; 作者袁作为王永红黄俊叶杨敏; 机构重庆市黔江中心医院检验科重庆市黔江中心医院输血科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期678-683,共6页; 基金重庆市科卫联合医学科研项目(2018QNXM002) 重庆市黔江区科委科研项目(黔科计2018004)~~; 文摘目的研制区分HIV-1自然感染与HIV-1疫苗诱导产生抗体的鉴别诊断试纸条,并对其诊断性能进行评价。方法将前期利用原核表达获取的HIV-1包膜蛋白gp41和鉴别融合肽段SK1-SK2-SK3分别包被NC膜,结合胶体金标记抗人蛋白A,研制新型HIV-1抗体鉴别诊断试纸条;采用新型试纸条检测评价HIV-1阳性血清、HIV阴性血清、HIV血清盘、HIV天坛疫苗血清及其他交叉反应血清,并与ELISA结果进行对比。结果成功研制了HIV-1疫苗诱导与自然感染产生抗体的鉴别诊断试纸条,SK1-SK2-SK3检测灵敏度为93.5%,检测特异性为100.0%,联合gp41后的HIV-1检出灵敏度可达100.0%;试纸条检测结果与ELISA检测结果一致(P>0.05);采用该试纸条检测天坛疫苗血清,SK1-SK2-SK3检测带均为阴性,避免了gp41条带检出的假阳性结果。结论该新型HIV-1抗体诊断试纸条能够有效区分HIV-1自然感染与HIV-1疫苗接种后产生的抗体,避免目前市售试剂盒的假阳性诊断。; 关键词 HIV-1 自然感染疫苗抗体鉴别诊断诊断试剂盒; Keywords HIV-1 natural infection vaccine antibody differential diagnosis diagnostic reagent kits; 分类号 R446.11 [医药卫生—诊断学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达及抗原性研究	袁作为帅光泽张君胡接力郑建	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	部分生化项目不同检测系统测定结果的比对分析和偏倚评估	贺勇何禾唐治贵刘容海唐佳高中燕米永华袁作为	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	10	在线阅读下载PDF 职称材料
3	1.1倍全长HBV基因组克隆转染细胞系的建立	罗强苏怀彬梁盼盼袁作为张文露黄爱龙胡接力	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	HIV-1疫苗诱导与自然感染产生抗体鉴别诊断试纸研制及评价	袁作为王永红黄俊叶杨敏	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	0	在线阅读下载PDF 职称材料