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电针调节外泌体miR-210对脑缺血后HIF-1α/VEGF/Notch信号通路的影响
被引量：
1
1
作者
袁之鹏
吕鹤群
+2 位作者
曾春利
冯瑶婷
彭拥军
《中华中医药学刊》
北大核心
2025年第2期158-164,I0031-I0035,共12页
目的观察电针对缺血性脑卒中大鼠分泌外泌体miR-210调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/Notch信号通路的机制。方法前期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。后期实验将SD大鼠随机分为假手术组...
目的观察电针对缺血性脑卒中大鼠分泌外泌体miR-210调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/Notch信号通路的机制。方法前期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。后期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、外泌体组(造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体组),miR-210siRNA组(造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体和miR-210siRNA组),HIF-1α抑制剂组(造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体和HIF-1α抑制剂组),每组20只。前期实验建立改良后改良后大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO)大鼠模型,缺血1h后进行再灌注,电针组进行电针治疗,取穴“水沟”“百会”,电针30 min,共治疗3 d,提取电针组大鼠血浆外泌体用于后期实验外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组注射。完成实验后进行取材。神经功能缺损评分评估大鼠实验前后神经功能,二辛可酸(BCA)法测定外泌体浓度及透射电镜观察外泌体形态大小,蛋白质印迹(Western blot)法检测外泌体标志性蛋白CD63、CD9、CD81表达,四氮唑比色法(TTC)显示脑梗死灶分布并检查脑梗死体积,苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠脑缺血组织病理形态,透射电镜观察大鼠脑缺血侧纹状体区超微形态学变化实时荧光定量PCR法检测前期实验大鼠各组外泌体中miR-210mRNA表达和后期实验大鼠各组纹状体脑组织miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达。结果前期实验中电针组大鼠在干预后神经功能缺损评分显著降低(P<0.001)。在干预后,与模型组相比较,电针组大鼠神经功能缺损评分显著降低(P<0.005)。与假手术组相比,模型组、电针组外泌体浓度升高(P<0.001),外泌体标志性蛋白CD63、CD9、CD81存在属实,即前期实验中提取电针血浆中存在外泌体。后期实验中与模型组相比较,外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组大鼠脑梗死体积百分比降低(P<0.001),外泌体组神经元肿胀、胞核萎缩、染色质红染情况均得到改善,外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达均升高(P<0.05);与外泌体组相比较,miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组大鼠脑梗死体积百分比升高(P<0.001),miR-210siRNA组和HIF-1α抑制剂组大鼠脑组织病理损伤都有所加重,HIF-1α抑制剂组相比miR-210siRNA组,其神经细胞排列更加紊乱,致密质块数量更多且胞核皱缩情况也更加严重,miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达均降低(P<0.05)。结论电针可以减轻大鼠神经功能损伤同时促进外泌体miR-210的生成并调控HIF-1α/VEGF/Notch信号通路,促进脑缺血后血管新生,继而减轻了脑缺血再灌注损伤。
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关键词
缺血性脑卒中
外泌体
MIR-210
HIF-1Α
VEGF
Notch
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职称材料
题名
电针调节外泌体miR-210对脑缺血后HIF-1α/VEGF/Notch信号通路的影响
被引量：
1
1
作者
袁之鹏
吕鹤群
曾春利
冯瑶婷
彭拥军
机构
南京中医药大学附属医院
出处
《中华中医药学刊》
北大核心
2025年第2期158-164,I0031-I0035,共12页
基金
国家自然科学基金项目(82174484,81973932)
江苏省第六期“333高层次人才培养工程”项目
+2 种基金
江苏省中医院专项(Y2022ZR20)
江苏省中医院高峰学术人才项目(k2021rc24)
南京中医药大学自然科学基金项目(XZR2023096)。
文摘
目的观察电针对缺血性脑卒中大鼠分泌外泌体miR-210调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/Notch信号通路的机制。方法前期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只。后期实验将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、外泌体组(造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体组),miR-210siRNA组(造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体和miR-210siRNA组),HIF-1α抑制剂组(造模后注射电针治疗后提取的血浆外泌体和HIF-1α抑制剂组),每组20只。前期实验建立改良后改良后大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO)大鼠模型,缺血1h后进行再灌注,电针组进行电针治疗,取穴“水沟”“百会”,电针30 min,共治疗3 d,提取电针组大鼠血浆外泌体用于后期实验外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组注射。完成实验后进行取材。神经功能缺损评分评估大鼠实验前后神经功能,二辛可酸(BCA)法测定外泌体浓度及透射电镜观察外泌体形态大小,蛋白质印迹(Western blot)法检测外泌体标志性蛋白CD63、CD9、CD81表达,四氮唑比色法(TTC)显示脑梗死灶分布并检查脑梗死体积,苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠脑缺血组织病理形态,透射电镜观察大鼠脑缺血侧纹状体区超微形态学变化实时荧光定量PCR法检测前期实验大鼠各组外泌体中miR-210mRNA表达和后期实验大鼠各组纹状体脑组织miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达。结果前期实验中电针组大鼠在干预后神经功能缺损评分显著降低(P<0.001)。在干预后,与模型组相比较,电针组大鼠神经功能缺损评分显著降低(P<0.005)。与假手术组相比,模型组、电针组外泌体浓度升高(P<0.001),外泌体标志性蛋白CD63、CD9、CD81存在属实,即前期实验中提取电针血浆中存在外泌体。后期实验中与模型组相比较,外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组大鼠脑梗死体积百分比降低(P<0.001),外泌体组神经元肿胀、胞核萎缩、染色质红染情况均得到改善,外泌体组、miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达均升高(P<0.05);与外泌体组相比较,miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组大鼠脑梗死体积百分比升高(P<0.001),miR-210siRNA组和HIF-1α抑制剂组大鼠脑组织病理损伤都有所加重,HIF-1α抑制剂组相比miR-210siRNA组,其神经细胞排列更加紊乱,致密质块数量更多且胞核皱缩情况也更加严重,miR-210siRNA组、HIF-1α抑制剂组miR-210mRNA、CD34、HIF-1α、VEGF、Notch mRNA表达均降低(P<0.05)。结论电针可以减轻大鼠神经功能损伤同时促进外泌体miR-210的生成并调控HIF-1α/VEGF/Notch信号通路,促进脑缺血后血管新生,继而减轻了脑缺血再灌注损伤。
关键词
缺血性脑卒中
外泌体
MIR-210
HIF-1Α
VEGF
Notch
Keywords
ischemic stroke
exosome
miR-210
HIF-1α
VEGF
Notch
分类号
R259.416 [医药卫生—中西医结合]
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作者
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操作
1
电针调节外泌体miR-210对脑缺血后HIF-1α/VEGF/Notch信号通路的影响
袁之鹏
吕鹤群
曾春利
冯瑶婷
彭拥军
《中华中医药学刊》
北大核心
2025
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