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辣椒SRAP-PCR反应体系优化及杂交群体多态性引物筛选
被引量：
1
1
作者
张佳琦
吕庆芳
+2 位作者
董黎梨
李映志
叶春海
《安徽农业科学》
CAS
2014年第7期1913-1916,1920,共5页
[目的]对辣椒SRAP反应体系进行研究和优化,并利用优化体系对164对多态性引物进行筛选。[方法]采用单因素随机试验设计和L25(65)正交试验设计对辣椒SRAP反应体系中6种关键因素(退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进...
[目的]对辣椒SRAP反应体系进行研究和优化,并利用优化体系对164对多态性引物进行筛选。[方法]采用单因素随机试验设计和L25(65)正交试验设计对辣椒SRAP反应体系中6种关键因素(退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行体系优化,并以"泡椒"×"青皮大椒"的亲本和F1代为材料,利用聚丙烯胺酰胺凝胶进行筛选。[结果]辣椒SRAP-PCR的最佳反应体系为:退火温度35.5℃,Taq DNA聚合酶1.0 U,模板DNA 2.25 ng/μl,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.4μmoL/L,Mg2+2 mmol/L,总体积为20μl。利用该体系,从164对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、条带稳定的31对引物组合。[结论]该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒育种中的应用奠定了基础。
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关键词
辣椒(Capsicum
spp
)
正交试验设计
单因素随机试验设计
SRAP
PCR
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职称材料
题名
辣椒SRAP-PCR反应体系优化及杂交群体多态性引物筛选
被引量：
1
1
作者
张佳琦
吕庆芳
董黎梨
李映志
叶春海
机构
广东海洋大学
出处
《安徽农业科学》
CAS
2014年第7期1913-1916,1920,共5页
基金
科技部农业科技成果转化资金(2011GB2E000007)
广东省重大科技专项(2004A20103001)
文摘
[目的]对辣椒SRAP反应体系进行研究和优化,并利用优化体系对164对多态性引物进行筛选。[方法]采用单因素随机试验设计和L25(65)正交试验设计对辣椒SRAP反应体系中6种关键因素(退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA)进行体系优化,并以"泡椒"×"青皮大椒"的亲本和F1代为材料,利用聚丙烯胺酰胺凝胶进行筛选。[结果]辣椒SRAP-PCR的最佳反应体系为:退火温度35.5℃,Taq DNA聚合酶1.0 U,模板DNA 2.25 ng/μl,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.4μmoL/L,Mg2+2 mmol/L,总体积为20μl。利用该体系,从164对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、条带稳定的31对引物组合。[结论]该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒育种中的应用奠定了基础。
关键词
辣椒(Capsicum
spp
)
正交试验设计
单因素随机试验设计
SRAP
PCR
Keywords
Pepper
Orthogonal design
Single-factor random experiment design
SRAP
PCR
分类号
S641.3 [农业科学—蔬菜学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
辣椒SRAP-PCR反应体系优化及杂交群体多态性引物筛选
张佳琦
吕庆芳
董黎梨
李映志
叶春海
《安徽农业科学》
CAS
2014
1
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