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东北地区奶牛乳房炎表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的分子流行病学及耐药性研究 被引量:17
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作者 董志民 张万江 +6 位作者 刘琪 卢中冶 王秋东 华欣 韩吉雨 宋丽华 刘思国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期307-311,共5页
为调查表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌在东北地区的流行病学情况和耐药性,本研究对来自东北地区3个大型奶牛场采集的330份奶样进行葡萄球菌的分离、鉴定及其耐药表型的检测,并采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分离株的亲缘性分析,对表皮葡萄... 为调查表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌在东北地区的流行病学情况和耐药性,本研究对来自东北地区3个大型奶牛场采集的330份奶样进行葡萄球菌的分离、鉴定及其耐药表型的检测,并采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分离株的亲缘性分析,对表皮葡萄球菌进行多位点序列分型(MLST),同时应用PCR扩增分离株中携带的相关耐药基因。研究结果表明,在330份奶样中共分离到表皮葡萄球菌32株(9.7%),腐生葡萄球菌34株(10.3%);PFGE分析共获得9种不同谱型的表皮葡萄球菌和11种不同谱型的腐生葡萄球菌。药敏试验结果显示,两种菌对青霉素(70%)、苯唑西林(60%)和林克霉素(55%)的耐药率较高,主要耐药基因为lnu(B)(40%)、erm(B)(30%)和mec A(25%)。本研究结果揭示了东北地区奶牛乳房炎病原菌表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的耐药谱和流行情况,为临床合理用药及奶牛乳房炎的防控提供了实验依据。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 分子流行病学 多位点序列分型
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2型猪链球菌天津分离株的鉴定及其遗传特征分析 被引量:6
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作者 董志民 李秀丽 +10 位作者 杨春蕾 杨丽景 田向学 王利丽 池晶晶 张莉 孟乐 张万江 祝瑶 张东超 鄢明华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期468-475,共8页
为了解天津市某猪场引起育肥猪神经症状的病原及其特性和遗传特征,本研究采集8份患病猪脑组织样品经细菌分离、形态学观察、gdh基因和cps2J基因的PCR扩增及序列分析,确定8份样品中的分离株均为同一2型猪链球菌(SS2),命名为TJS75。测定... 为了解天津市某猪场引起育肥猪神经症状的病原及其特性和遗传特征,本研究采集8份患病猪脑组织样品经细菌分离、形态学观察、gdh基因和cps2J基因的PCR扩增及序列分析,确定8份样品中的分离株均为同一2型猪链球菌(SS2),命名为TJS75。测定其生长曲线、并按照文献方法进行溶血性试验、黏附/侵入试验和对小鼠的致病性试验,分析该SS2分离株特性。结果显示,TJS75菌株经TSB培养6 h~15 h可达对数生长期,对绵羊血红细胞(RBC)具有崩解效果,可黏附并侵入PK-15细胞(黏附率和侵袭率分别为5.16%和7.90%),且感染TJS75株的BALB/c小鼠出现不同程度的行动迟缓、呼吸急促、精神萎靡和神经症状等,经测定其LD50为2.15×107cfu/mL。进一步采用高通量测序,并预测其毒力基因,分析该菌株的遗传特征,结果显示,TJS75菌株基因组全长2368195 bp,GC含量40.88%,含有2299个编码基因,其中有1822、1830和1077个基因分别注释于GO、COG和KEGG数据库,携带的16S r RNA基因序列与国内分离的SS强毒株98HAH33和05ZYH33的亲缘性较近,毒力基因的预测结果显示该菌株携带499种毒力相关基因(编码173种毒力相关因子),依据功能分类,这些毒力基因参与SS2的黏附和侵袭、溶血、促进铁转运、自溶酶的合成、降解胶原酶、唾液酸的合成等。本研究首次分离到携带MRP毒力因子的ST25型SS2,为深入开展SS2 TJS75株的致病机制研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 分离鉴定 致病力 遗传特征
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关于我校信息技术专业群建设的构想 被引量:6
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作者 董志民 《中国职业技术教育》 北大核心 2007年第26期38-39,共2页
本文主要介绍在我院快速发展,资金又比较紧张的情况下,如何从优势专业群建设入手,创建精品专业。灵活地创办新专业,提升学院的核心竞争力,走可持续发展之路。建设思路是“资源共享、重点突出、优势互补、灵活发展”。
关键词 高职 优势专业群
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基于S-MCLSTM和DANN的滚动轴承剩余寿命预测方法 被引量:1
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作者 董志民 洁超 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2024年第9期2787-2793,共7页
针对在不同工作条件和不同故障形式下,滚动轴承剩余寿命预测泛化能力差和精确度不高的问题,提出一种基于孪生多卷积长短时记忆网络(S-MCLSTM)和域对抗网络(DANN)的剩余寿命预测方法。首先针对不同的工作条件对退化过程的影响,提出基于S-... 针对在不同工作条件和不同故障形式下,滚动轴承剩余寿命预测泛化能力差和精确度不高的问题,提出一种基于孪生多卷积长短时记忆网络(S-MCLSTM)和域对抗网络(DANN)的剩余寿命预测方法。首先针对不同的工作条件对退化过程的影响,提出基于S-MCLSTM的差异化特征提取器以提取一定时间间隔的两个样本之间的差异化特征。同时,进一步使用工作条件判别器与差异化特征提取器进行对抗训练,减少由于工作条件的原因产生的冗余特征。之后针对故障形式对退化过程的影响,设计了故障诊断器用于和差异化特征提取器对抗训练。最后,考虑到滚动轴承一般退化过程中,不同阶段的退化过程与特征之间的映射关系可能存在的差异,提出了阶段判别器,并在不同阶段应用不同的剩余寿命预测器进行预测。最终在西安交通大学XJTU-SY轴承数据集上的实验表明,该方法在多种工作条件和故障形式下都能较准确地预测剩余寿命,有较为广泛的应用前景。 展开更多
关键词 滚动轴承 剩余寿命预测 孪生多卷积长短时记忆网络 域对抗网络
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内蒙古部分地区致奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌和产色葡萄球菌的分子流行病学及耐药性研究 被引量:21
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作者 王秋东 刘琪 +4 位作者 董志民 杨桂连 华欣 张万江 刘思国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期257-261,共5页
为调查奶牛乳房炎中金黄色葡萄球菌和产色葡萄球菌的流行病学和耐药性情况,本研究对采集自内蒙古部分地区3个规模化奶牛场的330份奶样进行了葡萄球菌的分离、鉴定、耐药表型分析及基因型的检测;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对分离株进... 为调查奶牛乳房炎中金黄色葡萄球菌和产色葡萄球菌的流行病学和耐药性情况,本研究对采集自内蒙古部分地区3个规模化奶牛场的330份奶样进行了葡萄球菌的分离、鉴定、耐药表型分析及基因型的检测;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对分离株进行了亲缘性分析,多位点序列分型(MLST)法对金黄色葡萄球菌进行了基因分型分析。结果表明,从330份奶样共分离到14株金黄色葡萄球菌和23株产色葡萄球菌,两者的分离率分别为4.24%(14/330)和6.97%(23/330);PFGE分型共获得8种不同谱型的金黄色葡萄球菌和16种不同谱型的产色葡萄球菌,表明这些分离株中存在克隆传播现象;药敏试验结果显示,两种病原菌对林可霉素、青霉素、苯唑西林和红霉素耐药率较高,分别为66.67%(16/24)、66.67%(16/24)、37.5%(9/24))和25%(6/24);介导青霉素耐药的bla Z基因检出率最高,为54.17%(13/24),其次为介导林可霉素和红霉素耐药的Inu(A)和erm(B)基因,其检出率分别为33.33%(8/24)和20.83%(5/24)。本研究结果为控制该地区奶牛乳房炎的传播、蔓延及临床用药提供了实验依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 产色葡萄球菌 分子流行病学 耐药性
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禽腺病毒血清4型纳米PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:20
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作者 王利丽 郑丽 +6 位作者 李富强 李秀丽 任卫科 路超 张莉 董志民 鄢明华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期701-704,共4页
为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽... 为建立一种快速有效检测禽腺病毒血清4型(FAdV-4)的方法,本研究根据FAdV-4五邻体(Penton)基因序列,设计合成1对特异性引物,经过条件优化,建立了检测FAdV-4的纳米PCR方法(Nano PCR)。特异性试验结果显示,该方法对鸡新城疫病毒等12种家禽常见病原及国内报导的FAdV-1、FAdV-2、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11等5个主要血清型病毒的扩增结果均为阴性,仅FAdV-4检测结果为阳性,特异性较强。敏感性试验结果显示,该方法对FAdV-4的最低核酸检出量为54.0拷贝/μL,较常规PCR方法高10倍,敏感性较高。应用该方法和病毒分离培养法同时对87份临床样品进行检测,二者均检出14份阳性样品,总体符合率为100%。以上结果表明本研究建立的Nano PCR方法特异性好、敏感性高,可以用于FAdV-4的临床检测和分子流行病学调查。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 五邻体基因 NanoPCR检测
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天津地区2型猪链球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:12
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作者 杨春蕾 董志民 +6 位作者 李秀丽 燕晓翠 田向学 池晶晶 任卫科 张蕾 鄢明华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第3期822-829,共8页
为了解天津地区2型猪链球菌的流行及耐药情况,本研究收集该地区部分规模化养猪场疑似猪链球菌病病料317份,通过病原分离培养、染色特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定,并对分离菌进行致病性及药敏试验。结果从样品中分离鉴定出1... 为了解天津地区2型猪链球菌的流行及耐药情况,本研究收集该地区部分规模化养猪场疑似猪链球菌病病料317份,通过病原分离培养、染色特性观察、生化试验、PCR扩增等方法进行鉴定,并对分离菌进行致病性及药敏试验。结果从样品中分离鉴定出11株2型猪链球菌。对小鼠的致病力试验结果显示,应用0.5×10~8 CFU/mL的细菌攻击小鼠,11株2型猪链球菌分离株中有6株具有致死性,其中1株致死率较强,5株致死率较弱。药敏试验结果表明,11株分离菌对9种临床常见药物均表现出很强的耐药性,其中对阿米卡星、四环素和强力霉素耐药性最强,耐药率达到100.00%;且所有分离株均呈多重耐药,其中4个分离株为9重耐药,占36.36%(4/11)。本试验结果表明,天津地区存在2型猪链球菌感染情况,且对多种抗菌药均产生了耐药性,应引起养殖户的高度重视,在防制猪链球菌病时,应有针对性地合理、科学、规范用药和交替用药。 展开更多
关键词 2型猪链球菌 分离鉴定 耐药性 天津
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猪链球菌2型感染昆明小鼠模型的建立及评价 被引量:17
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作者 李秀丽 董志民 +7 位作者 燕晓翠 田向学 杨春蕾 池晶晶 任卫科 李富强 谭世旭 鄢明华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期840-848,共9页
为建立稳定的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)人工发病模型,本试验以天津某发病猪场分离的SS2 Y15293株为研究对象,经腹腔注射感染昆明小鼠,测定其LD_(50),确定造模感染剂量,通过观察感染后小鼠的临床症状和病理变化,测定... 为建立稳定的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)人工发病模型,本试验以天津某发病猪场分离的SS2 Y15293株为研究对象,经腹腔注射感染昆明小鼠,测定其LD_(50),确定造模感染剂量,通过观察感染后小鼠的临床症状和病理变化,测定试验期间各组小鼠体重和采食量的变化及细菌回归等试验对模型进行评估。结果显示,SS2 Y15293株致昆明小鼠的LD_(50)为6.7×10~7 CFU/mL。以1个LD_(50)的剂量攻毒,与对照组相比,试验小鼠主要发病表现为攻菌后24 h出现精神沉郁、被毛逆立、眼睛有分泌物,72~96 h出现头颈歪斜、翻滚、震颤等神经症状,死亡高峰在48~72 h。3次重复试验中,试验组小鼠的发病率均为100%,死亡率为50%~70%,神经症状小鼠出现比率20%~30%。与对照组相比,试验组小鼠采食量和体重显著下降(P<0.05),临床症状分值显著升高(P<0.05)。组织病理检查发现,试验组小鼠心脏、肺脏组织均有不同程度出血、炎性细胞浸润;脑膜炎,脑室出血,充满炎性细胞。细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且形态、染色和分子生物学特性与攻毒菌一致。以上结果证实,SS2 Y15293株能感染昆明小鼠并致其发病,感染动物发病规律性强,重复性好,临床症状典型,说明SS2 Y15293株感染昆明小鼠可作为SS2的候选人工感染模型。 展开更多
关键词 猪链球菌2型(SS2) 昆明小鼠 人工感染模型
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一株猪链球菌8型菌株的分离鉴定及其生物学特性研究 被引量:7
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作者 田向学 董志民 +6 位作者 李富强 任卫科 池晶晶 张莉 张蕾 崔尚金 鄢明华 《动物医学进展》 北大核心 2021年第5期19-25,共7页
为明确天津市某猪场保育猪疑似发生猪链球菌病的病原菌及其致病力等生物学特性,将猪场一头发病猪扑杀,无菌采集病料于哥伦比亚血琼脂平板上划线培养,对分离的疑似菌株进行形态学观察、生化试验、16S rDNA序列分析和血清型鉴定,确定分离... 为明确天津市某猪场保育猪疑似发生猪链球菌病的病原菌及其致病力等生物学特性,将猪场一头发病猪扑杀,无菌采集病料于哥伦比亚血琼脂平板上划线培养,对分离的疑似菌株进行形态学观察、生化试验、16S rDNA序列分析和血清型鉴定,确定分离菌株为猪链球菌8型,命名为TJS31。药敏试验结果显示,TJS31株对8种受试药物耐药,4种受试药物中介,1种受试药物敏感。致病性试验结果显示,TJS31株经腹腔接种昆明小鼠,24 h内可以引起小鼠出现精神萎靡、扎堆、呼吸急促、发抖、运动迟缓、死亡等,LD50为1.8×10^(8) CFU/mL。毒力基因检测发现TJS31的毒力基因型为sly^(+)/gdh^(+)/orf2^(+)/gapdh^(+),不携带mrp、epf和fbps基因。研究结果丰富了我国猪链球菌病病原的生物学资料,为猪链球菌8型的防控提供了依据,也为深入开展猪链球菌8型的致病机制和耐药机理奠定了基础。 展开更多
关键词 猪链球菌8型 分离鉴定 耐药特性 毒力基因
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天津地区猪链球菌3型菌株的致病性及耐药特性研究 被引量:4
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作者 池晶晶 董志民 +5 位作者 田向学 谭世旭 李秀丽 杨春蕾 任卫科 鄢明华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3740-3748,共9页
试验旨在对分离自天津地区发病猪场的7株猪链球菌3型菌株(Streptococcus suis type 3,SS 3)进行致病性和耐药特性研究。应用剂量为1.0×10^7、1.0×10^8和1.0×10^9 CFU/只的细菌对小鼠进行致病力研究,用PCR方法检测7株SS ... 试验旨在对分离自天津地区发病猪场的7株猪链球菌3型菌株(Streptococcus suis type 3,SS 3)进行致病性和耐药特性研究。应用剂量为1.0×10^7、1.0×10^8和1.0×10^9 CFU/只的细菌对小鼠进行致病力研究,用PCR方法检测7株SS 3型菌株的毒力基因mrp、ef、sly、gdh、gapdh、fbps和orf 2,并对这7株SS 3型菌株进行药物敏感试验。致病力试验结果显示,接种剂量为1.0×10^9和1.0×10^8 CFU/只时分别有6和3株SS 3型菌株可使小鼠100.0%(5/5)发病死亡,接种剂量1.0×10^7 CFU时仍有1株SS 3型菌株可使80.0%(4/5)小鼠发病死亡,这7株SS 3型菌株对小鼠的致病力依次为R15056>R15042=S15030>Y12024=Y09011>Y13125>Y13164。毒力基因检测结果表明,共有3种毒力基因型,R12024、Y13164、R15042和S15030株为gdh、gapdh、fbps和orf 2毒力基因阳性,Y13125和R15056株为sly、gdh、gapdh、fbps和orf 2毒力基因阳性,Y09011株为gdh、fbps和orf 2毒力基因阳性。药物敏感性试验结果显示,7株SS 3型对头孢喹肟相对最敏感,其次为阿莫西林、环丙沙星和磺胺间甲氧嘧啶钠,但对强力霉素100.0%耐药,且所有菌株均呈现3重以上的耐药性。本研究为进一步开展天津地区SS 3型流行特点及致病机理研究奠定了基础,可为天津地区SS 3型菌株的综合防控提供理论指导。 展开更多
关键词 猪链球菌3型 鉴定 致病力 毒力基因 药物敏感试验
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2015-2020年天津地区猪伪狂犬病病毒gB、gC、gE基因遗传变异分析 被引量:2
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作者 张莉 任卫科 +8 位作者 路超 李秀丽 李富强 田向学 池晶晶 王利丽 江珊 董志民 鄢明华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3741-3751,共11页
为掌握天津地区猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)的流行及遗传变异情况,本研究对2015-2020年天津地区分离的20个分离株的gB、gC和gE基因进行扩增、测序,并与参考毒株序列进行比对分析。相似性分析结果显示,分离株与2012年后中国... 为掌握天津地区猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)的流行及遗传变异情况,本研究对2015-2020年天津地区分离的20个分离株的gB、gC和gE基因进行扩增、测序,并与参考毒株序列进行比对分析。相似性分析结果显示,分离株与2012年后中国变异株相比,3种基因核苷酸及编码氨基酸序列相似性分别为:gB基因均为99.9%~100%;gC基因为99.7%~100%和99.4%~100%;gE基因为99.7%~100%和99.6%~100%。遗传进化和序列比对分析结果显示,依据gB、gC、gE基因绘制遗传进化树均可将PRV毒株分为GⅠ型和GⅡ型,天津分离株属于GⅡ型;其中19个分离株与PRV变异株遗传关系较近,属于同一亚分支,并存在相同的氨基酸变异位点;另外1个分离株(TJBD6株)gB和gE基因与PRV变异株遗传关系较近,氨基酸变异位置与PRV变异株一致,但其gC基因与经典株Ea株遗传关系较近,且核苷酸和氨基酸序列相似性为100%。上述结果表明,2015年以来天津地区流行的PRV毒株存在经典株和变异株2种类型,其中变异株为主要流行株。本次研究初步调查了天津地区PRV分子流行特征,可为猪伪狂犬病防控提供依据。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒(PRV) GB基因 GC基因 GE基因 遗传进化分析
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猪葡萄球菌临床分离株感染仔猪渗出性皮炎模型的建立 被引量:11
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作者 马炫炫 任卫科 +7 位作者 滕达 池晶晶 王秀敏 董志民 毛若雨 郝娅 李秀丽 王建华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期2110-2118,共9页
为建立研究仔猪渗出性皮炎发病机制及治疗制剂的动物模型,本研究采用PCR及BLAST序列比对方法对猪葡萄球菌437-2株毒素基因型进行鉴定,采用纸片扩散法检测其耐药性,通过不同浓度菌液人工感染仔猪试验分析该菌株的临床致病力、最小致病浓... 为建立研究仔猪渗出性皮炎发病机制及治疗制剂的动物模型,本研究采用PCR及BLAST序列比对方法对猪葡萄球菌437-2株毒素基因型进行鉴定,采用纸片扩散法检测其耐药性,通过不同浓度菌液人工感染仔猪试验分析该菌株的临床致病力、最小致病浓度、发病周期及组织病理学变化。结果显示,该分离菌株为ExhD毒素基因型,其毒素基因与德国分离株(GenBank登录号:AM94662.1)和俄罗斯分离株(GenBank登录号:AM950188.1)的ExhD基因同源性达99%;药敏试验结果显示,该菌株为多重耐药菌株,对青霉素、磺胺异噁唑、链霉素、阿奇霉素、红霉素、四环素、杆菌肽及诺氟沙星耐药;仔猪致病性试验结果显示,低剂量组在整个试验周期内仅注射部位表现出皮炎症状,而中、高剂量组在耳后皮下注射2d后均出现显著的渗出性皮炎症状,病猪表现为耳后出现油皮,全身被毛粗糙,皮肤呈深褐色厚皮痂,有大片蜕皮和黄色液体渗出;感染仔猪的脏器和皮肤病理切片结果显示,低剂量组仔猪脏器无异常,耳部皮肤角质层角化过度,炎性细胞浸润,无棘皮层细胞分离,而中、高剂量组感染仔猪脏器具有一定程度的损伤,皮肤表皮棘细胞层出现明显的细胞分离。上述试验结果说明,利用猪葡萄球菌437-2株可成功建立仔猪渗出性皮炎模型,所需的最小攻菌浓度为1×10^9 CFU/mL。 展开更多
关键词 仔猪渗出性皮炎 猪葡萄球菌 表皮脱落毒素 仔猪渗出性皮炎模型
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猪伪狂犬病病毒天津变异株R13139对猪的致病性研究 被引量:4
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作者 任卫科 张莉 +6 位作者 李秀丽 池晶晶 田向学 李富强 董志民 鄢明华 仇华吉 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期2620-2627,共8页
为了解猪伪狂犬病病毒(PRV)变异株R13139株对猪的致病性情况,本试验将PRV R13139株和PRV经典强毒株SC株均以10~6 TCID_(50)剂量经滴鼻途径接种6和9周龄健康仔猪各3头,空白对照组鼻腔接种生理盐水,通过攻毒后两个年龄段猪的临床症状表现... 为了解猪伪狂犬病病毒(PRV)变异株R13139株对猪的致病性情况,本试验将PRV R13139株和PRV经典强毒株SC株均以10~6 TCID_(50)剂量经滴鼻途径接种6和9周龄健康仔猪各3头,空白对照组鼻腔接种生理盐水,通过攻毒后两个年龄段猪的临床症状表现、眼观病例变化、显微病理变化、抗体产生情况及病毒在体内部分情况评定两毒株对猪的致病力差异。结果显示,SC株对6和9周龄猪的致死率分别为66.7%(2/3)和100.0%(3/3),而R13139株对6和9周龄猪的致死率分别为33.3%(1/3)和66.7%(2/3),表明R13139株对猪的致死性弱于SC株,但R13139株引起两个年龄段猪发病时间比SC株早,同时间段的体温升高幅度更高,神经发症状更严重;眼观病理变化发现,R13139株引起的发病猪肝脏坏死现象比SC株更明显,而心脏、肺脏、脾脏、膀胱和脑的病理变化差异不明显;显微病理结果显示,R13139株对病猪的扁桃体、肺脏、肝脏和三叉神经节等组织造成的病理损伤明显强于SC株;PCR结果显示,R13139株在濒死猪扁桃体、脾脏、肺脏、三叉神经节和淋巴节(腹股沟、肠系膜和颌下)等组织脏器中分布比SC株更广泛;应用ELISA检测攻毒猪抗体发现,R13139株诱导PRV-gB抗体产生的时间比SC株早1d。本研究结果可为揭示中国伪狂犬病重新流行的原因及进一步开展防控技术研究提供科学依据。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(PRV) 变异株 致病性
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猪蓝耳病病毒与副猪嗜血杆菌及猪链球菌混合感染的诊治 被引量:2
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作者 许艳华 李富强 +3 位作者 董志民 田向学 任卫科 路超 《天津农业科学》 CAS 2022年第S01期22-27,共6页
为了确诊河北省唐山市某猪场保育猪发病原因,在进行临床调查的基础上,采集发病猪的肺脏、脾脏、淋巴结进行病原学检测。临床调查结果显示,发病猪出现发烧、喘、消瘦、腹泻、死亡等症状。实验室检测结果表明,5份病料均为PRRSV NADC30类... 为了确诊河北省唐山市某猪场保育猪发病原因,在进行临床调查的基础上,采集发病猪的肺脏、脾脏、淋巴结进行病原学检测。临床调查结果显示,发病猪出现发烧、喘、消瘦、腹泻、死亡等症状。实验室检测结果表明,5份病料均为PRRSV NADC30类似株阳性,核苷酸序列同源性分析结果表明其GP5蛋白基因与NADC30类似株的同源性最高为92.0%,与TJM株的同源性最低为84.3%。从发病猪肺脏和淋巴结中分离到副猪嗜血杆菌和猪链球菌,药敏试验结果显示,氟苯尼考、泰万菌素、林可霉素、强力霉素为中介。综合临床调查和实验室检测结果,确定引起该猪场保育猪发病的病因为PRRSV NADC30类似株和副猪嗜血杆菌、猪链球菌混合感染。提出在饲料中添加替米考星、腐殖酸钠及黄芪多糖,发病保育猪肌肉注射瑞可新的药物治疗方法,以及加强消毒的防控措施。猪场依法施治3周后无新发病例,7周后猪群生产稳定。综上,研究结果可为猪群病毒病细菌病混合感染的诊断和防治提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 副猪嗜血杆菌 猪链球菌 混合感染 诊治
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贝莱斯芽孢杆菌对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群及其耐药基因的影响研究
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作者 张义楠 闫雪 +5 位作者 赵晨 田向学 董志民 李富强 王素英 李秀丽 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第2期56-65,共10页
试验旨在研究在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群和耐药基因的影响。首先挑选体重相近,性别比例相同,健康状态良好的1日龄雏鸡360羽,分为4个试验组,每组6个重复,每个重复15只,分别饲喂含金霉素0、50、... 试验旨在研究在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7对金霉素作用下肉鸡生长性能、肠道菌群和耐药基因的影响。首先挑选体重相近,性别比例相同,健康状态良好的1日龄雏鸡360羽,分为4个试验组,每组6个重复,每个重复15只,分别饲喂含金霉素0、50、150、250 mg/kg的基础日粮,饲喂28 d,确定对肉鸡肠道菌群影响最大的金霉素剂量和作用。随后挑选1日龄雏鸡450羽,分为5个试验组,每组6个重复,每个重复15只。1~7日龄,前4组饲喂基含150 mg/kg金霉素的日粮,7~35日龄时,分别饲喂含0、10^(8)、10^(9) CFU/kg和10^(10) CFU/kg贝莱斯芽孢杆菌的日粮,同时以1~35日龄均饲喂基础日粮的为空白对照组。结果表明,肉鸡盲肠的菌群结构随着时间和金霉素剂量发生变化。尤其是在生命早期7日龄时,中剂量组(150 mg/kg)中有益菌属Bifidobacterium、Lactobacillus丰度显著降低(P<0.05),肠道常见条件致病菌Enterococcus、Enterobacter的丰度上升,且耐药基因(ARGs)丰度上升。金霉素作用7 d后,在饲粮中添加贝莱斯芽孢杆菌H-7可增加肉鸡体重,但对生长性能无显著影响(P>0.05)。显著增加21日龄肉鸡肠道中Firmicutes的相对丰度(P<0.05),降低Bacteroidetes和Proteobacteria的相对丰度,显著提高F/B值(P<0.05)。贝莱斯芽孢杆菌的添加促进Akkermansia、Ruminococcus、Blautia、Bacillus和Lactobacillus等有益菌属的富集,同时降低了四环素类耐药基因的丰度,有助于改善肉鸡肠道的健康水平。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 抗生素 宏基因组测序 生长性能 肠道菌群
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PEDV、TGEV与PDCoV S蛋白表位基因三联疫苗的构建及其鉴定
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作者 刘青 顾天越 +9 位作者 包利霞 朱凡杰 王鑫源 刘婷婷 朱晓琛 鄢明华 董志民 王利丽 张东超 金天明 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3495-3505,共11页
[目的]构建一种同时预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的三联表位疫苗,以预防上述病原导致的猪的相关疾病。[方法]本研究运用免疫信息学在线软件对3种猪肠道冠状病毒(SeCoVs)的S蛋白B、T... [目的]构建一种同时预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的三联表位疫苗,以预防上述病原导致的猪的相关疾病。[方法]本研究运用免疫信息学在线软件对3种猪肠道冠状病毒(SeCoVs)的S蛋白B、T细胞表位进行预测分析,构建新的表位肽段,命名为PPT,通过ExPASy、VaxiJen、TMHMM、SOPMA、SOLpro和AlphaFlod2等在线软件对PPT进行生物信息学分析,并利用C-IMMSIM在线软件对其免疫反应进行模拟。通过T2A将PPT与PEDV的COE序列、TGEV的SAD序列及PDCoV的CTD序列连接并构建至真核表达载体pEGFP-N1,经PCR和双酶切鉴定正确后,将获得的重组质粒转染HEK293A细胞,经DAPI染色、CCK8、RT-PCR及Western blotting试验验证重组质粒在体外表达情况。[结果]构建的表位蛋白PPT由17条表位肽段组成,经生物信息学软件分析,该蛋白为非跨膜蛋白,结构稳定,具有抗原性和可溶性,亲水性高,无过敏性。C-IMMSIM结果显示,PPT能引起机体树突状细胞(DC)增加,B、T细胞免疫反应,刺激免疫球蛋白IgG、IgM和细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)水平升高。重组质粒经PCR和双酶切鉴定结果显示,分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp出现特异性目的条带,与预期相符;重组质粒转染HEK293A细胞后,可见绿色荧光;RT-PCR扩增分别在3359、2375、1064、944、764和467 bp处获得与目的基因大小相符的条带;CCK-8检测结果表明,重组质粒对细胞均无明显毒性作用;Western blotting检测结果显示,分别在31.7、16.1、37.9和27.5 ku处出现与目的蛋白分子质量大小一致的条带,重组质粒成功在HEK293A细胞中表达。[结论]本研究基于计算机软件分析设计的PPT表位蛋白成功构建三联疫苗,且在体外表达,为评价PEDV-TGEV-PDCoV三联表位疫苗的免疫效果提供依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) 猪德尔塔冠状病毒(PDCoV) S蛋白 表位疫苗
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复合多肽制剂对肉鸡免疫功能的影响
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作者 李程 田向学 +7 位作者 李秀丽 邱大勇 任卫科 赵阳 李富强 高旭盟 董志民 孟恒星 《动物医学进展》 北大核心 2022年第12期50-55,共6页
旨在探索复合多肽制剂对于肉鸡免疫功能的影响。选取1日龄肉鸡120羽,随机分为4组(每组3个重复),于6日龄和13日龄,分别采用喷雾的方式添加0.05 mL/只(低剂量)、0.1 mL/只(中剂量)、0.15 mL/只(高剂量)的复合多肽制剂,空白对照采用生理盐... 旨在探索复合多肽制剂对于肉鸡免疫功能的影响。选取1日龄肉鸡120羽,随机分为4组(每组3个重复),于6日龄和13日龄,分别采用喷雾的方式添加0.05 mL/只(低剂量)、0.1 mL/只(中剂量)、0.15 mL/只(高剂量)的复合多肽制剂,空白对照采用生理盐水喷雾。于7、14、21、28、35、42日龄用HA/HI方法检测肉鸡新城疫病毒(NDV)抗体滴度。21、42日龄测定肉鸡免疫器官指数。采用ELISA测定7、14、21日龄肉鸡血清中细胞因子含量。复合多肽制剂能显著提高肉鸡新城疫病毒抗体水平(P<0.05),其中14日龄低剂量组和21、28日龄低剂量组和中剂量组新城疫病毒抗体滴度显著升高(P<0.05),但其对肉鸡免疫器官指数无显著影响(P>0.05)。复合多肽制剂能影响肉鸡血清细胞因子的表达水平,7日龄各试验组肉鸡血清中IL-4含量显著升高且与给药剂量正相关(P<0.05),7、14日龄试验鸡血清中IL-6含量显著降低(P<0.05),14、21日龄各剂量组IL-10含量显著下降(P<0.01)。结果表明,复合多肽制剂对肉鸡的免疫功能均具有一定的调节作用,低剂量复合多肽制剂上调新城疫病毒抗体水平效果最好。 展开更多
关键词 复合多肽 喷雾 免疫调节 肉鸡
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猪链球菌的分离鉴定及其致病性分子基础研究 被引量:27
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作者 董志民 杨春蕾 +5 位作者 田向学 燕小翠 李秀丽 张万江 刘思国 鄢明华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期96-100,共5页
为调查猪源链球菌(S.suis)血清型的流行特点、主要毒力基因的分布及致病力情况,本研究针对来自我国部分地区800份疑似S.suis发病猪的病料样品进行S.suis的分离鉴定、血清型分型、致病力试验及主要毒力基因型检测。研究结果显示,在800份... 为调查猪源链球菌(S.suis)血清型的流行特点、主要毒力基因的分布及致病力情况,本研究针对来自我国部分地区800份疑似S.suis发病猪的病料样品进行S.suis的分离鉴定、血清型分型、致病力试验及主要毒力基因型检测。研究结果显示,在800份样品中分离到41株S.suis(5.13%);其中,血清型2型或1/2型S.suis 10株(24.4%),3型6株(14.6%),8型3株(7.3%),9型7株(17.1%),21型1株(2.4%),未定型14株(34.1%);致病力试验结果显示,以1×108 cfu/mL S.suis菌液接种昆明小鼠,41个分离株中具有致死性的菌株19株,其中6株致死性较强,13株致死性较弱;毒力基因检测结果显示gdh、fbps、orf2、gapdh、sly、ef和mrp基因的检出率分别为100%、82.9%、75.6%、41.5%、39.0%、19.5%和12.2%,以gdh+orf2+fbps+gapdh型(9株)、gdh+orf2+fbps型(8株)和sly+gdh+orf2+fbps+gapdh型(6株)为主要的毒力基因型。本研究结果揭示了我国S.suis各血清型的流行情况,初步探明S.suis致病力的强弱,为深入开展S.suis防控技术研究及其致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 猪链球菌 分离鉴定 致病性 血清型 毒力基因
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核燃料元件生产线一体化转炉故障树分析与设计
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作者 慧民 董志民 《核科学与工程》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期688-693,共6页
压水堆核电站核燃料元件生产线一体化干燥转化炉(IDR转化炉)承担了水解、还原脱氟等功能的化学反应和物理反应,是干法工艺的关键设备。以往的设计均采用确定论方法,通过保守设计来保证设施的安全。为了更好地实现安全性和经济性,建立了... 压水堆核电站核燃料元件生产线一体化干燥转化炉(IDR转化炉)承担了水解、还原脱氟等功能的化学反应和物理反应,是干法工艺的关键设备。以往的设计均采用确定论方法,通过保守设计来保证设施的安全。为了更好地实现安全性和经济性,建立了以一体化干燥转化炉(IDR转化炉)的泄漏中毒为顶事件的故障树,并利用计算机软件进行分析。结果表明,导致千法转化炉泄漏从而引发人员中毒的主要因素为不可靠的通风系统和检测系统报警不及时,从而进一步建议在工程设计时,加强针对通风系统的可靠性、有毒有害气体浓度监测设施设计等主要因素的防范设计。提出的建议对今后干法工艺生产线的设计具有较强的借鉴意义,同时引入的故障树方法,可以在燃料元件生产线广泛采用,可确保在干法工艺核燃料元件生产线设计中各种因素均衡考虑,提高设计水平。 展开更多
关键词 化学危害 防护 核燃料 干法转化工艺 故障树
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高寒地区奶牛乳房炎凝固酶阴性致病葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析 被引量:11
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作者 郝俊玺 董志民 +6 位作者 王秋东 华欣 祝瑶 杨亲 鄢明华 刘思国 张万江 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期848-851,共4页
为调查高寒牧区引起奶牛乳房炎的凝固酶阴性致病葡萄球菌流行现状及耐药情况,本研究对呼伦贝尔地区3个规模化奶牛养殖场采用加州乳房炎测试法(CMT)进行高体细胞牛脂病检测,并采集330份牛奶样品,应用PCR方法、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型... 为调查高寒牧区引起奶牛乳房炎的凝固酶阴性致病葡萄球菌流行现状及耐药情况,本研究对呼伦贝尔地区3个规模化奶牛养殖场采用加州乳房炎测试法(CMT)进行高体细胞牛脂病检测,并采集330份牛奶样品,应用PCR方法、脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型和药敏试验等对样品中的葡萄球菌进行分离鉴定和耐药性分析。结果显示,该地区隐性乳房炎发病率达47.8%,共分离和鉴定出9种葡萄球菌60株(34.5%);60株葡萄球菌分为41个克隆谱型;60株葡萄球菌对青霉素和林可霉素的耐药率较高,分别为40.0%(24/60)和50.0%(30/60),表明这两种药是治疗乳房炎常用药物。本研究为高寒地区致病葡萄球菌引起的奶牛乳房炎临床合理用药及对病原菌的防控提供实验依据和指导。 展开更多
关键词 葡萄球菌 乳房炎 药敏试验 PFGE分型
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