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犬腺病毒SY-45株不同大小蚀斑特性研究 被引量:2
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作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期86-87,99,共3页
应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对... 应用蚀斑方法将 SY- 4 5毒株经过 3次蚀斑纯化直到蚀斑大小相对稳定。从不同大小的蚀斑中挑选出三种蚀斑 ,大斑直径约 3mm (简称 LP)、中斑约 2 mm(简称 MP)、小斑约 1 mm(简称 SP)。分别在 MDCK细胞上增殖并进行了三种不同大小斑毒对犬的毒力、免疫原性和在 MDCK细胞上产毒量比较 ,以筛选最佳的疫苗株 ,试验结果表明用不同大小蚀斑病毒大剂量人工感染易感犬后 ,所有的试验犬临床症状和病理解剖学和病理组织学表现均正常 ;对挑选的 4窝 CAV HI抗体效价小于等于 1 :2的健康幼犬进行免疫试验 ,测定血清的中和抗体效价和血凝抑制抗体效价 ,结果表明 :大斑毒的免疫原性要稍高于中斑毒 ,而明显高于小斑毒 ;不同大小蚀斑毒在 MDCK细胞上产毒量差异很大 ,大斑毒可达 1 0 7TCID50 / m L、小斑毒达 1 0 6 TCID50 /ml、小斑毒达 1 0 4 .5TCID50 / m L。综合所有试验结果表明 :大斑毒株具有产毒量高、安全性好、免疫原性强的优点 ,是较为理想的疫苗株。 展开更多
关键词 犬传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 蚀斑特性
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犬传染性肝炎病毒的血凝抑制抗体和中和抗体的关系 被引量:1
2
作者 范泉水 夏咸柱 +5 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 《动物医学进展》 CSCD 2002年第1期64-66,共3页
犬传染性肝炎病毒(Infectious canine hepatitis virus,ICHV)能诱导动物机体产生中和(Serum neutrolization,SN)抗体与血凝抑制(Hemagglutination... 犬传染性肝炎病毒(Infectious canine hepatitis virus,ICHV)能诱导动物机体产生中和(Serum neutrolization,SN)抗体与血凝抑制(Hemagglutination inhibition,HI)抗体,本研究对8份ICHV免疫的犬血清同时进行了其SN抗体和HI抗体的检测,结果表明SN抗体和HI抗体具有正比线性关系SN≈8×HI,并绘制了标准曲线。由于血凝和HI试验不需应用活的试验宿主系统,而且可在3 h内获得结果,操作经济简便,因此可通过测定HI抗体的效价来推算出SN抗体效价。 展开更多
关键词 传染性肝炎病毒 相关性 血浆抑制抗体 中和抗体
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犬2型腺病毒SY株的致弱驯化 被引量:2
3
作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《中国兽药杂志》 2001年第6期7-9,共3页
作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症... 作者对分离和系统鉴定的一株犬传染性喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 ) SY(沈阳 )株 ,用犬肾传代细胞 MDCK进行了致弱驯化 ,每驯化 1 5代做一次初步的犬的安全性试验 ,用大剂量不同代次病毒对易感犬进行人工感染试验 ,每天观察犬的临床症状及白细胞总数 ,并于接毒后的第 5 d安乐死 ,作病理解剖学和病理组织学检查。易感犬的感染试验结果表明 ,SY株在犬肾细胞上传 1 5代时对犬的致病力已降低 ,3 0代时对犬已不引起发烧、精神沉郁和厌食等症状 ,仅引起轻度的鼻炎、中度的咽炎 ,剖检肺表现正常 ,仅见支气管淋巴结肿大 ,45代时无临床症状 ,剖检除扁桃体肿大外没有见到其它症状 ,6 0代毒已完全失去致病力 ,未见任何临床症状及病理变化。 展开更多
关键词 2型腺病毒 传染性喉气管炎病毒 传代驯化 免疫原性 安全性 噬斑克隆
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犬2型腺病毒对犬的口服免疫研究
4
作者 范泉水 夏咸柱 +4 位作者 王度林 齐桂凤 邱薇 何洪彬 黄耕 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第4期17-19,共3页
对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬 ,随机分为 6组每组 5只 ,另设 5只对照 ,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 )的第 60代 DK细胞培养物 ( SYCAV- 2 DK60 )对犬进行口服免疫试验 ,在免疫第 4周采血分离血... 对未经犬腺病毒免疫的两月龄左右杂交狼犬 ,随机分为 6组每组 5只 ,另设 5只对照 ,用作者分离鉴定和致弱驯化的犬喉气管炎病毒 (犬 2型腺病毒 )的第 60代 DK细胞培养物 ( SYCAV- 2 DK60 )对犬进行口服免疫试验 ,在免疫第 4周采血分离血清 ,测定犬腺病毒的血凝抑制抗体 ( HI)效价 ,结果 30只试验犬全部产生了 HI抗体 ,表明 SY CAV- 2可通过口服或饵料的途径对犬实施免疫 ,为犬口服联合疫苗以及犬 2型腺病毒为载体的口服狂犬 展开更多
关键词 犬腺病毒 口服免疫 血凝抑制抗体效价 载体
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驯化克隆的CAV-2大斑株的实验免疫研究
5
作者 范泉水 夏咸柱 +6 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 余春 乔军 武银莲 殷震 《中国兽药杂志》 2002年第2期25-29,共5页
对MDCK细胞上驯化克隆产毒量高的大斑株 (LP)的第 5 0代毒和 75代毒进行了实验免疫研究 ,结果表明该毒株具有安全性好 ,通过静脉和口鼻接种CAV易感犬 ,无任何致病反应 ;用10 4 .0 TCID50 以上的该毒免疫CAV易感犬 ,即获得 97.5 %以上的... 对MDCK细胞上驯化克隆产毒量高的大斑株 (LP)的第 5 0代毒和 75代毒进行了实验免疫研究 ,结果表明该毒株具有安全性好 ,通过静脉和口鼻接种CAV易感犬 ,无任何致病反应 ;用10 4 .0 TCID50 以上的该毒免疫CAV易感犬 ,即获得 97.5 %以上的免疫保护 ;将其在CAV易感犬连续传 5代 ,其安全性与原毒相同 ,表明该毒株在 5 0~ 75代之间遗传性稳定 ,免疫原性良好 ;与CPV和CDV弱毒联合免疫 ,结果与各弱毒单独免疫所产生的抗体无差异 ,说明该毒株不但可以单独用于免疫 ,也可与其他弱毒联合免疫。是一株较好的疫苗候选株 ,具有开发应用价值。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 犬2型腺病毒 大蚀斑 免疫原性 安全性 驯化 克隆
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尖吻蝮蛇血凝酶N末端序列测定及其止血活性分析 被引量:33
6
作者 郑颖 沈居仁 +3 位作者 张富强 邱薇 冯子良 范泉水 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期365-367,共3页
目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨... 目的:测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,并对其止血活性进行分析。方法:采用Edm an法测定尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列,采用毛细管电泳估算其等电点,根据纤维蛋白出现时间和全血凝时间研究其止血活性。结果:尖吻蝮蛇血凝酶N末端氨基酸序列为VIGGNECDTNEEHFL,等电点为6.59,使用后能明显缩短纤维蛋白出现时间和全血凝时间。结论:尖吻蝮蛇血凝酶具有较强的止血活性。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇 血凝酶 氨基酸序列 止血活性
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犬细小病毒VP2基因的比较及分型研究 被引量:25
7
作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 尹惠琼 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期69-72,共4页
为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,... 为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,结果表明我国目前仍以CPV 2a流行为主。 展开更多
关键词 VP2基因 犬细小病毒 分型 CPV 免疫研究 序列分析 病毒毒株 参考毒株 变异株 流行 分离
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犬细小病毒病的研究进展 被引量:51
8
作者 宋桂强 龙贵伟 +5 位作者 廖金 聂福平 于福先 邱薇 李作生 范泉水 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期98-100,共3页
随着人民生活水平的提高,养犬、猫者日益增多,犬的疾病逐渐被人们所重视,对犬的各种疾病的研究也在不断深入。作者从病原学、流行病学、生物学特性、诊断方法及治疗等角度对犬细小病毒病的病原学研究进行综述。
关键词 犬细小病毒 病原学 流行病学 生物学特性 诊断方法
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抗竹叶青蛇毒抗体F(ab′)2的制备 被引量:6
9
作者 郑颖 张连江 +2 位作者 范泉水 邱薇 李作生 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期269-272,共4页
目的:制备特异性强、高纯度的抗竹叶青蛇毒抗体F(ab′)2。方法:以竹叶青蛇毒为免疫原免疫马,试血效价达到要求后,从免疫马血浆中先提取IgG,然后酶解、过疏水柱后得到F(ab′)2片段,以免疫扩散实验检测抗体F(ab′)2片段的特异性,以小鼠中... 目的:制备特异性强、高纯度的抗竹叶青蛇毒抗体F(ab′)2。方法:以竹叶青蛇毒为免疫原免疫马,试血效价达到要求后,从免疫马血浆中先提取IgG,然后酶解、过疏水柱后得到F(ab′)2片段,以免疫扩散实验检测抗体F(ab′)2片段的特异性,以小鼠中和试验测定其中和竹叶青蛇毒的能力。结果:纯化得到的F(ab′)2活性片段纯度可达90%;F(ab′)2冻干品与竹叶青蛇毒在8∶1时出现免疫沉淀线,在20∶1时可保护小鼠100%存活。结论:纯化得到的抗体F(ab′)2活性片段对竹叶青蛇毒具有较好的中和能力。 展开更多
关键词 竹叶青蛇毒 抗体 F(ab′)2 制备 冻干
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犬细小病毒核酸疫苗制备及免疫试验 被引量:8
10
作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 李丽红 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2006年第3期78-81,共4页
以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬... 以犬细小病毒基因组DNA为模板,应用PCR方法扩增了全长VP1基因,PCR产物经纯化和NotⅠ/BamHⅠ双酶切后与同样处理的真核表达载体pIRES进行连接,转化到感受态细胞JM109中,筛选了真核重组表达质粒pIRESVP1,并进行了序列测定。对6只9月龄犬分别接种不同剂量的pIRESVP1或空载体质粒及生理盐水,8周接种1次,每次接种前采血,测定血清的血凝抑制抗体效价,第2次免疫后即可检测到较高的血清效价。在第3次接种4周后,对全部实验犬进行攻毒,攻毒后第7天及第14天时采血,测定血清的血凝抑制抗体效价。所有接种pIRESVP1疫苗的犬均能抵抗CPV强毒的攻击,而接种空载体质粒和生理盐水的对照犬则全部发病。证明所构建的核酸疫苗(pIRESVP1)能使犬免受犬细小病毒强毒的感染。 展开更多
关键词 核酸疫苗 犬细小病毒 免疫
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云南省禽流感、新城疫与3种免疫抑制性病原共感染的检测 被引量:4
11
作者 宋建领 石凤海 +12 位作者 田建国 叶丛华 张文东 赵焕云 吕粤 岳亮 李华春 邱薇 冯子良 张思东 范泉水 张应国 张富强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第8期24-29,共6页
为调查云南省禽流感病毒、新城疫病毒与免疫抑制性病毒混合感染的情况,对云南省2007年1月~2009年10月期间145份禽流感阳性及30份新城疫阳性样品进行禽网状内皮增生病病毒(REV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及鸡传染性贫血病毒(CIAV)的检... 为调查云南省禽流感病毒、新城疫病毒与免疫抑制性病毒混合感染的情况,对云南省2007年1月~2009年10月期间145份禽流感阳性及30份新城疫阳性样品进行禽网状内皮增生病病毒(REV)、J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及鸡传染性贫血病毒(CIAV)的检测。禽流感阳性样品中ALV-J的感染阳性率为15.9%,REV的感染阳性率为22.8%,CIAV的感染阳性率为26.9%;新城疫阳性样品中ALV-J的感染阳性率为13.3%,REV的感染阳性率为23.3%,CIAV的感染阳性率为26.7%;共有30份样品发生多重感染,多重感染率为17.1%。对不同区域的4份禽白血病病毒阳性样品、10份禽网状内皮增生病病毒阳性样品、10份禽传染性贫血病毒阳性样品进行了序列比对和系统发育分析。结果表明,云南ALV-J毒株gp85基因与国内外毒株核苷酸及氨基酸同源性分别介于80.4%~96.7%、85.2%~94.5%;REV毒株env基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为98.8%~99.8%、97.7%~99.5%;CIAV毒株vp2基因核苷酸及氨基酸之间的同源性为92.4%~100.0%、93.7%~100.0%。 展开更多
关键词 禽流感病毒 新城疫病毒 GP85基因 ENV基因 VP2基因
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新城疫病毒云南分离株F基因变异特性分析 被引量:4
12
作者 宋建领 田建国 +11 位作者 叶丛华 张文东 赵焕云 吕粤 岳亮 王金萍 邱薇 冯子良 张思东 范泉水 张应国 张富强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第5期14-18,共5页
采用RT-PCR技术对云南2007年-2009年采集的948份喉气管拭子或组织样品中新城疫病毒F基因进行检测,获得阳性样品65份,选择30份代表性阳性样品采用特异性引物经RT-PCR扩增F基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统... 采用RT-PCR技术对云南2007年-2009年采集的948份喉气管拭子或组织样品中新城疫病毒F基因进行检测,获得阳性样品65份,选择30份代表性阳性样品采用特异性引物经RT-PCR扩增F基因,纯化后克隆至pMD18-T载体,并对其进行测序。序列比对及系统发育分析结果表明,新城疫病毒云南分离株F基因核苷酸与疫苗LaSota株之间的同源性为70.5%~99.8%,与F48E9株之间的同源性为70.7%~90.8%。系统发育分析表明,30株病毒中21株属于基因型Ⅶ,裂解位点氨基酸为R-R-Q-K-R-F,与传统认为强毒裂解位点氨基酸序列相同;7株属于基因型Ⅱ,5株裂解位点氨基酸为G-R-Q-G-R-L,属于弱毒株裂解位点氨基酸排列特征,2株裂解位点氨基酸为R-R-Q-K-R-F属于强毒裂解位点氨基酸序列;2株病毒与9个基因型的同源性差异较远。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 序列分析 基因型
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亨德拉病毒概况 被引量:4
13
作者 龙贵伟 宋桂强 +5 位作者 聂福平 廖金 于福先 邱薇 李作生 范泉水 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第4期96-98,共3页
关键词 亨德拉病毒 VIRUS 病毒性疾病 呼吸道疾病 人畜共患 昆士兰州 澳大利亚 地名命名
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犬细小病毒的分离鉴定 被引量:5
14
作者 杜强 邱薇 +4 位作者 范泉水 刘华 李作生 郑颖 张富强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期55-58,共4页
用猫肾(F81)细胞从沈阳某养犬场病死犬的肠内容物中,分离到1株细小病毒。根据犬细小病毒(CPV)VP2基因的核苷酸序列设计合成了两对特异性引物,对分离的病毒株进行PCR扩增,分别得到846bp和815bp的2个片段,PCR产物经纯化后测序,测序结果与G... 用猫肾(F81)细胞从沈阳某养犬场病死犬的肠内容物中,分离到1株细小病毒。根据犬细小病毒(CPV)VP2基因的核苷酸序列设计合成了两对特异性引物,对分离的病毒株进行PCR扩增,分别得到846bp和815bp的2个片段,PCR产物经纯化后测序,测序结果与GenBank中已发表的CPV参考株PLI-IV(typeFPV)、CPV-b(type2)、V154(type2a)、LCPV-V204(type2b)、LCPV-V139(type2c(a))和LCPV-V203(type2c(b))的VP2基因序列相比较,根据分析比较的数据结果,确定此株细小病毒为CPV-2a亚型。 展开更多
关键词 犬细小病毒 分离 鉴定
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尖吻蝮蛇蛇毒纤溶酶的分离纯化及氨基酸序列测定 被引量:3
15
作者 郑颖 沈居仁 +1 位作者 范泉水 邱薇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期469-471,共3页
目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶... 目的:从尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化出高纯度的纤溶酶并对其进行初步性质研究和氨基酸序列分析。方法:采用DEAE-Sepharose FF离子交换和两次Superdex75PG凝胶过滤,从尖吻蝮蛇蛇毒中纯化出可直接溶解纤维蛋白原的蛋白酶。结果:分离到的纤溶酶相对分子质量为25kD,HPLC分析纯度在97%以上,氨基酸序列分析其N末端为MSTEF QRYME IVVNHS MVKKY NGDSD KIKAW。结论:采用此工艺可从尖吻蛇毒中分离出高比活的纤溶酶,为进一步研究其药理作用奠定了基础。 展开更多
关键词 尖吻蝮蛇蛇毒 纤溶酶 纯化 氨基酸序列
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犬Ⅰ型腺病毒TN株的分离鉴定 被引量:5
16
作者 乔军 孟庆龄 +2 位作者 夏咸柱 何宏彬 范泉水 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期97-99,共3页
应用 MDCK细胞采用单层吸附接毒和带毒传代的方法 ,从新疆阿克苏送检的犬粪便中分离出 1株犬腺病毒 ,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的 TN株为 1株CAV-
关键词 犬Ⅰ型腺病毒 TN株 分离鉴定
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埃博拉病毒的研究进展 被引量:9
17
作者 聂福平 范泉水 +5 位作者 王灵强 郄翠仙 郭松辉 龙贵伟 李丽红 张念祖 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第10期65-67,共3页
埃博拉病毒是一种致死性病原体,是能引起人类和灵长类动物产生埃博拉出血热的病原。随着研究的深入,埃博拉病毒逐渐被人类认识。作者着重介绍了埃博拉病毒的分子生物学特性,以使人们更加了解埃博拉病毒。
关键词 埃博拉病毒 基因组结构 毒力 分布特性
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蛇毒神经毒素的研究进展 被引量:4
18
作者 余方芳 范泉水 +2 位作者 郑颖 邱薇 王旭东 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第10期88-90,共3页
蛇毒具有广泛的生物活性,国内外对蛇毒神经毒素的镇痛作用的研究越来越多。作者就蛇毒神经毒素的分布及分类?结构和理化性质?毒理机制及应用作一些简要概述。
关键词 蛇毒 神经毒素
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2012年-2013年云南边境禽流感病毒 H5N1亚型血凝素基因分析 被引量:2
19
作者 刘庆亮 张文东 +9 位作者 赵焕云 胡挺松 段博芳 曾伟 胡媛媛 邱薇 范泉水 张应国 宋建领 张富强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第6期96-102,共7页
为了解2012年-2013年云南边境禽流感病毒 H5N1亚型血凝素(HA)基因变异及进化特征,在云南边境采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品1500份,经禽流感病毒 H5N1亚型特异性多重 RT-PCR 检测,选择代表性阳性样品,进行病毒 HA 基因扩增、... 为了解2012年-2013年云南边境禽流感病毒 H5N1亚型血凝素(HA)基因变异及进化特征,在云南边境采集境外家禽和野生鸟类棉拭子样品1500份,经禽流感病毒 H5N1亚型特异性多重 RT-PCR 检测,选择代表性阳性样品,进行病毒 HA 基因扩增、纯化、克隆和测序,并与已知毒株和参考毒株序列进行序列比对及系统遗传进化分析。结果自1500份样品中检出 H5N1亚型阳性样品60份,60份阳性样品病毒 HA基因测序获得23种 HA 序列,可划分为2个不同进化分支(2.3.2,2.3.4),2.3.2进一步可划分为3个进化小分支(Ⅱ-1~Ⅱ-3),在23份代表性阳性样品中,17份样品属于进化小分支2.3.2Ⅱ-1,3份属于2.3.2Ⅱ-2,其余3份属于2.3.4;阳性样品中病毒 HA 裂解位点序列均具有高致病性禽流感病毒分子结构特征,HA受体结合位点、糖基化位点、表位关键性氨基酸位点及其他氨基酸位点存在变异,部分位点的变异具有分支或亚(小)分支特异性。2012年-2013年期间云南边境禽流感病毒 H5N1亚型间具有遗传差异,进化分支2.3.2Ⅱ-1成为当地流行的优势毒株。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H5N1亚型 血凝素 分子特征
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犬瘟热病毒Yunnan株H基因的克隆与表达 被引量:3
20
作者 聂福平 李作生 +10 位作者 邱薇 张富强 张连江 宋贵强 龙贵伟 廖金 任玉莹 余方芳 张泉鹏 王灵强 范泉水 《动物医学进展》 CSCD 2008年第1期9-12,共4页
根据已发表的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的序列设计两对引物,以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增出H基因的939 bp(H基因前段,H1)和920 bp(H基因后段,H2)片段,分别将其定向克隆于PET-28a(+)中,... 根据已发表的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株的序列设计两对引物,以犬瘟热病毒云南株感染的Vero细胞收获病毒提取的总RNA为模板,RT-PCR扩增出H基因的939 bp(H基因前段,H1)和920 bp(H基因后段,H2)片段,分别将其定向克隆于PET-28a(+)中,将重组质粒转化宿主菌BL21(DE3)plysS,在35℃1、.0 mmol/L IPTG诱导下获得良好表达,经SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白为34 ku,与预期大小一致。免疫印迹试验显示,该重组蛋白可被CDV Onderstepoort株多克隆抗体识别,表明该重组蛋白具有抗原性。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 H基因 克隆与表达 免疫印迹
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