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猪流行性腹泻病毒S1蛋白的原核表达及其核酸适配体的筛选
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作者 张冬萱 王智豪 +3 位作者 乔岩 赵肖肖 范松杰 张超 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期839-850,共12页
本文旨在可溶性原核表达猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1蛋白的C端结合域(S1-CTD),并利用指数富集的配体系统进化技术筛选靶向S1-CTD蛋白的DNA适配体,为该病毒治疗药物的开发以及检测方法的建立奠定基础。采... 本文旨在可溶性原核表达猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S1蛋白的C端结合域(S1-CTD),并利用指数富集的配体系统进化技术筛选靶向S1-CTD蛋白的DNA适配体,为该病毒治疗药物的开发以及检测方法的建立奠定基础。采用大肠杆菌原核表达系统,将PEDV-S1-CTD质粒与带有麦芽糖结合蛋白(MBP)、小分子泛素样修饰蛋白(SUMO)、反转录终止因子(NusA)、谷胱甘肽巯基转移酶(GST)四种促溶标签的原核表达载体pET21b连接,构建重组质粒pET21b-MBP-S1、pET21b-SUMO-S1、pET21b-NusA-S1、pET21b-GST-S1,将双酶切鉴定和测序正确的重组质粒转入大肠杆菌BL21进行诱导表达,选择可溶性好且表达量高的rMBP-S1重组蛋白进行后续试验,Western blot结果显示该重组蛋白正确表达,间接免疫荧光试验(IFA)结果表明rMBP-S1能与细胞表面受体结合。随后经磁珠法筛选得到111条靶向rMBP-S1重组蛋白的候选DNA适配体,其中Apt-S1-3、Apt-S1-11富集程度最高,分别是18%和16.2%,酶联适配体吸附试验ELASA(enzyme-linked aptamer sorbent assays,ELASA)测定适配体Apt-S1-3的解离常数为2.09 nmol,并且该适配体不与rMBP蛋白、rMBP-gD蛋白、rMBP-GP5蛋白以及BSA蛋白发生交叉反应,表明该适配体具有高亲和力与高特异性。此外,使用在线软件Mfold分析适配体Apt-S1-3形成的二级结构,并且通过分子对接模拟,发现该适配体能够与靶标蛋白形成稳定的复合物。最后的间接免疫荧光试验表明适配体Apt-S1-3能够识别PEDV,流式细胞术试验证实该适配体能够抑制PEDV感染宿主细胞。本研究筛选得到的DNA适配体能够与猪流行性腹泻病毒S1-CTD蛋白高亲和力、高特异性结合,而且能够抑制猪流行性腹泻病毒感染细胞,为PEDV的靶向治疗和检测方法开发奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S1-CTD蛋白 磁珠法 核酸适配体 亲和力
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价值链视角下饲料企业人才激励机制研究 被引量:3
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作者 彭华 范松杰 《中国饲料》 北大核心 2021年第9期102-105,共4页
受持续的贸易战、非洲猪瘟、禁抗政策以及新冠疫情的影响,我国饲料行业大中型企业加快了产品、市场、服务以及商业模式转型升级步伐,小型企业加速退出。此轮商业模式转型的趋势为通过纵向上下游的扩张或横向多元化为下游客户创造更多价... 受持续的贸易战、非洲猪瘟、禁抗政策以及新冠疫情的影响,我国饲料行业大中型企业加快了产品、市场、服务以及商业模式转型升级步伐,小型企业加速退出。此轮商业模式转型的趋势为通过纵向上下游的扩张或横向多元化为下游客户创造更多价值,从而重塑饲料企业在价值链中的位置。在此转型过程中,企业人才激励机制则是人才管理的重中之重。本文从饲料行业价值链的视角出发,总结了饲料企业的人才现状,分析了传统饲料企业人才激励机制存在的问题,并从短期激励、长期激励、非物质激励方面阐述了饲料企业应该如何建立适应新商业模式的人才激励机制。 展开更多
关键词 价值链 饲料企业 人才培养 激励机制
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我国房地产价格对城市商业银行稳定性的影响
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作者 范松杰 张奉君 《濮阳职业技术学院学报》 2020年第6期13-15,20,共4页
我国房地产行业的迅速发展在为城市商业银行带来丰厚利润的同时,房地产“市场化”的长效机制又可能会使房地产行业贷款集中度较高的城市商业银行的风险充分暴露。房地产价格影响城市商业银行稳定性的传导途径中,房价下跌和房价偏离均增... 我国房地产行业的迅速发展在为城市商业银行带来丰厚利润的同时,房地产“市场化”的长效机制又可能会使房地产行业贷款集中度较高的城市商业银行的风险充分暴露。房地产价格影响城市商业银行稳定性的传导途径中,房价下跌和房价偏离均增加了其不稳定性,但房价下跌的作用力要大得多。在抵押效应的作用下,当房地产泡沫破裂,房价持续下跌时,房地产作为抵押品的价值会持续缩水,企业与个人的还贷违约会给城市商业银行增添巨大的风险,并持续地暴露出其脆弱性。 展开更多
关键词 房地产价格 城市商业银行 稳定性 抵押效应 偏离效应
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河南省城镇居民商品住房支付能力研究
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作者 范松杰 《三门峡职业技术学院学报》 2020年第3期107-112,共6页
伴随收入悬殊、贫富差距的加剧,高企的房价,使低收入群体购买住房变得愈加困难。住房究竟给居民带来了多大压力?对居民的消费结构造成了多大程度的影响?究竟有多大比例的城镇居民对于商品房具有可支付能力?针对这些问题,笔者采用剩余收... 伴随收入悬殊、贫富差距的加剧,高企的房价,使低收入群体购买住房变得愈加困难。住房究竟给居民带来了多大压力?对居民的消费结构造成了多大程度的影响?究竟有多大比例的城镇居民对于商品房具有可支付能力?针对这些问题,笔者采用剩余收入法对河南省城镇居民2014~2017年的商品房可支付能力做了测度分析。可以发现:低收入群体对60m2的商品房支付能力不足,这部分群体应该被纳入住房保障的范围之内。在实证分析的基础上,笔者通过采用GM(1,1)方法,预测了河南省2019~2023年的城镇居民户数,按照20%的保障比例,推算出河南省城镇居民中需要保障的户数依次为375.88万、389.24万、403.06万、417.42万和432.23万。 展开更多
关键词 商品房 住房可支付能力 剩余收入法 GM(1 1)
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